摘要：肝臟缺血再灌注（hepatic ischemia reperfusion，HIRI）會(huì)對(duì)肝功能造成嚴(yán)重?fù)p傷，尤其是當(dāng)患有肝硬化時(shí)，風(fēng)險(xiǎn)便會(huì)加劇。合理劑量的硫化氫（H2S）對(duì)大鼠HIRI可起到保護(hù)作用。本文通過構(gòu)建肝硬化大鼠模型，研究了肝硬化大鼠中H2S的作用。

關(guān)鍵詞：大鼠；肝臟缺血再灌注；肝硬化

Abstract：Hepatic ischemia reperfusion （hepatic ischemia reperfusion， HIRI） can cause serious damage to the liver function， especially when suffering from cirrhosis of the liver， the risk will aggravate the. The appropriate dose of hydrogen sulfide （H2S） on rat HIRI may play a protective role. This paper builds a model of hepatic cirrhosis rats， to study the role of H2S in cirrhotic rats.

Key words：Rat；Hepatic ischemia reperfusion； Liver cirrhosis

HIRI是肝切除、肝移植手術(shù)中一種極為常見的需要肝血流阻斷的過程，目的是為了減少出血量、優(yōu)化手術(shù)時(shí)間，但缺血再灌注極易出現(xiàn)鈣超載、過氧化應(yīng)激、無復(fù)流等現(xiàn)象，損傷肝功能及預(yù)后[1]。故而，本文對(duì)大鼠HIRI損傷中H2S的作用進(jìn)行了研究。

1 試驗(yàn)

1.1制備模型 以200g 左右的SPF級(jí)大鼠制備肝硬化模型（多因素綜合法），分為誘導(dǎo)期、成模期，該過程時(shí)間為9w，當(dāng)肉眼可見肝臟組織切片、纖維隔與假小葉形成、硬化結(jié)節(jié)形成時(shí)視為成功。誘導(dǎo)期第1w以苯巴比妥鈉0.35g+1L蒸餾水為飲用水。成模期以四氯化碳（40%）+0.5ml/（百克）中性菜籽油溶液皮下注射（2次/w），以乙醇溶液（10%）作為飲用水；第6w后改為四氯化碳（50%）+0.4ml/（百克）中性菜籽油溶液皮下注射（2次/w，使用4w），以乙醇溶液（20%）作為飲用水。

1.2分組、指標(biāo)檢驗(yàn) 將模型隨機(jī)分為4組：HIRI組、Sham組（假手術(shù)組）、NaHS組（NaHS預(yù)處理組）與5-HD組（線粒體KATP通道阻斷+NaHS預(yù)處理組），每組8只。給予NaHS組55μmol/（kg·d）H2S供體NaHS（硫氫化鈉），采用腹腔注射的方式使其生成H2S，7d后組建HIRI模型，肝中葉與左葉的膽管、靜脈、動(dòng)脈均用無損傷動(dòng)脈夾結(jié)扎1h，開放后再灌注2h；HIRI組組建肝中葉與左葉缺血再灌注模型；Sham組不結(jié)扎，只將肝中葉與左葉的膽管、靜脈、動(dòng)脈分離；5-HD組于肝臟缺血前10～15min以5.0mg/kg的5-羥葵酸靜脈注射，模型同NaHS組。4組再灌注末取4.0ml血（腔靜脈），離心15min（3000rad/min），行血清抽取，檢測(cè)TBIL（總膽紅素）、DBIL（直接膽紅素）、ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）與AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）的濃度。

2 結(jié)果

2.1研究中大鼠數(shù)量 本研究中的大鼠數(shù)量為38只，6只大鼠因在建模過程中對(duì)四氯化碳的耐受性不強(qiáng)出現(xiàn)死亡，因此，納入研究的大鼠實(shí)際數(shù)量為32只。

2.24組大鼠肝功能測(cè)定結(jié)果 Sham組TBIL、DBIL、ALT與AST均數(shù)分別為（38.6±5.2）μmol/L、（25.5±4.4）μmol/L、（87.6±15.7）U/L、（70.1±12.9）U/L；HIRI組TBIL、DBIL、ALT與AST均數(shù)分別為（164.5±26.0）μmol/L、（115.7±13.4）μmol/L、（386.1±22.0）U/L、（352.7±24.9）U/L；NaHS組TBIL、DBIL、ALT與AST均數(shù)分別為（81.9±17.6）μmol/L、（63.9±16.9）μmol/L、（185.4±11.4）U/L、（155.9±18.4）U/L；5-HD組TBIL、DBIL、ALT與AST均數(shù)分別為（148.1±22.0）μmol/L、（139.9±22.6）μmol/L、（355.2±16.9）U/L、（325.7±21.8）U/L?？梢?，Sham組的肝功能指標(biāo)不及HIRI組、NaHS組與5-HD組；5-HD組與HIRI組肝功能指標(biāo)差別不大；5-HD組與HIRI組肝功能指標(biāo)均明顯高于NaHS組。

