郭 偉，高明松，彭 聰，譚 燚，李 偉

武漢市第一醫(yī)院內分泌科，湖北 武漢430022

nesfatin-1 作為近年新發(fā)現(xiàn)的一種攝食調節(jié)肽，與能量代謝關系密切，與肥胖有著重要的聯(lián)系。非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是我國僅次于慢性病毒性肝炎的第二大肝病［1］，肥胖是NAFLD 的獨立危險因素［2］，約75%肥胖患者患有NAFLD［3］。胰島素抵抗是肥胖、NAFLD、2 型糖尿病的共同病理生理基礎［4-6］。有研究表明，nesfatin-1 可能通過影響攝食行為及攝食相關激素參與了肥胖糖尿病患者的病理生理過程［7］，但是nesfatin-1 與NAFLD 的相關性研究未見報道。本研究旨在探討nesfatin-1 與NAFLD 的相關性，為臨床防治NAFLD 提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011 年5 月-2013 年5 月在武漢市第一醫(yī)院就診的NAFLD 患者60 例。男39 例，女21 例，年齡40 ～75 歲，平均年齡(57.6 ±8.9)歲，其中合并血脂異常18 例，冠心病2 例。冠心病患者心電圖為輕度ST-T 改變，心功能Ⅰ級。選取60 名健康體檢者作為對照組，男38 例，女22 例，年齡40 ～75 歲，平均年齡(58.2 ±8.4)歲，排除高血壓、糖尿病、高脂血癥、肝腎功能異常者，2 周內無服藥史。兩組性別、年齡比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P ＞0.05)，具有可比性。所有患者均為初診，未接受任何治療措施，包括飲食、運動及調脂藥物治療。

1.2 納入及排除標準 納入標準:均符合2010 年中華醫(yī)學會肝臟病學分會《非酒精性脂肪性肝病診療指南(修訂版)》的臨床診斷標準［8］。排除標準:除外病毒性肝炎、藥物性肝病、全胃腸外營養(yǎng)、肝豆狀核變性、自身免疫性肝病等可導致脂肪肝的特定疾病、炎癥性腸病、甲狀腺功能減退癥、庫欣綜合征、β 脂蛋白缺乏血癥及一些與胰島素抵抗(insulin resistance，IR)相關的綜合征(脂質萎縮性糖尿病、Mauriac 綜合征)等可導致脂肪肝的特殊情況;過量酒精攝入者(飲酒量折合乙醇量:男性＞140 g/周，女性＞70 g/周);心、肝、腎等主要器官及系統(tǒng)嚴重受損或功能障礙患者;合并糖代謝紊亂(包括糖尿病、空腹血糖受損)、高血壓、循環(huán)、呼吸、血液系統(tǒng)等內科基礎疾病患者;妊娠期、哺乳期婦女;精神病患者。

1.3 方法 測量所有受試者的身高、體質量、腰圍、臀圍等，計算體質量指數(shù)(BMI)、腰臀比(WHR);所有受試者均隔夜空腹12 h，清晨靜脈采血5 ml，用于測空腹血糖(fasting blood glucose，F(xiàn)BG)、甘油三酯(triglycerides，TG)、膽固醇(cholesterol，TC)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)、空腹胰島素(fasting insulin，F(xiàn)IN)、nesfatin-1。FBG 測定采用氧化酶法(試劑盒購自上海科華生物工程股份有限公司)。TG、TC、LDL、HDL 采用酶比色法(TG、TC 試劑盒購自寧波瑞源生物科技有限公司，LDL、HDL 試劑盒購自積水醫(yī)療株式會社)。FBG、TG、TC、LDL、HDL 采用美國貝克曼公司的AU2700 生化分析儀進行檢查。FIN 測定采用電化學發(fā)光法(試劑盒購自德國羅氏診斷有限公司)，采用美國羅氏公司C601 電化學發(fā)光分析儀進行檢查。nesfatin-1 采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA 法)測定(試劑盒購自美國Phoenix Pharmaceuticals 公司)。IR 的評估采用穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)，HOMA-IR=FBG×FIN/22.5。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 16.0 統(tǒng)計軟件進行處理。計量資料以s 表示，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)取自然對數(shù)后進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗。相關性采用Pearson 相關分析和多元線性逐步回歸分析。P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料及生化指標比較 對照組和NAFLD 組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義(P ＞0.05)。NAFLD 組患者的BMI、WHR、LDL、TC、TG、FBG、FIN、HOMA-IR 均高于正常對照組(P ＜0.05)，而HDL、nesfatin-1 低于正常對照組(P ＜0. 05，見表1)。

