摘要：分析了四川省青川縣、安縣、旺蒼縣產(chǎn)的3種柴胡（Bupleurum L.）川北柴1號(hào)、中柴1號(hào)及川紅柴1號(hào)的總黃酮及微量元素含量。結(jié)果表明，川北柴1號(hào)的總黃酮及微量元素含量比中柴1號(hào)及川紅柴1號(hào)的高，產(chǎn)地和品種對(duì)柴胡總黃酮和微量元素的含量有顯著影響。

關(guān)鍵詞：柴胡；總黃酮；微量元素；含量分析

中圖分類(lèi)號(hào)：Q949.763 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2016）03-0670-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.03.031

Abstract： The content of total flavonoids and trace elements in three kinds of Bupleurum L. including Chuanbeichai NO.1， Zhongchai NO.1 and Chuanhongchai NO.1 from different produced-area were analyzed. The results showed that，the content of total flavonoids and trace elements in Chuanbeichai NO.1 was higher than that in Zhongchai NO.1 and Chuanhongchai NO.1， the produced-area and variety had significant difference on the content of total flavonoids and trace elements in honeworts.

Key words：Bupleurum L. ；total flavonoid； trace element；content analysis

柴胡為傘形科植物北柴胡（Bupleurume chinense DC.）或狹葉柴胡（Bupleurum scorzonerifolium Willd.）的干燥根，是臨床常用中藥，其主要藥效成分有柴胡皂苷、揮發(fā)油和黃酮類(lèi)成分[1，2]。柴胡黃酮類(lèi)成分對(duì)流感病毒有抑制作用，對(duì)小鼠的肺感染有緩解作用，對(duì)人體抗腫瘤抗衰老及心血管等疾病的治療和預(yù)防也有重要意義[3-5]。已有20多種黃酮類(lèi)化合物從柴胡屬植物中分離出來(lái)[6，7]。此外，中藥材中的微量元素對(duì)其藥效有影響，與人體健康、生長(zhǎng)發(fā)育和防治疾病有密切的關(guān)系[8，9]。微量元素含量不僅受中藥材自身遺傳特性的影響，而且與其生長(zhǎng)環(huán)境因子關(guān)系密切，同種中藥材在不同環(huán)境下的微量元素含量有較大差異[10，11]。

中國(guó)柴胡屬植物種類(lèi)眾多，各地用藥歷史和習(xí)慣不同，市場(chǎng)上柴胡藥材來(lái)源混亂，一定程度上影響了柴胡生藥的品質(zhì)以及臨床用藥的有效性和安全性[12]。因此，分析柴胡黃酮類(lèi)和微量元素的含量對(duì)柴胡藥效的評(píng)價(jià)具有重要意義。本研究擬分析柴胡新品系川北柴1號(hào)、川紅柴1號(hào)及審定品種中柴1號(hào)的干燥根在不同環(huán)境下黃酮和微量元素含量的差異，以期為柴胡藥用價(jià)值的研究和利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

北柴胡（Bupleurum chinense DC.）中柴1號(hào)、川北柴1號(hào)及狹葉柴胡（Bupleurum scorzonerifolium Willd.）川紅柴1號(hào)均為二年生，由四川德培源中藥科技開(kāi)發(fā)有限公司于2013～2014年種植于四川地區(qū)的青川縣、安縣和旺蒼縣。

1.2 方法

總黃酮含量的測(cè)定采用紫外分光光度法[13，14]，微量元素的測(cè)定采用原子吸收光譜法[15]。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

以吸光度A為縱坐標(biāo)，以總黃酮含量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果表明，柴胡總黃酮濃度在0.228～1.368 mg/mL范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好（圖1）。

2.2 不同產(chǎn)地3種柴胡總黃酮含量分析

從表1可以看出，3個(gè)不同產(chǎn)地種植的柴胡，在青川縣收獲的中柴1號(hào)總黃酮含量最高，旺蒼縣的次之，安縣的最低。川北柴1號(hào)和川紅柴1號(hào)的總黃酮含量在3個(gè)產(chǎn)地的變化趨勢(shì)與中柴1號(hào)一致。3個(gè)柴胡品種中，川北柴1號(hào)在青川縣總黃酮含量最高，中柴1號(hào)次之，川紅柴1號(hào)的含量最低，在旺蒼縣和安縣收獲的3種柴胡總黃酮含量分布規(guī)律與在青川縣的一致。

