摘要：目的 研究藤茶即葡萄科蛇葡萄屬植物顯齒蛇葡萄的化學(xué)成分。方法 對藤茶及該屬植物的研究進(jìn)展進(jìn)行資料收集和整理確定其有效成分及藥理作用，以及有效成分的性質(zhì)，并采用系統(tǒng)溶劑法和色譜法對其進(jìn)行提取分離研究。結(jié)果 通過對所得化合物的顯色反應(yīng)、紫外光譜測定和薄層色譜鑒定、熔點(diǎn)測定，綜合進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析，確定了化合物Ⅰ、化合物Ⅱ的結(jié)構(gòu)分別為楊梅素和蛇葡萄素。結(jié)論 本文為提取純化工藝指明了方向，并為進(jìn)一步將其開發(fā)成中藥新藥提供充分的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：藤茶化學(xué)成分；蛇葡萄素；楊梅素；結(jié)構(gòu)鑒定

Abstract：Objective To shudy the chemical constituents of Ampelopsisgrossedentata.Methods On Vine tea and the progress of the study to collect and collate information on its composition and effective pharmacological effects，and effective components of the nature and adopt the system solvent and chromatography separation from their research.Results Through the compound from the color reaction，UV determination and identification of TLC，melting point determination，comprehensive structural analysis to determine the compoundⅠ，the structure of compoundsⅡwere Myricetin and Ampeloptin.Conclusion For the extraction and purification of this paper pointed out the direction and to further its development into new drugs of Chinese medicine to provide adequate experimental basis.

Key words：Ampelopsisgrossedentata chemical constituent Ampeloptin Myricetin Identification

藤茶又名顯齒蛇葡萄，多年生木質(zhì)藤本，來源于葡萄科蛇葡萄屬蛇葡萄[1]的嫩枝葉。是一種傳統(tǒng)中草藥，為湖北省鄂西地區(qū)民間常用中藥，通常于夏季摘嫩枝葉，置沸水中稍燙一下，即時撈起，瀝干水分，攤放通風(fēng)處至表面上有白霉時即烘干為霉茶。具有顯著的消炎陣痛、祛痰止咳[2]、抑菌[3]、降血壓、血脂[4]、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫[5]、保肝護(hù)肝等生物活性，臨床上主要用于治療原發(fā)性高血壓[6]。本文對霉茶及該屬植物的研究進(jìn)展進(jìn)行資料收集和整理，采用顯色反應(yīng)和色譜法對霉茶進(jìn)行了提取分離研究。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1儀器與試劑 ①儀器：Agilent1100高效液相色譜儀、顯微熔點(diǎn)測定儀、RE52-98型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、ZK072型電熱真空干燥器、可見-紫外分光光度儀、ZF-6型三用紫外分析儀；②試劑：95%乙醇、石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、無水乙醇、鹽酸、硫酸、冰醋酸均為分析純，碳酸氫鈉、氫氧化鈉、三氯化鋁、三氯化鐵、硅膠G（300目）、柱層析硅膠（200目）、聚酰胺（60～100目）、葡聚糖凝膠LH-20。

1.2實(shí)驗(yàn)材料 顯齒蛇葡萄于2007年5月采摘于湖北省恩施州來鳳縣。經(jīng)湖北中醫(yī)學(xué)院鑒定教研室鑒定為葡萄科蛇葡萄屬植物顯齒蛇葡萄的枝葉。

1.3化學(xué)成分的提取與分離 ①稱取10kg干燥霉茶，以9倍量95%乙醇浸泡過夜后，回流提取2次，分別為2h、1h。濾過，合并濾液。減壓真空濃縮至無醇味，得濃縮液共8000ml。濃縮液加一倍量蒸餾水稀釋混勻后，分別以氯仿、乙酸乙酯依次萃取分為氯仿、乙酸乙酯及水3個部位，分別減壓濃縮，得氯仿液2200ml，乙酸乙酯液3500ml。②取乙酸乙酯萃取部位干浸膏200g，用200g硅膠（100～200目）60℃水浴拌樣，加入到2000g硅膠柱上端，進(jìn)行柱色譜分離，依次用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，以500ml為一個流分，收集1～340號流分，薄層檢識，合并相同流分，得到組分A～J。組分B經(jīng)硅膠色譜柱、Sephadex LH-20色譜柱及重結(jié)晶等方法分離，得化合物Ⅶ、Ⅷ。

