周厚清,　吳行貴

糖尿病患者GAD-Ab、IA2-Ab和ICA聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義

周厚清1,吳行貴2

(1. 深圳市第二人民醫(yī)院，廣東 深圳 518035; 2. 廣東醫(yī)學(xué)院，廣東 東莞 523000)

摘要：目的探討抗谷氨酸脫羧酶抗體(GAD-Ab)、抗酪氨酸磷酸酶抗體(IA2-Ab)和抗胰島細(xì)胞抗體(ICA)聯(lián)合檢測(cè)在糖尿病中的臨床意義。方法選擇糖尿病患者136例，其中1型糖尿病54例、2型糖尿病82例，同時(shí)選擇健康對(duì)照者(正常對(duì)照組)65名，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)GAD-Ab和IA2-Ab，并采用間接免疫熒光法檢測(cè)ICA。結(jié)果1型糖尿病組ICA、GAD-Ab和IA2-Ab的陽(yáng)性率分別為22.2%、61.1%和11.1%，明顯高于2型糖尿病組(2.4%、4.9%、1.2%)及正常對(duì)照組(0%、0%、0%)(P均<0.05)。1型糖尿病組GAD-Ab陽(yáng)性率明顯高于ICA和IA2-Ab(P<0.001)。GAD-Ab診斷1型糖尿病的敏感性和診斷符合率均高于ICA和IA2-Ab(P<0.05)；GAD-Ab+ICA、GAD-Ab+IA2-Ab、ICA+GAD-Ab+IA2-Ab聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和診斷符合率亦均高于ICA和IA2-Ab單項(xiàng)檢測(cè)(P<0.05)。結(jié)論GAD-Ab、IA2-Ab和ICA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)糖尿病的診斷分型具有一定的意義。

關(guān)鍵詞：抗谷氨酸脫羧酶抗體；抗酪氨酸磷酸酶抗體；抗胰島細(xì)胞抗體；糖尿病

Clinical significance of the combined detection of GAD-Ab, IA2-Ab and ICA in patients with diabetes mellitusZHOUHouqing1，WUXinggui2

.(1.TheSecondPeople′sHospitalofShenzhen,GuangdongShenzhen518035,China; 2.TheMedicalCollegeofGuangdong,GuangdongDongguan523000,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the clinical significance of the combined detection of anti-glutamic acid decarboxylase antibody(GAD-Ab), anti-protein tyrosine phosphatase antibody(IA2-Ab) and anti-islet cell antibody(ICA) in the diagnosis of diabetes mellitus. MethodsA total of 136 patients with diabetes mellitus were enrolled, including 54 cases of type 1 diabetes mellitus and 82 cases of type 2 diabetes mellitus, and 65 healthy controls were enrolled as healthy control group. GAD-Ab and IA2-Ab were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and ICA was determined by indirect immunofluorescence assay. ResultsThe positive rates of ICA, GAD-Ab and IA2-Ab in patients with type 1 diabetes mellitus(22.2%, 61.1% and 11.1%) were significantly higher than those in patients with type 2 diabetes mellitus (2.4%, 4.9% and 1.2%) and control group (0%, 0% and 0%, P<0.05). The positive rate of GAD-Ab in patients with type 1 diabetes mellitus was higher than those of ICA and IA2-Ab(P<0.001). The sensitivity and diagnostic accordance rate of GAD-Ab were higher than those of ICA and IA2-Ab(P<0.05). The sensitivities and diagnostic accordance rates of the combined detections of GAD-Ab+ICA, GAD-Ab+IA2-Ab and ICA+GAD-Ab+IA2-Ab were also higher than those of ICA and IA2-Ab(P<0.05). ConclusionsThe combined detection of GAD-Ab, IA2-Ab and ICA has important significance in the diagnosis and classification of diabetes mellitus.

