作者單位：1.100040呼和浩特，武警內(nèi)蒙古總隊(duì)醫(yī)院：1.門(mén)診部，2.骨科；3.100029，首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院心外科；4. 430060，武漢大學(xué)人民醫(yī)院

急性胰腺炎34例血清β-半乳糖苷酶活性水平變化及其意義分析

鞏俊卿1，云文科2，楊波3,4

【關(guān)鍵詞】急性胰腺炎；β-半乳糖苷酶；APACHEⅢ評(píng)分；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

通訊作者：楊波，E-mail：yangbohoo@126.com

【中國(guó)圖書(shū)分類(lèi)號(hào)】R657.51

急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)是常見(jiàn)急腹癥，輕型時(shí)胰腺充血、水腫；嚴(yán)重者胰腺組織出血、壞死，并引起全身炎性反應(yīng)綜合征，甚至多臟器功能衰竭，病死率高達(dá)20%～40%[1，2]。維生素D結(jié)合蛋白(vitamin D binding protein，DBP)是分子量為51～58 ku的多功能血漿糖蛋白，多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，DBP水平與胰腺炎的病情相關(guān)，且在多種疾病(如膿毒血癥、爆發(fā)性肝細(xì)胞壞死、慢性阻塞性肺病)的發(fā)病過(guò)程中發(fā)生轉(zhuǎn)變[3-5]。β-半乳糖苷酶是一種糖基轉(zhuǎn)移酶，可在局部炎性反應(yīng)時(shí)作用于DBP，從而引起一系列的級(jí)聯(lián)反應(yīng)[6]。本研究旨在探討β-半乳糖苷酶水平的高低與AP患者病情嚴(yán)重程度的關(guān)系，為臨床治療提供理論依據(jù)。

1　臨床資料

1.1一般資料選擇武漢大學(xué)人民醫(yī)院肝膽腔鏡外科2012-05至2013-05收治的34例AP患者，男18例，女16例，年齡29～72歲，平均(41.6±7.4)歲。均符合2007年中國(guó)重癥AP診治指南中的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]。

1.2排除標(biāo)準(zhǔn)(1)發(fā)病時(shí)間超過(guò)2 d的AP患者；(2)復(fù)發(fā)性AP患者；(3)發(fā)病前即有肝、肺、腎等重要器官功能不全的患者；(4)患有慢性炎性反應(yīng)、腫瘤等基礎(chǔ)疾病者；(5)發(fā)病期間同時(shí)患有感冒等呼吸道傳染性疾病者。

1.3分組根據(jù)文獻(xiàn)[8]報(bào)道，將APACHEⅢ評(píng)分≥35分、陽(yáng)性指標(biāo)項(xiàng)≥6項(xiàng)的患者認(rèn)定為重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)組，共21例；另外13例則為輕型急性胰腺炎(mild acute pancreatitis，MAP)組。對(duì)照組為常規(guī)體檢、結(jié)果無(wú)陽(yáng)性項(xiàng)目且不患有任何基礎(chǔ)疾病者，共20例，其中男10例，女10例，年齡25～73歲，平均(39.8±6.8)歲。

1.4方法

1.4.1實(shí)驗(yàn)材料人β半乳糖苷酶酶聯(lián)免疫分析試劑盒(Human β-galactosidase,βGAL ELISA Kit，CSB-E09463h)：武漢華美生物工程有限公司(CUSABIO)。SZ-97自動(dòng)三重純水蒸餾器：上海亞榮生化儀器廠。Beckman離心機(jī)(JM-6)：美國(guó)Beckman公司。Eppendorf 1000 μl、200 μl、10 μl自動(dòng)移液器：德國(guó)Eppendorf公司。BS60三用恒溫水箱：北京醫(yī)療設(shè)備廠。300 ℃恒溫烘箱：北京醫(yī)療設(shè)備廠。OLMPUS AU2700全自動(dòng)生化分析儀：日本OLMPUS公司。真空采血管：Vacutainer紫頭管(血常規(guī)檢測(cè)用)，黃頭管(血清檢測(cè)用)，藍(lán)頭管(凝血功能檢測(cè)用)，均由美國(guó)BD公司提供。酶標(biāo)儀：美國(guó)BIO-RAD公司。

1.4.2實(shí)驗(yàn)方法

1.4.2.1血常規(guī)及生化指標(biāo)測(cè)定動(dòng)靜脈全血標(biāo)本及血清標(biāo)本于武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科行血常規(guī)、血生化、淀粉酶、脂肪酶及動(dòng)脈血?dú)夥治鰴z測(cè)，根據(jù)結(jié)果行APACHEⅢ評(píng)分。

