消化道潰瘍患者奧美拉唑代謝相關(guān)基因CYP2C19的多態(tài)性分布*

**通信作者 E-mail:junyuan99430@163.com

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2015-09-11網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20150911.2240.004.html

任凌雁， 袁軍**， 陳琨， 駱姝琳， 李偉， 令狐克燕

(貴州省人民醫(yī)院 中心實(shí)驗(yàn)室， 貴州 貴陽550002)

[摘要]目的： 分析奧美拉唑代謝相關(guān)基因CYP2C19基因在消化道潰瘍患者中的多態(tài)性分布。方法： 選取消化道潰瘍患者23例為研究對象，采用基因芯片的方法檢測CYP2C19的基因多態(tài)性，并分析CYP2C19基因型總體分布和性別分布。結(jié)果： CYP2C19基因型(636GG,681GG)、(636GG,681GA)、(636GA,681GG)、(636GG,681AA)、(636GA,681GA)及(636AA,681GG)攜帶率分別為39.1%、30.4%、13%、8.7%、8.7%、0；CYP2C19基因快代謝型占39.1%，中代謝型占43.5%，慢代謝型占17.4%；不同性別在CYP2CI9基因分型上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論： 檢測CYP2C19基因型可為奧美拉唑個(gè)體化用藥提供指導(dǎo)。

[關(guān)鍵詞]消化性潰瘍； 奧美拉唑； CYP2C19基因； 多態(tài)性,單核苷酸

[基金項(xiàng)目]*黔科平臺(tái)[2010]4005；[2010]筑科技合同字3-1號；黔科合sy[2010]3132號

[中圖分類號]R34-33; R573.1

The Polymorphism Distribution of Omeprazole Mechanism

Related CYP2C19 Gene in Patients of Peptic Ulcer

REN Lingyan， YUAN Jun， CHEN Kun， LUO Shulin， LI Wei， LINGHU Keyan

(CentralLaboratory,People'sHospitalofGuizhouProvince,Guiyang550002,Guizhou,China)

Abstract[] Objective: To investigate the polymorphism distribution of omeprazole mechanism related CYP2C19 gene in patients of peptic ulcer. Method: Twenty-three patients of peptic ulcer were selected, then adopting gene chip to test the polymorphism of CYP2C19. Analyzing the general distribution and gender distribution of CYP2C19 genotype. Results: CYP2C19 genotype(636GG,681GG),(636GG,681GA),(636GA,681GG),(636GG,681AA) ,(636GA,681GA) and (636AA,681GG) carrier rates were respectively 39.1%, 30.4%, 13%, 8.7%, 8.7%, 0；the extensive metabolizer, intermediate metabolizer, poor metabolizer of CYP2C19 gene were 39.1%, 43.5% and 17.4%; the gender differences in CYP2C19 had no statistical significance. Conclusion: Testing of CYP2C19 might be useful in suggesting medication of omeprazole.

[Key words] peptic ulcer; omeprazole;CYP2C19 gene; polymorphism，single nucleotide

奧美拉唑是目前針對消化道潰瘍應(yīng)用最早且最廣泛的有效藥物，但是不同患者使用奧美拉唑的效果大相徑庭，遺傳背景差異可能是造成這一結(jié)果的主要因素[1-2]。CYP2C19作為細(xì)胞色素氧化酶P450超家族的主要藥物代謝酶，影響奧美拉唑、氯吡格雷等眾多藥物在人體內(nèi)的代謝速度。由于奧美拉唑在體內(nèi)經(jīng)肝細(xì)胞微粒體中CYP2C19代謝，生成羥基奧美拉唑而失去活性[3]，而CYP2C19 基因又具有明顯的種族和地域的多態(tài)性分布[4]。因此本研究選擇消化道潰瘍患者為對象，檢測其CYP2C19的基因型，從而分析CYP2C19與奧美拉唑治療效果的相關(guān)性，旨在更好的為臨床用藥提供指導(dǎo)。

1對象與方法

1.1對象

采集消化科胃十二指腸潰瘍患者23例 ，平均年齡(61.8±3.73)歲，性別不限。經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并經(jīng)研究對象簽署知情同意書。

1.2標(biāo)本采集

采集肘靜脈血標(biāo)本2 mL，加入含EDTA抗凝劑的真空抽血管中，顛倒數(shù)次混勻，放置-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆?，使用百傲生物技術(shù)(上海)有限公司的全血DNA快速提取試劑盒提取人全血DNA。

1.3PCR擴(kuò)增

25 μL PCR反應(yīng)體系組成為：CYP2C19擴(kuò)增反應(yīng)液1和2各19 μL， 1 μL反應(yīng)液A，樣本DNA 5 μL； PCR循環(huán)條件：50 ℃ 5 min；94 ℃ 5 min；94 ℃ 25 s，48 ℃ 40 s，72 ℃ 30 s，35個(gè)循環(huán)，72 ℃ 5 min。

1.4雜交顯色

在百傲全自動(dòng)雜交儀中設(shè)置程序后進(jìn)行自動(dòng)雜交。反應(yīng)結(jié)束后取出芯片，將其放入生物芯片識(shí)讀儀中，用百傲基因芯片圖像分析軟件進(jìn)行圖像掃描，軟件自動(dòng)分析判定所檢測基因的基因型(圖1)。

