■繆萬榮 楊正德 羅愛平 劉 燕

（1.貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，貴州貴陽 550025；2.貴州大學(xué)釀酒與食品工程學(xué)院，貴州貴陽 550025）

犢牛代乳料是哺乳期犢牛液態(tài)飼料階段的主要日糧形式，代乳料、犢牛料人工哺育方案是促進(jìn)早期斷奶犢牛由以真胃、小腸消化為主的酶消化向前胃機(jī)能發(fā)育并形成微生物消化的重要技術(shù)環(huán)節(jié)[1]。牛乳蛋白是牛屬動(dòng)物長(zhǎng)期進(jìn)化過程中所形成的初生犢牛最理想的食物蛋白來源，其蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)與免疫特性及氨基酸的組成與比例較非乳源性蛋白更易為犢牛消化吸收和有效利用[2-5]。自20世紀(jì)80年代歐盟對(duì)牛奶生產(chǎn)實(shí)行配額制，乳源性蛋白供應(yīng)日趨緊張，探求消除或降低代乳料中廉價(jià)非乳源性蛋白的營(yíng)養(yǎng)抗原應(yīng)激成為領(lǐng)域研究重點(diǎn)[6]。隨著飼料原料工業(yè)技術(shù)的發(fā)展與進(jìn)步，國(guó)內(nèi)外對(duì)犢牛代乳料中非乳源性蛋白的原料選擇與飼喂效果已有較為廣泛的研究與應(yīng)用，但由于非乳源性營(yíng)養(yǎng)抗原應(yīng)激導(dǎo)致犢牛腹瀉與生產(chǎn)性能低下，替代比例長(zhǎng)期徘徊在50%左右，而對(duì)代乳料、犢牛料特定哺育方案的研究則未見報(bào)道[7]。鑒于初生犢牛早期斷奶存在真胃與小腸消化酶系發(fā)育不全、代乳料中各種非乳源性營(yíng)養(yǎng)抗原應(yīng)激、瘤胃微生物區(qū)系發(fā)育滯后等生物學(xué)障礙，于2014年9月至2014年12月在貴州省清鎮(zhèn)市奶牛養(yǎng)殖示范基地，研究非乳源性蛋白不同替代比例代乳料中添加非抗生素營(yíng)養(yǎng)調(diào)控劑、外源復(fù)合酶制劑以及代乳料-犢牛料不同過渡時(shí)間的哺育方案對(duì)初生～2月齡犢牛生長(zhǎng)發(fā)育效果的影響，為犢牛早期斷奶技術(shù)和奶公犢的肉牛資源化利用提供技術(shù)參數(shù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

選擇品種來源一致、平均出生時(shí)間1.83 d的中國(guó)荷斯坦初生健康公犢36頭，按實(shí)測(cè)初生重（38.00±2.83）kg基本一致的原則隨機(jī)分為9組，每組4頭，每組1欄，散欄連槽飼養(yǎng)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

以代乳料中非乳源性蛋白不同替代比例、非抗生素營(yíng)養(yǎng)調(diào)控劑、外源復(fù)合酶制劑以及代乳料-犢牛料不同哺育方案為試驗(yàn)因子，每個(gè)因子設(shè)3個(gè)水平，采用L9（34）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)。各因子的設(shè)計(jì)水平根據(jù)本研究小組前期研究基礎(chǔ)[2-3]進(jìn)一步優(yōu)化確定。非乳源性蛋白替代比例設(shè)70%、85%、100%3個(gè)水平，相當(dāng)于代乳中相應(yīng)加入全脂奶粉25%、12.5%、0%；非抗生素營(yíng)養(yǎng)調(diào)控劑設(shè)0.24%、0.36%、0.48%3個(gè)水平，其中含甘露寡糖300 mg/g，嗜酸乳桿菌、芽孢桿菌、枯草桿菌各3×108cfu/g；復(fù)合酶制劑設(shè)0.10%、0.20%、0.40%3個(gè)水平，其中含α-淀粉酶1 200、胃蛋白酶7 500、糖化酶42 500活性單位/g；哺育方案設(shè)為代乳料7周+犢牛料1周過渡（7+1）、代乳料5周+犢牛料3周過渡（5+3）、代乳料3周+犢牛料5周過渡（3+5）3個(gè)水平。試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。

表1 L9（34）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3 試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

代乳料中非乳源性蛋白以大豆?jié)饪s蛋白為主，膨化大豆為輔；乳源性蛋白以全脂奶粉為主，低蛋白乳清粉為輔。能量以糊化淀粉為主，植物油為輔。犢牛料蛋白全部來源于以豆粕為主的常規(guī)植物性蛋白；礦物元素及維生素參照NRC（2001）[4]犢牛營(yíng)養(yǎng)需要設(shè)計(jì)。粗飼料以玉米青貯為主，玉米酒糟為輔。代乳料采用等DE、等CP設(shè)計(jì)，營(yíng)養(yǎng)組成為：DE 17.17 MJ/kg、CP 22.96%、鈣1.22%、磷0.80%。犢牛料營(yíng)養(yǎng)組成為：DE 15.45 MJ/kg、CP 22%、鈣1.20%、磷0.75%。

