程 利

肺結(jié)核是臨床上呼吸內(nèi)科的常見病。此病患者的主要臨床表現(xiàn)為低熱、盜汗、消瘦、乏力、咳痰和咳血等，可嚴(yán)重影響其生活質(zhì)量。因此，對(duì)肺結(jié)核患者進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的診斷具有非常重要的臨床價(jià)值[1]。相關(guān)的臨床實(shí)踐證實(shí)，用T-SPOT.TB試驗(yàn)診斷肺結(jié)核可取得很好的效果[2]。為了進(jìn)一步證實(shí)此診斷方法的有效性，筆者對(duì)2014年6月至2015年8月期間在我院經(jīng)結(jié)核分枝桿菌分離培養(yǎng)試驗(yàn)證實(shí)患有肺結(jié)核的32例患者的臨床資料進(jìn)行回顧性研究?，F(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究的對(duì)象為2014年6月至2015年8月期間在我院經(jīng)結(jié)核分枝桿菌分離培養(yǎng)試驗(yàn)證實(shí)患有肺結(jié)核的32例患者和同期在我院進(jìn)行常規(guī)體檢的16例健康人。我們將32例肺結(jié)核患者作為肺結(jié)核組，將16例健康人作為健康組。在肺結(jié)核組32例患者中，有女性17例，男性15例。他們的年齡在14歲至74歲之間，平均年齡為（47.25±4.17）歲。在健康組16例健康人中，有女性7例，男性9例。他們的年齡在15歲至77歲之間，平均年齡為（48.18±5.72）歲。

1.2 試驗(yàn)方法

為這兩組人均進(jìn)行T-SPOT.TB試驗(yàn)和PPD試驗(yàn)。進(jìn)行T-SPOT.TB試驗(yàn)的方法是：（1）使用由上海復(fù)星科技有限公司生產(chǎn)的T-SPOT.TB 試劑盒對(duì)受檢者進(jìn)行T-SPOT.TB試驗(yàn)。（2）經(jīng)受檢者的肘正中靜脈采集其靜脈血6ml。（3）使用適量的肝素對(duì)受檢者的血樣進(jìn)行抗凝處理。（4）對(duì)血樣中的PBMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞)進(jìn)行分離處理。（5）將 AIM-V培養(yǎng)液（干細(xì)胞無血清培養(yǎng)液） 加入到血樣中，使用五分類計(jì)數(shù)儀對(duì)血樣中的PBMC進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后將血樣中PBMC的濃度稀釋至 2.5 × 105 個(gè) /ml。（6）將 50 μl的抗原 B（CFP-10）、50 μl的結(jié)核桿菌特異性抗原 A（ESAT-6）、50 μl的植物血凝素（PHA）和50 μl的AIM-V培養(yǎng)液分別加入到抗體微孔板的抗原 B 檢測孔、抗原A檢測孔、PHA 對(duì)照孔及陰性對(duì)照孔中，然后在每個(gè)微孔中加入100 μl的血樣。（7）將抗體微孔板置于37攝氏度、二氧化碳濃度為5.0%的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，進(jìn)行培養(yǎng)的時(shí)間為15～20個(gè)小時(shí)。（8）使用PBS溶液對(duì)抗體微孔板進(jìn)行洗滌，然后在每個(gè)微孔中加入50μl的顯色溶液，然后將抗體微孔板靜置5～10min。（9）使用蒸餾水對(duì)抗體微孔板進(jìn)行洗滌，然后對(duì)各個(gè)微孔中的斑點(diǎn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。進(jìn)行PPD 試驗(yàn)的方法是：（1）使用由北京祥瑞生物有限公司生產(chǎn)的卡介菌純蛋白衍生物試劑對(duì)受檢者進(jìn)行PPD 試驗(yàn)。（2）在受檢者左前臂的尺側(cè)注射0.1 ml的卡介菌純蛋白衍生物試劑。（3）在注射完成72小時(shí)后，對(duì)受檢者注射部位硬結(jié)的直徑進(jìn)行測量。

1.3 試驗(yàn)結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 T-SPOT.TB試驗(yàn)結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)[3]受檢者進(jìn)行T-SPOT.TB試驗(yàn)的結(jié)果符合以下兩種情況之一即可判定為陽性。（1）陰性對(duì)照孔中的顯色點(diǎn)數(shù)少于6個(gè)，且檢測孔中的顯色點(diǎn)數(shù)與陰性對(duì)照孔中的顯色點(diǎn)數(shù)之差大于或等于6個(gè)。（2）陰性對(duì)照孔中的顯色點(diǎn)數(shù)多于或等于6個(gè)，但檢測孔中的顯色點(diǎn)數(shù)大于陰性對(duì)照孔中顯色點(diǎn)數(shù)的二倍。