方差分析結(jié)果表明（表2），柴胡的品種對(duì)其總黃酮含量影響極顯著，產(chǎn)地對(duì)柴胡總黃酮含量影響顯著。

精密度試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)RSD分別為2.19%、1.48%、1.62%，表明試驗(yàn)儀器精密度、重復(fù)性良好，樣品在5 h內(nèi)穩(wěn)定。加樣回收率試驗(yàn)中，加入蘆丁的量為1.14 mg，結(jié)果表明，平均加樣回收率為97.53%，RSD為1.83%，柴胡總黃酮回收率良好（表3）。

2.3 不同產(chǎn)地3種柴胡微量元素含量分析

從表4可以看出，旺蒼縣種植的中柴1號(hào)中Ca、Zn元素含量最高，青川縣的次之，安縣的最低；青川縣收獲的中柴1號(hào)中Fe、Mg、Cu元素的含量最高，旺蒼縣的次之，安縣的最低。川北柴1號(hào)和川紅柴1號(hào)中Ca、Fe、Mg、Cu、Zn 5種微量元素在青川縣、安縣、旺蒼縣含量分布趨勢(shì)與中柴1號(hào)基本一致。

方差分析中，柴胡品種對(duì)Ca、Mg、Zn 3種微量元素的含量有極顯著影響，對(duì)Fe、Cu的含量影響不顯著。種植環(huán)境對(duì)Ca、Fe、Zn 3種微量元素的含量有顯著影響，對(duì)Mg元素的含量有極顯著影響，對(duì)Cu元素的含量影響不顯著（表5）。

2.4 柴胡微量元素與總黃酮含量的相關(guān)性分析

相關(guān)性分析結(jié)果表明（表6），柴胡Ca、Fe、Mg、Cu、Zn 5種微量元素以及柴胡總黃酮含量之間存在相關(guān)性。柴胡總黃酮含量與Mg、Cu呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.749、0.671。各元素之間也有相關(guān)性，F(xiàn)e和Cu呈極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.846；Mg和Cu呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.701。

3 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，品種、產(chǎn)地對(duì)柴胡微量元素和總黃酮含量有顯著影響。Ca、Mg、Zn 3種微量元素含量在品種間有顯著差異。川北柴1號(hào)微量元素含量相對(duì)較高；而川紅柴1號(hào)的微量元素含量相對(duì)較低，如Cu、Zn元素。原因可能是受遺傳特性的影響，3種柴胡富集微量元素的能力不同所致。此外，Ca、Fe、Mg、Zn 4種微量元素含量在不同產(chǎn)地間呈顯著差異。3個(gè)不同產(chǎn)地中，青川縣收獲的柴胡微量元素含量相對(duì)較高，安縣收獲的含量較低。因此，在相同品種下，產(chǎn)地是影響柴胡中微量元素含量的重要因素。曹海祿等[16]研究了不同土壤種植條件下，4種柴胡的常量及微量元素含量的比較，得出土壤中的微量元素含量不同，柴胡在生長(zhǎng)過(guò)程通過(guò)根吸收、富集到藥材中，從而導(dǎo)致不同生長(zhǎng)條件下，柴胡微量元素含量差異顯著。耿茂林等[17]研究表明不同種植來(lái)源柴胡的黃酮類(lèi)成分也表現(xiàn)出較大差異。

柴胡微量元素和總黃酮含量之間呈現(xiàn)相關(guān)性，微量元素的含量對(duì)柴胡藥效成分的形成和累積起到重要作用。韓麗琴等[18]研究了中藥材中鐵元素與總黃酮的藥效關(guān)系，得出中藥材中的黃酮類(lèi)化合物和鐵元素可結(jié)合形成金屬配合物，二者協(xié)同可以發(fā)揮抗氧化功能，僅從微量元素或黃酮化合物方面研究，不能很好地說(shuō)明中藥的作用，必須將二者結(jié)合起來(lái)才能更準(zhǔn)確地解釋中藥的藥效作用。董冬等[19]研究了何首烏、唐純翼[20]研究了麥冬、董順福等[21]研究了紅花中微量元素和總黃酮含量與藥效的關(guān)系，也得出二者可協(xié)調(diào)起到抗氧化作用。鐘越等[22]初步研究了柴胡中微量元素和總黃酮清除自由基構(gòu)效關(guān)系，同樣表現(xiàn)出抗氧化功能。此外，邊曉麗等[23]研究得出柴胡清熱解毒的功效是其活性分子起主導(dǎo)作用，微量元素起協(xié)同治療的作用，進(jìn)一步說(shuō)明了微量元素對(duì)柴胡藥效的重要作用。目前市場(chǎng)上的柴胡藥品來(lái)源混亂，柴胡藥效受到影響，因此，在多年多點(diǎn)的環(huán)境下選育穩(wěn)定品種很有必要。

參考文獻(xiàn)：

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).《中華人民共和國(guó)藥典》一部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

[2] 張宏娜，趙玉英，梁 鴻，等.HPLC-ELSD法同時(shí)測(cè)定柴胡中柴胡皂苷a、c、d、f的含量[J].藥物分析雜志，2007，27（8）：1150-1153.

