裴超信，李金海，蔡冬冬，張 毅，潘 夢，陳弟詩，李 麗

（四川省動物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610041）

口蹄疫是由口蹄疫病毒感染偶蹄動物而引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。我國目前從飼養(yǎng)管理、防疫衛(wèi)生、預(yù)防接種、檢疫、隔離、消毒等多個方面對口蹄疫進行綜合防控，發(fā)現(xiàn)疫情后通常采取隔離、緊急接種、撲殺、消毒、無害化處理等措施來控制。其中，緊急接種是防控措施和撲滅措施中的重要一環(huán)，而疫苗免疫質(zhì)量直接影響到口蹄疫的防控效果。本次試驗對四川地區(qū)使用的3種O-Asia I型口蹄疫二價苗和2種O-Asia I-A型口蹄疫三價苗進行了免疫效果評價，通過檢測疫苗免疫后產(chǎn)生的抗體水平來確定疫苗的免疫質(zhì)量。

1 材料和方法

1.1 疫苗 在疫苗的使用環(huán)節(jié)隨機抽取5個廠家的牛羊口蹄疫疫苗，對疫苗采用雙盲方式進行編號，牛羊O-Asia I型口蹄疫雙價疫苗（簡稱雙價苗）共3種，末次編號為A、B和C；牛羊O-Asia I-A型口蹄疫三價疫苗（簡稱三價苗）共2種，末次編號為D和E。疫苗在運輸、保存和使用環(huán)節(jié)均嚴格按照說明書執(zhí)行。

1.2 試驗動物 在仁壽縣某山羊規(guī)模場選擇30日齡左右，本底情況基本一致的羊110只，隨機分成5組，每組22只。

1.3 檢測試劑 O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒，批號：2013120901；Asia I型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒，批號：2014050702；A型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒，批號：2014012403。以上試劑均由蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)。

1.4 免疫接種 按照《國家動物疫病強制免疫計劃實施方案》中的口蹄疫免疫方案和疫苗說明書進行免疫注射。共進行兩次免疫，首次免疫后間隔4周進行二免，劑量均為1頭份。

1.5 免疫效果檢測 分別于首免當天、二免后4周，自頸靜脈采血，無菌分離血清，-20℃保存?zhèn)錂z。采用液相阻斷-酶聯(lián)免疫吸附試驗（LpB-ELISA）分別檢測O型、Asia I型和A型口蹄疫的免疫抗體水平，試驗操作嚴格按照試劑盒說明書進行。按《2014年國家動物疫病監(jiān)測與流行病學調(diào)查計劃》的規(guī)定，將抗體效價≥26的樣品判定為免疫合格。

2 試驗結(jié)果

2.1 二價苗試驗結(jié)果 3種口蹄疫二價疫苗的免疫效果較好，二免后O型和Asia I型口蹄疫免疫抗體的合格率均大于等于95%。其中，A疫苗的O型、Asia I型的免疫抗體合格率均為100%，B、C疫苗的O型、Asia I型的免疫抗體合格率均為95%。A疫苗免疫效果優(yōu)于B、C兩種疫苗。詳見表1。

表1 牛羊口蹄疫二價苗免疫抗體檢測結(jié)果

2.2 三價苗試驗結(jié)果 2種口蹄疫三價疫苗在二免后各亞型的免疫抗體合格率均能達到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的70%的要求。其中，D疫苗O型合格率為100%，Asia I型合格率為90.48%，A型合格率為71.43%；E疫苗O型合格率為80.00%，Asia I型合格率為75.00%，A型合格率為70.00%?？梢奃疫苗免疫效果優(yōu)于E疫苗。詳見表2。

3 結(jié)論與分析

3.1 5種疫苗的抗體監(jiān)測結(jié)果表明，二免后O型口蹄疫抗體合格率均在80%以上，Asia I型抗體合格率均高于75%，A型口蹄疫抗體合格率均高于70%，免疫效果均達到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標準，免疫效果整體較好。免疫抗體水平的高低受疫苗質(zhì)量、疫苗保存、免疫程序、動物健康狀況等多種因素的影響，本次試驗所選山羊的血清本底、免疫程序等影響因素基本一致，所以測得的免疫合格率從一個側(cè)面反映了疫苗的質(zhì)量。

表2 牛羊口蹄疫三價苗免疫抗體檢測結(jié)果

3.2 在生產(chǎn)實際中，動物常帶有口蹄疫母源抗體或前次免疫后的殘留抗體，過高的抗體水平將明顯影響口蹄疫疫苗的免疫效果。因此，有條件的規(guī)模場應(yīng)開展免疫抗體監(jiān)測，根據(jù)抗體水平的高低，科學合理地制定免疫程序。此外，口蹄疫的免疫原性較差，疫苗一免后的免疫合格率較低，抗體維持時間較短，必須進行加強免疫[1-5]。本次試驗中，A、D疫苗試驗組的動物雖然存在較高的母源抗體，但二免后的免疫合格率卻相對較高，說明這兩個疫苗突破母源抗體干擾的能力較強，疫苗質(zhì)量較好。

3.3 本次試驗中，牛羊三價疫苗的免疫效果存在不均衡性，不同毒株產(chǎn)生的免疫抗體水平各不相同，免疫合格率由高到低依次為O型、Asia I型、A型，這可能與不同血清型抗原的配比和免疫原性強弱有關(guān)。牛羊三價苗作為全群基礎(chǔ)免疫疫苗使用時效果較好，在進行加強免疫或緊急免疫時，建議根據(jù)抗體監(jiān)測結(jié)果選擇單苗免疫；特別是針對A型口蹄疫進行緊急免疫接種時，宜選A型口蹄疫單價苗。

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