1.5觀察指標(biāo)

觀察CYP2C19基因型的總體分布和性別分布，根據(jù)文獻(xiàn)[5]將CYP2C19基因分為快代謝型即基因型(636GG,681GG)，中代謝型基因型(636GG,681GA) 、(636GA,681GG)，慢代謝型基因型(636GG,681AA) 、(636GA,681GA)及(636AA,681GG) ，分析各種代謝基因型分布及性別分布。

圖1　芯片探針陣列圖 Fig.1　Chip probe array

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

將數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

CYP2C19基因型(636GG,681GG)、(636GG,681GA) 、(636GA,681GG)、(636GG,681AA) 、(636GA,681GA)及(636AA,681GG)芯片圖見圖2。男性和女性CYP2C19基因型頻率分布大致相同，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.538，P>0. 05)。CYP2C19基因代謝類型的性別分布差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.518，P>0. 05)。見表1。

圖2　CYP2C19基因型芯片分型結(jié)果 Fig.2　The results of the chip probe array of CYP2C19 genotype

基因型檢出總體男性女性快代謝型636GG,681GG9(39.1)6(40.0)3(37.5)中代謝型636GG,681GA7(30.4)5(33.3)2(25.0) 636GA,681GG3(13.0)2(13.3)1(12.5)慢代謝型636GG,681AA2(8.7)1(6.7)1(12.5) 636GA,681GA2(8.7)1(6.7)1(12.5) 636AA,681GG0.00(0.0)0(0.0) 合計(jì)23(100)15(100)8(100)

3討論

質(zhì)子泵抑制劑(proton pump inhibitors,PPIs)是目前治療消化道潰瘍最有效的一類藥物，它通過高效快速抑制胃酸分泌和清除幽門螺旋桿菌達(dá)到快速治愈潰瘍的目的。質(zhì)子泵抑制劑包括奧美拉唑、埃索美拉唑、泮托拉唑、蘭索拉唑等，其中又以奧美拉唑最為常用。有活性的奧美拉唑在人體內(nèi)可經(jīng)CYP2C19酶代謝生成無活性的羥基奧美拉唑，由于CYP2C19酶的表達(dá)具有遺傳多態(tài)性，因此不同基因型的人群對PPI的代謝速度可能有所不同。若患者攜帶CYP2C19突變基因，對奧美拉唑代謝能力弱，藥物容易在體內(nèi)積累，治愈率較好，但產(chǎn)生不良反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)可能增高；若患者攜帶野生型基因，對奧美拉唑代謝能力強(qiáng)，易造成療效不佳。因此CYP2C19的基因型檢測對奧美拉唑個(gè)體化的指導(dǎo)用藥是十分重要的。

CYP2C19 基因多態(tài)性分布具有明顯的種族和地域差異[6]。本研究對23例消化道潰瘍患者進(jìn)行了CYP2C19基因檢測，從基因型的分布中可以看出男性和女性患者在(636GG,681GG)基因型的檢出率最多，分別為40%和37.5%；在(636GG,681AA)、(636GA,681GA)基因型中都分別有1例檢出，沒有發(fā)現(xiàn)(636AA,681GG)基因型。此外不同性別CYP2C19基因多態(tài)性分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，推測在分析CYP2C19基因多態(tài)性對藥物代謝的影響時(shí)，可能可以不必過多地考慮性別因素。

對于不同代謝型的患者其臨床用藥也有所差異，對于快代謝型患者，代謝能力強(qiáng)，奧美拉唑在體內(nèi)暴露量偏低，適當(dāng)增加劑量或增加每日服藥次數(shù)，可顯著提高患者體內(nèi)藥物暴露量及疾病治愈率。對于中間代謝型患者代謝能力中等，奧美拉唑在體內(nèi)暴露量處于快慢代謝之間，可按常規(guī)劑量用藥，并監(jiān)測血藥濃度，必要時(shí)可按照上述快代謝患者方案適當(dāng)增加劑量。對于慢代謝型患者，代謝能力差，奧美拉唑在體內(nèi)暴露量高，按常規(guī)劑量用藥即可，并應(yīng)加強(qiáng)臨床關(guān)注以防患者體內(nèi)藥物積累量高導(dǎo)致不良反應(yīng)。本研究的23例病例中，中代謝類型檢出率最高達(dá)43.5%，在男、女性中分別占46.7%、37.5%，這與中國人群CYP2C19代謝類型分布相似[7]。本次研究的慢代謝型檢出率為17.4%，高于白種人慢代謝檢出率(3%～5%)[8]，與東方人檢出率為13%～23%一致[9]。本次研究對這23例消化道潰瘍患者進(jìn)行回訪，發(fā)現(xiàn)臨床醫(yī)生對快代謝患者增加了用藥劑量，療效較好。

CYP2C19基因檢測的開展將有效提高臨床用藥有效性，可以最大限度的提高藥物的安全性，真正意義上做到合理用藥、個(gè)性化用藥。

4參考文獻(xiàn)

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(2015-05-26收稿，2015-07-10修回)

中文編輯： 周凌； 英文編輯： 趙毅