1.4 飼養(yǎng)管理與測(cè)定指標(biāo)

1.4.1 飼養(yǎng)管理

犢牛于出生后1 h內(nèi)真胃灌飲初乳4 L，以后哺喂常乳，日喂2次。以引入日為試驗(yàn)1日齡，1～3日齡哺喂常乳，日哺喂量按參試犢牛平均體重及預(yù)期增重之和的16%；從4日齡開始，逐漸用代乳料取代常乳，至19日齡全部飼喂代乳料，日飼喂量以DM計(jì)按參試犢牛平均體重及預(yù)期增重之和的2%，代乳料用溫水按1（代乳）∶7（溫水）的比例調(diào)制成乳狀飲喂；2周齡開始隨意投放少許青粗飼料任其自由采食。每天飼喂2次（7:00，16:00），每次喂料前清洗奶桶，清掃圈舍及食槽；專人觀察記錄犢牛精神狀態(tài)和健康狀況，按牛場(chǎng)常規(guī)程序免疫。

1.4.2 測(cè)定指標(biāo)

體重：犢牛初生重于初生時(shí)（喂初乳前）實(shí)測(cè)，試驗(yàn)體重分別于試驗(yàn)第31、62日齡早飼前用感量1 kg的磅秤空腹稱重。

體尺：按常規(guī)測(cè)量犢牛的胸圍、體斜長(zhǎng)、體高和管圍。初生體尺于稱測(cè)初生重后測(cè)量，另2次體尺于稱重當(dāng)日早飼前空腹測(cè)量。

1.5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)及處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2007和SPSS 18.0進(jìn)行整理、統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，以 P＜0.05為差異顯著，以P＜0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 犢牛ADG正交優(yōu)化分析

表2 犢牛ADG正交優(yōu)化分析

由表2可知，4因子對(duì)犢牛ADG的調(diào)控效果，初生～1月齡以非乳源性蛋白比例為主效因子，以85%水平效果最佳，ADG為778 g，比100%、70%替代比例分別提高163 g（P＜0.01）、90 g（P＜0.05）；以非抗生素調(diào)控劑為次效因子；正交優(yōu)化方案為B2C2A1D2。1～2月齡以非抗生素調(diào)控劑為主效因子，以0.36%水平效果最佳，ADG為837 g，比0.48%、0.24%水平分別提高159、155 g（P＜0.01）；以復(fù)合酶制劑為次效因子；正交優(yōu)化方案為C2D2B2A1。綜合初生～2月齡整個(gè)試驗(yàn)期，以非抗生素調(diào)控劑為主效因子，以0.36%水平效果最佳，ADG為802 g，比0.48%、0.24%水平分別提高148 g（P＜0.01）、118 g（P＜0.05）；以非乳源性蛋白比例為次效因子，以85%水平效果為好，ADG為779 g，比100%、70%替代比例分別提高135 g（P＜0.01）、62 g（P＞0.05）；再次為復(fù)合酶制劑，以0.20%水平略好；哺育方案的影響相對(duì)較小，以代乳料7周+犢牛料1周過渡的方案稍好；正交優(yōu)化方案為C2B2D2A1。

2.2 犢牛體尺發(fā)育

試驗(yàn)犢牛胸圍、體斜長(zhǎng)、體高及管圍見表3。4個(gè)因子對(duì)犢牛初生～2月齡同一生長(zhǎng)階段體尺的影響差異均不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)犢牛1、2月齡胸圍、體斜長(zhǎng)分別是初生時(shí)的1.14、1.22倍，1.12、1.20倍；體高、管圍分別是初生時(shí)的1.08、1.13倍，1.06、1.18倍。隨著日齡的增長(zhǎng)，機(jī)體組織器官不斷生長(zhǎng)發(fā)育，犢牛初生～2月齡體尺的生長(zhǎng)總體以代表體積的體尺——胸圍和體斜長(zhǎng)生長(zhǎng)強(qiáng)度為大，體高與管圍的生長(zhǎng)強(qiáng)度則相對(duì)較小。

根據(jù)“任何物體的重量等于體積乘以密度”的物理學(xué)原理，以實(shí)測(cè)體重（kg）為因變量，以胸圍（m2）×體斜長(zhǎng)（m）代表犢牛體積為自變量，應(yīng)用回歸原理推導(dǎo)出犢牛體重估測(cè)回歸公式[8]：