1.3.2 PPD 試驗(yàn)結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)[4]（1）陰性：受檢者注射部位硬結(jié)的[(縱向直徑+橫向直徑)/2]的值小于5.0 mm。（2）受檢者注射部位硬結(jié)的[(縱向直徑+橫向直徑)/2]的值大于或等于5.0 mm。

1.4 敏感度和特異度的計(jì)算方法[5]

（1）敏感度=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）（2）特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

我們使用SPSS16.0軟件包對(duì)本次實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)量資料以（X ±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用n(%)表示，采用x2檢驗(yàn)，用P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 用T-SPOT.TB試驗(yàn)、PPD試驗(yàn)診斷肺結(jié)核敏感度和特異度的比較

用T-SPOT.TB試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的敏感度、特異度分別為96.55%和78.95%，用PPD試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的敏感度、特異度分別為79.31%和52.63%。用T-SPOT.TB試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的敏感度和特異度均明顯高于用PPD試驗(yàn)進(jìn)行診斷的敏感度和特異度，二者相比差異具有顯著性（P＜0.05）。詳細(xì)結(jié)果見表1。

2.2 用T-SPOT.TB試驗(yàn)和PPD試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的

ROC曲線 使用ROC曲線分析法評(píng)價(jià)用T-SPOT.TB試驗(yàn)和PPD試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的效果。進(jìn)行ROC曲線分析的結(jié)果顯示，用T-SPOT.TB試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的效果明顯優(yōu)于用PPD試驗(yàn)進(jìn)行診斷的效果。詳細(xì)結(jié)果見圖1。

表1 用T-SPOT.TB試驗(yàn)和PPD試驗(yàn)診斷肺結(jié)核敏感度和特異度的比較 ［n（%）］

3 討論

肺結(jié)核是臨床上呼吸內(nèi)科的常見病。此病患者的主要臨床表現(xiàn)為低熱、盜汗、消瘦、乏力、咳痰和咳血等，可嚴(yán)重影響其生活質(zhì)量。因此，對(duì)肺結(jié)核患者進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的診斷具有非常重要的臨床價(jià)值。近年來，隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，使用T-SPOT.TB試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的方法逐漸得到了臨床上的認(rèn)可。為了進(jìn)一步探討進(jìn)行T-SPOT.TB試驗(yàn)在診斷肺結(jié)核方面的臨床價(jià)值，筆者將2014年6月至2015年8月期間在我院經(jīng)結(jié)核分枝桿菌分離培養(yǎng)試驗(yàn)證實(shí)患有肺結(jié)核的32例患者作為肺結(jié)核組，再選取同期在我院進(jìn)行常規(guī)體檢的16例健康人作為健康組。為這兩組人均進(jìn)行T-SPOT.TB試驗(yàn)和PPD試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)束后，比較用T-SPOT.TB試驗(yàn)和PPD試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的敏感度和特異度。本次研究的結(jié)果顯示，用T-SPOT.TB試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的敏感度、特異度分別為96.55%和78.95%，用PPD試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的敏感度、特異度分別為79.31%和52.63%。用T-SPOT.TB試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的敏感度和特異度均明顯高于用PPD試驗(yàn)進(jìn)行診斷的敏感度和特異度。

綜上所述，進(jìn)行T-SPOT.TB試驗(yàn)在診斷肺結(jié)核方面具有非常重要的臨床價(jià)值。此診斷方法值得在臨床上推廣應(yīng)用。

[1] 顧國林,周芬,郭健,等. T-SPOT.TB 試驗(yàn)診斷菌陽及菌陰肺結(jié)核的價(jià)值[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2015,31(9):1535-1536.

[2] 張立華,靳文香,賈紅彥,等. T- SPOT 與結(jié)核菌素試驗(yàn)對(duì)結(jié)核病患者的臨床診斷價(jià)值[J].中華臨床醫(yī)師雜志,2012,6(14):4107-4108.

[3] 榮蘭香,馬淑紅,艾清,等.T. SPOT- TB 試驗(yàn)與 PPD 試驗(yàn)對(duì)結(jié)核病患者診斷價(jià)值相關(guān)性比較[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2013,17(8):1475-1476.

[4] 江道斌,溫澍,齊曼古力·吾守爾,等.結(jié)核感染 T 淋巴細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在菌陰肺結(jié)核診斷中價(jià)值[J].中華實(shí)用診斷與治療雜志,2013,27(10):1037.

[5] 張玉平,丁顯平,張麗媛,等. T- SPOT. TB、 痰涂片和 TBDNA 檢測在肺結(jié)核診斷中的比較研究[J].成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2013,8(1):49-51.