3 討論

肝切除、肝移植等手術(shù)中需要干血流阻斷時(shí)，會(huì)引入HIRI操作，以控制肝血流，避免術(shù)中造成大量出血現(xiàn)象，從而縮短手術(shù)時(shí)間。但手術(shù)過程中常會(huì)出現(xiàn)損害肝功能的事件，如炎癥反應(yīng)、過氧化應(yīng)激等，不但加重了肝負(fù)擔(dān)，還影響其預(yù)后。隨著科學(xué)技術(shù)與醫(yī)療水平的不斷提高，近年來手術(shù)操作技術(shù)、麻醉技術(shù)以及圍手術(shù)期的護(hù)理水平均有所提升，大大縮短了肝血流阻斷的時(shí)間，且臨床效果較為理想[2]。

肝硬化屬慢性肝病末期階段，并發(fā)癥多見，如門脈高壓、肝功能降低（喪失）等，當(dāng)患者肝功能儲(chǔ)備條件受限后，HIRI無疑加重了術(shù)后肝衰竭（或死亡）風(fēng)險(xiǎn)。H2S作為氣體信號(hào)分子（內(nèi)源性），會(huì)以低濃度分子的形式存在于患者機(jī)體內(nèi)，且脂溶性較強(qiáng)，在自由擴(kuò)散的作用下會(huì)順利透過細(xì)胞膜，促使病理學(xué)作用與生理學(xué)作用的發(fā)揮，如參與代謝、參與炎癥反應(yīng)、舒張血管、發(fā)揮毒性效應(yīng)等，因此，細(xì)胞保護(hù)作用越來越受到業(yè)界人士的普遍關(guān)注；H2S同時(shí)也是極為重要的舒血管物質(zhì)（肝臟微循環(huán)中），在舒張平滑肌方面具有一定的優(yōu)勢(shì)，肝硬化進(jìn)展過程中，其含量變化會(huì)與肝功能損害程度二者之間呈現(xiàn)出正比關(guān)系，隨著患者病情不斷加重后，患者機(jī)體內(nèi)的H2S含量（內(nèi)源性）就會(huì)出現(xiàn)明顯降低趨勢(shì)。

本研究在制備肝硬化模型上選用了多因素綜合法，所需時(shí)間短且死亡率較低，較好的模擬了慢性肝炎轉(zhuǎn)歸情況。研究結(jié)果表明，肝硬化大鼠肝左葉與中葉缺血1h且再灌注2h后，肝功能指標(biāo)急劇上升，NaHS組經(jīng)提升H2S含量且再灌注后，肝功能指標(biāo)較之于HIRI組要低的多，給予5-HD后，NaHS保護(hù)作用降低。臨床上已有學(xué)者發(fā)現(xiàn)H2S對(duì)大鼠HIRI可起到保護(hù)作用，陳氏[3]等在大鼠HIRI中H2S作用進(jìn)行研究時(shí)，當(dāng)大鼠肝臟缺血達(dá)1h、5h后再灌注，觀察組行再灌注5min前施加1.0mg/kg的H2S供體，較之于對(duì)照組對(duì)AST上升的抑制率為79.3%，ALT上升的抑制率為67.6%，其機(jī)制或與抗凋亡能力、抗氧化應(yīng)激能力增強(qiáng)有關(guān)；杜氏等的研究結(jié)果表明[4]，NaHS組可有效減輕大鼠HIRI，且后行5-HD與格列苯脲處理后，NaHS保護(hù)作用下降，這與本研究結(jié)果一致。

綜上所述，H2S在判斷肝硬化病情與預(yù)后方面可起到至關(guān)重要的作用，下一步還應(yīng)加大探索力度，以發(fā)現(xiàn)更好的H2S供體，并促使H2S給予劑量與時(shí)機(jī)更具科學(xué)化。

參考文獻(xiàn)：

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編輯/馮焱