體重（kg）=胸圍（m2）×體斜長(zhǎng)（m）×96.08-10.80（R2=0.992 0，SE=2.70%，P＜0.01）。

表3 試驗(yàn)犢牛體尺發(fā)育

3 討論

3.1 4因子對(duì)早期斷奶犢牛ADG的綜合調(diào)控效果

降低或消除非乳源性營(yíng)養(yǎng)抗原應(yīng)激和促進(jìn)包括前胃在內(nèi)的整個(gè)消化系統(tǒng)發(fā)育，是保證犢牛早期斷奶人工培育成功的技術(shù)關(guān)鍵。對(duì)犢牛ADG的影響，非乳源性蛋白在1月齡內(nèi)為主效因子，1月齡后影響減小，初生～2月齡整個(gè)階段為次效因子，以85%替代比例效果為好；非抗生素調(diào)控劑在初生～1月齡階段為次效因子，1～2月齡階段及初生～2月齡整個(gè)階段為主效因子，均以0.36%水平效果最佳。表明初生犢牛1月齡前對(duì)乳源性蛋白存在一定的依賴性；隨著年齡增長(zhǎng)，1月齡后對(duì)乳源性蛋白的依賴性逐漸降低，而非抗生素調(diào)控劑不僅補(bǔ)充了能促進(jìn)和改善瘤胃形態(tài)與機(jī)能發(fā)育為主的有益微生物，且其中的甘露寡糖能調(diào)節(jié)胃腸微生態(tài)平衡，從而發(fā)揮消化道菌群在屏障、營(yíng)養(yǎng)和免疫上的正常功能[9-10]。理論上70%非乳源性蛋白替代比例代乳中乳源蛋白更高，對(duì)犢牛的營(yíng)養(yǎng)抗原應(yīng)激相對(duì)較小，應(yīng)比85%替代比例有更好的ADG表現(xiàn)，可能以大豆?jié)饪s蛋白為主要非乳源性蛋白來源的代乳料使?fàn)倥Ｌ嵩缃佑|并適應(yīng)了植物性飼料，有利于促進(jìn)包括前胃在內(nèi)的整個(gè)消化系統(tǒng)的提前發(fā)育，弱化了犢牛對(duì)乳源性蛋白的依賴，有待進(jìn)一步研究。復(fù)合酶制劑在1月齡內(nèi)犢牛ADG的影響較小，但1～2月齡階段上升為次效因子，以0.20%水平的效果最佳。表明，犢牛初生～1月齡尤其3周齡內(nèi)的食物由全乳(常乳)逐漸過渡為代乳，乳源性蛋白比例較高，非乳源性營(yíng)養(yǎng)抗原影響較小，而4周齡后，犢牛的食物全部為代乳，非乳源性營(yíng)養(yǎng)抗原攝入增加，消化酶系應(yīng)激加劇，補(bǔ)充外源復(fù)合酶可使消化環(huán)境改善，有效消除或降低各種營(yíng)養(yǎng)抗原應(yīng)激的影響，提高養(yǎng)分的消化吸收與利用，與趙曉靜等[11]、刁其玉等[12]、王力生等[13]報(bào)道相符。本試驗(yàn)所用非抗生素營(yíng)養(yǎng)調(diào)控劑和復(fù)合酶制劑與其他試驗(yàn)因子對(duì)犢牛消化道內(nèi)環(huán)境的協(xié)同機(jī)制以及最適添加水平有待進(jìn)一步研究。

3.2 犢牛體尺、體重及其回歸關(guān)系

代乳料中非乳源性蛋白不同替代比例、非抗生素營(yíng)養(yǎng)調(diào)控劑、復(fù)合酶制劑以及不同哺育方案對(duì)初生～2月齡犢牛同一生長(zhǎng)階段體尺未見顯著影響。經(jīng)回歸分析得中國(guó)荷斯坦公犢體重估測(cè)公式：體重（kg）=胸圍（m2）×體斜長(zhǎng)（m）×96.08-10.80。但由于樣本容量與生長(zhǎng)階段的局限，公式是否適用于中國(guó)荷斯坦公犢其他體重階段的體重估計(jì)，有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

①在合理添加以甘露寡糖為主的非抗生素營(yíng)養(yǎng)調(diào)控劑與補(bǔ)充外源復(fù)合酶的輔助下，代乳中使用85%的非乳源性蛋白對(duì)初生～2月齡中國(guó)荷斯坦公犢可取得良好的增重效果，最佳優(yōu)化組合方案為非抗生素調(diào)控劑0.36%、非乳源性蛋白85%、復(fù)合酶制劑0.20%以及哺育方案代乳料7周+犢牛料1周過渡。

②中國(guó)荷斯坦公犢初生～2月齡體尺與體重的回歸關(guān)系為：體重（kg）=胸圍（m2）×體斜長(zhǎng)（m）×96.08-10.80。