2 結(jié)構(gòu)鑒定

2.1化合物Ⅰ 黃色針狀結(jié)晶，mp324℃～325℃。Mg-HCl反應(yīng)呈陽性，可能為黃酮類化合物。FeCl3反應(yīng)呈陽性，多數(shù)黃酮類化合物分子中含有酚羥基故可與三氯化鐵發(fā)生顯色反應(yīng)。Molish試驗(yàn)為陰性，說明是游離黃酮化合物。

與楊梅素對照品共薄層：將樣品與楊梅素點(diǎn)于一塊薄層板上，以甲苯：乙酸乙酯：甲酸（10：8：5）和氯仿：甲醇：甲酸（30：15：1）為展開劑展開，以5%AlCl3乙醇液顯色，結(jié)果顯示樣品在與標(biāo)準(zhǔn)品再相應(yīng)的位置顯單一的亮黃色斑點(diǎn)。因此確定化合物Ⅰ應(yīng)為楊梅素。

2.2化合物Ⅱ 無色針狀結(jié)晶，mp244℃～245℃。Mg-HCl反應(yīng)呈陽性，可能為黃酮類化合物。Molish試驗(yàn)為陰性，說明是游離黃酮化合物。

與蛇葡萄素對照品共薄層：將樣品與蛇葡萄素點(diǎn)于一塊薄層板上以甲苯：乙酸乙酯：甲酸（10：8：5）和氯仿：甲醇：甲酸（30：15：1）為展開劑展開，以5%AlCl3乙醇液顯色，結(jié)果顯示樣品在與標(biāo)準(zhǔn)品相應(yīng)的位置顯單一的亮黃色斑點(diǎn)。因此確定化合物Ⅱ?yàn)樯咂咸阉亍?/p>

3 討論

黃酮類化合物的顏色反應(yīng)主要是利用分子中的酚羥基及γ-吡喃酮環(huán)的性質(zhì)。鹽酸-鎂粉反應(yīng)為鑒定黃酮類化合物最常見的顏色反應(yīng)。多數(shù)黃酮類化合物分子中含有酚羥基，故可與三氯化鐵水溶液或醇溶液發(fā)生顏色反應(yīng)。

在采用硅膠柱層析分離霉茶乙酸乙酯部位時存在分離效果差、多種展開系統(tǒng)拖尾等問題，故在粗分之后使用凝膠柱及聚酰胺柱進(jìn)行分離純化，凝膠柱分離情況良好。

4 結(jié)論

本論文采用系統(tǒng)溶劑法和色譜法對霉茶進(jìn)行了提取分離研究：得到化合物Ⅰ、化合物Ⅱ。通過對其紫外色譜圖的分析，以及進(jìn)行的TLC、熔點(diǎn)測定，綜合進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析，確定了結(jié)構(gòu)，分別為楊梅素、蛇葡萄素。本文通過化學(xué)成分研究，為藥材作用物質(zhì)研究奠定了基礎(chǔ)，同時為化學(xué)對照品的來源增加了途徑。

參考文獻(xiàn)：

[1]湖北省衛(wèi)生局.湖北中草藥志·第二冊[M].武漢：湖北人民出版社，1982：1078.

[2]鐘正賢，覃潔萍，周桂芬，等.廣西瑤族藤茶中二氫楊梅樹皮素的藥理研究[J].中國民族醫(yī)藥雜志，1998，4（3）：42-44.

[3]熊大勝，朱金桃.顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉提取物抑菌作用的研究[J].食品科學(xué)，2000，21（2）：48-51.

[4]陳曉軍，陳學(xué)芬，李茂，等.顯齒蛇葡萄總黃酮降脂作用的研究[J].廣西中醫(yī)藥，2001，24（5）：53-54.

[5]周寧寧，朱孝峰.無刺根中蛇葡萄素體外抗腫瘤作用研究[J].廣東藥學(xué)，2000，10（4）：7-8.

[6]湖北省恩施醫(yī)專門診部.草藥霉茶治療高血壓50例療效觀察[J].中草藥通訊，1978，8：39-41.編輯/成森