Key words:Anti-glutamic acid decarboxylase antibody; Anti-protein tyrosine phosphatase antibody; Anti-islet cell antibody; Diabetes mellitus

糖尿病是以高血糖為特征、以糖代謝紊亂為主要臨床表現(xiàn)的慢性代謝性疾病。隨著糖尿病的深入研究，抗谷氨酸脫羧酶抗體(anti-glutamic acid decarboxylase antibody, GAD-Ab)、抗酪氨酸磷酸酶抗體(anti-protein tyrosine phosphatase antibody, IA2-Ab)、抗胰島細(xì)胞抗體(anti-islet cell antibody, ICA)等多種針對(duì)胰島相關(guān)分子的自身抗體可以作為對(duì)1型糖尿病診斷和分型的臨床免疫學(xué)指標(biāo)[1]，同時(shí)也是1型和2型糖尿病鑒別診斷的重要指標(biāo)。糖尿病早期分型對(duì)1型糖尿病早期免疫干預(yù)和胰島素治療的開(kāi)展具有重要價(jià)值。我們通過(guò)檢測(cè)糖尿病患者GAD-Ab、IA2-Ab和ICA，探討這3種自身抗體在糖尿病診斷分型中的臨床意義。

材料和方法

一、研究對(duì)象

選取深圳市第二人民醫(yī)院內(nèi)分泌科糖尿病患者136例，男95例，女41例，年齡12～81歲，其中1型糖尿病患者54例、2型糖尿病患者82例，均按世界衛(wèi)生組織1999年糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)確診。另選65名體檢健康、糖耐量正常者為正常對(duì)照組，男45名，女20名，年齡20～65歲，排除心、腦、肝、腎等慢性疾病及內(nèi)分泌疾病，無(wú)糖尿病既往病史、家族史及其它自身免疫性疾病病史。

二、GAD-Ab、IA2-Ab及ICA檢測(cè)方法

GAD-Ab和IA2-Ab采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)，ICA采用間接免疫熒光法檢測(cè)，試劑盒均購(gòu)自德國(guó)EUROIMMUN公司，操作嚴(yán)格按試劑說(shuō)明書進(jìn)行。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以百分率表示，各組間比較采用χ2檢驗(yàn)。將1型糖尿病患者血清ICA、GAD-Ab和IA2-Ab的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行不同的組合，其中單項(xiàng)3種、雙項(xiàng)3種、3項(xiàng)1種，雙項(xiàng)和3項(xiàng)中只要有1項(xiàng)陽(yáng)性即判定為陽(yáng)性。采用矩陣決策法分析，3項(xiàng)指標(biāo)不同組合對(duì)1型糖尿病的敏感和診斷符合率。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

一、糖尿病各組及正常對(duì)照組血清ICA、GAD-Ab和IA2-Ab陽(yáng)性率比較

1型糖尿病組ICA、GAD-Ab和IA2-Ab陽(yáng)性率均明顯高于2型糖尿病組及正常對(duì)照組(P均<0.05)。1型糖尿病組GAD-Ab陽(yáng)性率亦明顯高于ICA和IA2-Ab(P<0.001)。見(jiàn)表1。

表1　3組血清ICA、GAD-Ab和IA2-Ab陽(yáng)性率比較　(%)

注：與1型糖尿病組比較，*P<0.05；與GAD-Ab比較，#P<0.001

二、血清ICA、GAD-Ab和IA2-Ab對(duì)1型糖尿病的診斷率

GAD-Ab診斷1型糖尿病的敏感性和診斷符合率均高于ICA和IA2-Ab(P<0.05)，GAD-Ab+ICA、GAD-Ab+IA2-Ab、ICA+GAD-Ab+IA2-Ab聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和診斷符合率亦均高于ICA和IA2-Ab單項(xiàng)檢測(cè)(P<0.05)。

表2　ICA、GAD-Ab和IA2-Ab對(duì)1型糖尿病的診斷性能　(%)