2.2 兩組nesfatin-1 水平協(xié)方差分析 采用協(xié)方差分析進一步了解NAFLD 組、對照組nesfatin-1 水平的差異是否獨立于其他危險因素，校正年齡、BMI、WHR、TG、TC、FBG、HDL、LDL、FIN、HOMA-IR 后，兩組間nesfatin-1 水平的差異仍具有統(tǒng)計學意義(P ＜0.01，見表2)。

表1 兩組一般資料及生化指標比較(s)Tab 1 Comparison of general datas and biochemical indexes between two groups(s)

表1 兩組一般資料及生化指標比較(s)Tab 1 Comparison of general datas and biochemical indexes between two groups(s)

NAFLD 組 對照組 P值47.3 ±2.74 48.53 ±5.06 0.100性別(男/女) 37/23 39/21 0.705 BMI 29.13 ±10.15 22.17 ±5.97 0.000 WHR 0.91 ±0.42 0.78 ±0.20 0.042 FBG 5.72 ±2.54 4.78 ±1.28 0.012 FIN 21.04 ±6.60 18.22 ±6.09 0.017 HOMA-IR 3.07 ±0.94 2.15 ±0.17 0.000 TG 2.93 ±0.89 2.08 ±0.81 0.000 TC 4.80 ±2.05 4.07 ±1.70 0.036 HDL 1.05 ±0.48 1.34 ±0.67 0.008 LDL 3.24 ±0.23 3.06 ±0.59 0.038年齡(歲)nesfatin-1 1.15 ±0.31 1.91 ±0.61 0.000

表2 兩組nesfatin-1 水平協(xié)方差分析Tab 2 Covariance analysis of nesfatin-1 between two groups

2.3 nesfatin-1 與NAFLD 的多元逐步回歸分析 采用多元逐步回歸分析，以是否患脂肪肝為應變量，以年齡、BMI、WHR、TG、TC、FBG、HDL、LDL、HOMA-IR、nesfatin-1 為自變量建立回歸模型，進行多元逐步回歸分析，結果提示，nesfatin-1 水平下降是NAFLD 的獨立危險因素(OR=1.426，P ＜0.01，見表3)。

表3 nesfatin-1 與NAFLD 的多元逐步回歸分析Tab 3 Multiple stepwise regression analysis of nesfatin-1 and NAFLD

3 討論

NAFLD 是肝細胞脂肪變性為主的臨床病理綜合征，其發(fā)病機制尚未完全明確。目前認為啟動因素是IR、游離脂肪酸增加引起的糖脂代謝紊亂，在此基礎上發(fā)生氧化應激和脂質過氧化反應，造成肝細胞損傷和炎癥反應。治療的重點在于阻止疾病的進展，祛除引起代謝綜合征的危險因素，如肥胖、IR 及血脂紊亂等。而肥胖、IR 及血脂紊亂均與攝食及能量消耗密切相關。

nesfatin-1 是2006 年由Goebel-Stengel 等［9］首次發(fā)現(xiàn)，是一種由82 個氨基酸構成的神經(jīng)多肽，可不依賴瘦素途徑抑制實驗動物的攝食，激活NTS 的POMC 和CART 神經(jīng)元，廣泛分布于外周脂肪組織、心肌、胃腸道、胰腺和睪丸等部位，對過度攝食、心血管功能、生殖功能、胃腸道功能及胰島素分泌等方面的神經(jīng)及內分泌調節(jié)起一定作用。國內外很多實驗提示［10-11］，nesfatin-1 可能從中樞和外周水平，通過不同的信號機制經(jīng)由Ca2+觸發(fā)神經(jīng)興奮而抑食，并通過延緩胃排空模擬胃擴張刺激等途徑間接調節(jié)攝食而改善肥胖。然而，其抑食的具體通路及各通路之間的聯(lián)系尚不明確。因此，nesfatin-1 的研究對肥胖、糖尿病、NAFLD 等疾病的臨床治療有重要意義。