1.4.2.2血清β-半乳糖苷酶活性水平檢測(cè)AP組患者收集其入院后首次采血時(shí)標(biāo)本。對(duì)照組收集體檢時(shí)任一檢查采血標(biāo)本，以人β半乳糖苷酶Elisa試劑盒測(cè)定各樣本β半乳糖苷酶活性水平(U/ml)。以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。再以待測(cè)標(biāo)本的OD值根據(jù)方程計(jì)算各標(biāo)本的β-半乳糖苷酶活性濃度，最后乘以稀釋倍數(shù)，即為各臨床血清標(biāo)本β-半乳糖苷酶的實(shí)際活性濃度。

1.6結(jié)果與對(duì)照組比較，MAP組和SAP組血清β-半乳糖苷酶活性明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。SAP組血清β-半乳糖苷酶活性明顯低于MAP組(P<0.05)，SAP組APACHEⅢ評(píng)分明顯高于MAP組(P<0.05，表1)。

表1各組急性胰腺炎標(biāo)本血清β-半乳糖苷酶活性水平及APACHEⅢ評(píng)分情況

組別β-半乳糖苷酶活性(U/ml)APACHEⅢ評(píng)分(分)對(duì)照組8.38±1.79-MAP組5.48±2.02①30.08±3.20SAP組3.03±1.41①②48.52±15.00②

注：與對(duì)照組比較，①P<0.05；與MAP組比較，②P<0.05

2　討　　論

AP組織學(xué)特點(diǎn)是腺泡細(xì)胞的壞死和實(shí)質(zhì)的炎性浸潤(rùn)。大多數(shù)病情溫和，且具有自限性，但仍有15%～20%的患者起病迅猛，發(fā)展為多臟器功能衰竭，甚至死亡[9，10]。β-半乳糖苷酶已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，特別是免疫學(xué)方面。生物體中的β-半乳糖苷酶由免疫系統(tǒng)的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，參與膿毒血癥、寄生蟲(chóng)感染等多種疾病的免疫應(yīng)答過(guò)程。對(duì)于巨噬細(xì)胞的產(chǎn)生及募集起到至關(guān)重要的作用。而在AP的發(fā)病過(guò)程中，巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)的局部炎性反應(yīng)也是推動(dòng)其疾病進(jìn)程的重要環(huán)節(jié)[11-13]。

本研究發(fā)現(xiàn)，SAP和MAP組的血清β-半乳糖苷酶水平明顯低于對(duì)照組，且SAP組血清β-半乳糖苷酶水平也明顯低于MAP組(P<0.05)。說(shuō)明β-半乳糖苷酶在AP患者發(fā)病過(guò)程中起到一定作用，且隨著病情變化，其水平也在變化，病情越重，數(shù)值越低。其數(shù)值的高低在某種程度上反映了疾病的嚴(yán)重程度，且β-半乳糖苷酶與血清淀粉酶、脂肪酶呈負(fù)相關(guān)。由此可以推理，β-半乳糖苷酶可以作為臨床治療AP好轉(zhuǎn)與治愈的觀察指標(biāo)。分析產(chǎn)生本實(shí)驗(yàn)結(jié)果的原因，可能為免疫系統(tǒng)中由B細(xì)胞產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶使DBP所攜帶的糖基發(fā)生改變，促進(jìn)受損組織中巨噬細(xì)胞的吞噬作用及過(guò)氧化物生成[14]。一方面，β-半乳糖苷酶用于對(duì)DBP的修飾，由于催化作用的消耗，使其血清內(nèi)活性明顯降低；另一方面，AP早期以巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的胰腺局部炎性反應(yīng)為主，因此，B細(xì)胞產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶在胰腺組織內(nèi)部消耗較多。與此同時(shí)，外周血清的β半乳糖苷酶因濃度差向胰腺內(nèi)部聚集，導(dǎo)致胰腺內(nèi)β-半乳糖苷酶活性升高，外周血活性降低，促使維生素D結(jié)合蛋白-巨噬細(xì)胞激活因子(DBP-MAF)生成量增加，單核細(xì)胞向巨噬細(xì)胞分化量增加，加重了胰腺局部炎性反應(yīng)。

綜上所述，AP患者血清中β-半乳糖苷酶活性明顯低于健康者，且患者病情越嚴(yán)重，其血清活性越低，提示β-半乳糖苷酶可能參與到AP的發(fā)病機(jī)制過(guò)程中。但其與AP炎性反應(yīng)之間的具體機(jī)制，有待進(jìn)一步研究。

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(2014-11-04收稿2015-01-16修回)

(責(zé)任編輯尤偉杰)