[3] 馮 煦， 王 鳴， 趙友誼， 等.北柴胡莖葉總黃酮抗流感的作用[J].植物資源與環(huán)境學(xué)報(bào)，2002，11（4）：15-18.

[4] ELISA T，MAURIZIO LG，SANTO G，et al. Cirus flavonoids molecular structure， biological activity and nutritional， properties： A view[J].Food Chemistry，2007，104（2）：466-479.

[5] CRISTINA M，ALESSANDRA B，SARA V，et al. Flavonoid characterization and in vitro antioxidant activity of Aconitumanthora L.（Ranunculaceae）[J].Phyto Chemistry，2008，69（5）：1220-1226.

[6] PARK K H，PARK J，KOH D，et al. Effect of saikosaponin-A，a triterpenoid glycoside， isolated from Bupleurum falcatumon experimental allergic asthma[J].Phytol Res，2002，16（4）：359-363.

[7] ZHU S H，MORINAGA O，SHIMOKAWA S，et al. Eastern blotting and use of anti-saikosaponin a monoclonal antibodies for detection of saikosaponins[J].J Nat Med，2007，61（2）：178-183.

[8] 王 夔.生命科學(xué)中的微量元素分析與數(shù)據(jù)手冊(cè)[M].北京：中國(guó)計(jì)量出版社，1998.

[9] 貢濟(jì)宇，許天陽(yáng)，于 澎，等.中藥微量元素的研究[J].微量元素與健康研究，2002，19（4）：68-70.

[10] 閻汝南，王靜竹，劉舒平，等.不同產(chǎn)地的黃芪微量元素的測(cè)定與研究[J].廣東微量元素科學(xué)，1998，5（9）：54-55.

[11] 薛國(guó)慶，劉 青，韓曉梅，等.火焰原子吸收法測(cè)定栽培柴胡中六種金屬元素含量的研究[J].光譜學(xué)與光譜分析，2006，26（6）：1173-1175.

[12] 王有志，張亞云.中藥柴胡的物種調(diào)查和鑒定[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，1994，29（1）：16-18.

[13] 馬文兵，曹端林，王建龍.北柴胡莖葉總黃酮提取工藝研究[J].中藥材，2010，33（2）：288-289.

[14] 汪 瓊，史云云，徐增萊，等.竹葉柴胡地上部分總黃酮含量測(cè)定[J].中藥材.2005，28（6）：453-455.

[15] 張 偉，吳 波.火焰原子吸收法測(cè)定柴胡藥材中的五種微量元素[J].廣州化工，2011，39（23）：95-96.

[16] 曹海祿，魏建和，何春娥，等.不同土壤種植下四種柴胡種質(zhì)藥材中常量及微量元素含量的比較研究[J].光譜學(xué)與光譜分析，2010，30（4）：1105-1108.

[17] 耿茂林，宋萍萍，徐增萊，等.不同種質(zhì)來(lái)源地上部分的HPLC比較研究[J].中國(guó)中藥雜志，2010，35（5）：574-578.

[18] 韓麗琴，董順福，劉建華.中草藥中鐵元素與總黃酮含量測(cè)定與藥效關(guān)系分析[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2007，18（11）：2647-2648.

[19] 董 冬，董順福，韓麗琴，等.何首烏中總黃酮與微量元素含量分析及其藥效機(jī)理研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2008，19（9）：2218-2219.

[20] 唐純翼.麥冬果中微量元素及總黃酮的測(cè)定[J].冷飲與速凍食品工業(yè)，2005，11（2）：35-37.

[21] 董順福，韓麗琴，趙文秀，等.中藥紅花總黃酮及微量元素含量的分析研究[J].光譜學(xué)與光譜分析，2008，28（1）：225-227.

[22] 鐘 越，董順福，雷鈞濤，等.柴胡中微量元素和總黃酮測(cè)定與清除自由基構(gòu)效關(guān)系分析[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（19）：8137-8138.

[23] 邊曉麗，王曉理，李金娜，等.6種抗衰老中藥清除氧自由基和抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用的測(cè)定[J].西北藥學(xué)雜志，2001，16（2）：68-69.