本研究中，NAFLD 組nesfatin-1 水平較對照組明顯下降，nesfatin-1 水平下降是NAFLD 的獨立危險因素，這和Basar 等［12］的研究結果一致。這一結果產(chǎn)生的具體機制目前尚不清楚，我們推測NAFLD 患者可能存在nesfatin-1 分泌不足、攝食過多及體質量增加，從而導致能量平衡紊亂。

本研究結果顯示，血清nesfatin-1 水平與NAFLD有密切關系，為NAFLD 的發(fā)病機制及治療研究提供了一個新的思路和靶點。但nesfatin-1 在NAFLD 發(fā)病過程中的具體機制，如nesfatin-1 在胰島素信號通路中的作用及與其他脂肪細胞因子的相互影響等尚需更深入的研究。

［1］ Williams R. Global challenges in liver disease ［J］. Hepatology，2006，44(3):521-526.

［2］ Fabbrini E，Sullivnan S，Klein S. Obesity and nonalcoholic fatty liver disease:biocheimical，metabolic，and clinical implications ［J］.Hepatology，2010，51(2):679-689.

［3］ Li QX，Zhang Y，Zhu XL. Clinical feature of non-alcoholic fatty liver disease in non-obese essential hypertension and and risk factor［J］.Chin J Diffic and Compl Cas，2013，12 (2):101-103.李慶祥，張瑩，朱小玲. 非肥胖型原發(fā)性高血壓患者非酒精性脂肪性肝病的臨床特點及危險因素分析［J］. 疑難病雜志，2013，12(2):101-103.

［4］ Li JY，Liu ZZ，Zheng LL. Discussion of the trigger mechanism on inflammatory reaction with nonalcoholic fatty liver disease［J］. Chin J Diffic and Compl Cas，2013，12(6):478-480.李婕一，劉真真，鄭麗麗. 非酒精性脂肪性肝炎的炎性反應觸發(fā)機制探討［J］. 疑難病雜志，2013，12(6):478-480.

［5］ Mirza MS. Obesity，visceral fat，and NAFLD:Querying the role of adipokines in the progression of nonalcoholic fatty liver disease［J］. ISRN Gastroenterol，2011，28(8):592-599.

［6］ Yang W，Li Y，F(xiàn)eng M. Relationship between insulin resistance and serum resistin in the elderly type 2 diabetes with nonalcoholic fatty liver disease［J］. Chin J Diffic and Compl Cas，2013，12(4):308-309.楊偉，李耘，馮明. 老年2 型糖尿病伴非酒精性脂肪肝患者胰島素抵抗與血清抵抗素關系［J］. 疑難病雜志，2013，12(4):308-309.

［7］ Xu LP，Cheng XB，Lu Y，et al. The association of serum nesfatin-1 in obesity and type 2 diabetes［J］. Chin J Diabetes，2012，20(5):329-331.許麗萍，成興波，魯燕，等. 血清Nesfatin-l 水平與肥胖和2 型糖尿病的相關性研究［J］. 中國糖尿病雜志，2012，20(5):329-331.

［8］ Fatty Liver and Alcoholic Liver Disease Study Group of Chinese Liver Disease Association. Diagnostic criteria of nonalcoholic fatty liver disease［J］. Chin J Hepatol，2010，18(3):163-166.中華醫(yī)學會肝臟病學分會脂肪肝和酒精性肝病學組. 非酒精性脂肪性肝病診斷標準［J］.中華肝臟病雜志，2010，18(3):163-166.

［9］ Goebel-Stengel M，Wang L，Stengel A，et al. Localization of nesfatin-1 neurons in the mouse brain and functional implication［J］. Brain Res，2011，17(6):20-34.

［10］ Gantulga D，Maejima Y，Nakata M，et al. Glucose and insulin induce Ca2 + signaling in nesfatin-1 neurons in the hypothalamic paraventricular nucleus［J］. Biochem Biophys Res Commum，2012，20(4):811-815.

［11］ Stengel A，Goebel M，Wang L，et al. Central nesfatin-1 reduces dark-phase food intake and gastric emptying in rats:differential role of corticotrophin-releasing factors 2 receptor［J］. Endocrinology，2009，150(11):4911-4919.

［12］ Basar O，Akbal E，K?klü S，et al. A novel appetide，nesfatin-1 in patients with non-alcoholic fatty liver disease［J］. Scand J Clin Lab Invest，2012，72(6):479-483.