注：與IA2-Ab比較，*P<0.05;與ICA比較，#P<0.05

討論

目前1型糖尿病有別于2型糖尿病的主要特征是1型糖尿病胰島β細(xì)胞分泌胰島素功能受損，出現(xiàn)自身的免疫紊亂現(xiàn)象，是一種免疫介導(dǎo)的疾病。1型糖尿病細(xì)胞免疫和體液免疫均有異常，表現(xiàn)為體內(nèi)出現(xiàn)多種胰島自身抗體，如GAD-Ab、IA2-Ab和ICA等。谷氨酸脫羧酶(glutamic acid decarboxylase，GAD)是胰島β細(xì)胞、胃、胸腺、睪丸、卵巢等非神經(jīng)組織的合成酶，但只有在胰腺和大腦組織提取的GAD才能與1型糖尿病的血清起免疫反應(yīng)，提示其免疫源性不同于其它組織[2]。GAD能催化谷氨酸脫羧生成γ-氨基丁酸，參與胰島β細(xì)胞合成與分泌胰島素，也是免疫反應(yīng)關(guān)鍵的始動(dòng)靶抗原。胰島素能抑制其引起的特異性自身免疫反應(yīng)，誘導(dǎo)免疫耐受[3-4]。GAD-Ab是目前診斷成人隱匿性自身免疫糖尿病的首選免疫學(xué)指標(biāo)[5]。本研究結(jié)果顯示1型糖尿病組GAD-Ab陽(yáng)性率明顯高于2型糖尿病組和正常對(duì)照組(P<0.05)，且GAD-Ab的陽(yáng)性率、敏感性及診斷符合率均明顯高于ICA和IA2-Ab(P<0.05)與文獻(xiàn)報(bào)道[7]相符。提示GAD-Ab對(duì)于糖尿病分型的價(jià)值高于ICA和IA2-Ab。這可能是因?yàn)镚AD-Ab可在患者出現(xiàn)1型糖尿病臨床表現(xiàn)前數(shù)年甚至十余年即可出現(xiàn)，并且在診斷后以穩(wěn)定濃度持續(xù)存在[6]。ICA作為抗胰島β細(xì)胞抗體，其陽(yáng)性率雖不及GAD-Ab，但相對(duì)于2型糖尿病與正常對(duì)照組，它在1型糖尿病中的陽(yáng)性率顯著升高(P<0.05)。ICA對(duì)少年患者有較高的診斷價(jià)值，但隨著病情進(jìn)展，其陽(yáng)性率下降很快，診斷價(jià)值也隨之降低[8-9]。然而，ICA是唯一能針對(duì)性破壞胰島β細(xì)胞成分的特異性抗體，其陽(yáng)性預(yù)示著β細(xì)胞的自身免疫損傷，可作為1型糖尿病的高危指標(biāo)之一[5]。IA2-Ab是與胰島結(jié)合分泌功能相關(guān)的抗體，是胰島免疫的早期成分。IA2-Ab的靶抗原是利用1型糖尿病患者或前驅(qū)期患者的血清篩選胰島細(xì)胞cDNA文庫(kù)得到的新的β細(xì)胞自身抗原，能反映由于胰島β細(xì)胞損壞而導(dǎo)致的早期發(fā)病。此作用比GAD-Ab更具有特異性，但抗體的陽(yáng)性檢出率可隨病程的延長(zhǎng)而減低[3]，這也是IA2-Ab陽(yáng)性率低于GAD-Ab的原因。單項(xiàng)檢測(cè)可能會(huì)導(dǎo)致漏診，而聯(lián)合檢測(cè)能降低漏診風(fēng)險(xiǎn)。本研究結(jié)果顯示GAD-Ab+ICA、GAD-Ab+IA2-Ab、ICA+GAD-Ab+IA2-Ab聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和診斷符合率明顯高于ICA和IA2-Ab單項(xiàng)檢測(cè)(P<0.05)。由此可見(jiàn)，當(dāng)ICA、IA2-Ab和GAD-Ab聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，其敏感性和診斷符合率均明顯提高，同時(shí)利用ICA和IA2-Ab特異性高的特點(diǎn)，可有效排除GAD-Ab陽(yáng)性是由腦部疾病引起的可能性。因此，GAD-Ab、IA2-Ab和ICA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)糖尿病診斷分型具有重要價(jià)值，建議在臨床廣泛開(kāi)展。

綜上所述，糖尿病是常見(jiàn)病，發(fā)病率高，而且呈年輕化趨勢(shì)。早期診斷治療能有效地控制病情的發(fā)展，提高患者的生活質(zhì)量。GAD-Ab、IA2-Ab和ICA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)糖尿病診斷分型具有重要價(jià)值，可早期發(fā)現(xiàn)1型糖尿病的發(fā)生，對(duì)1型糖尿病早期免疫干預(yù)和胰島素治療的開(kāi)展以及在高危人群中的篩查均有重要的臨床意義。

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(本文編輯：范基農(nóng))

收稿日期：(2015-01-20)

中圖分類號(hào)：

文章編號(hào)：1673-8640(2015)05-0465-003R446.5

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：ADOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2015.05.014

作者簡(jiǎn)介：周厚清，男，1969年生，博士，主任技師，主要從事自身免疫檢驗(yàn)工作。