徐明雅，潘丹杰，金米聰

凝膠滲透色譜法測(cè)定食用植物油中苯并（a）芘

徐明雅1，潘丹杰1，金米聰2

（1.杭州市糧油中心檢驗(yàn)監(jiān)測(cè)站，浙江 杭州 310009；2.寧波市疾病預(yù)防控制中心，浙江省微量有毒化學(xué)物健康風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 寧波 315010）

建立簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的食用植物油中苯并（a）芘測(cè)定的凝膠滲透色譜-液相色譜熒光檢測(cè)方法。樣品經(jīng)環(huán)己烷-乙酸乙酯（1∶1，V/V）溶解，利用凝膠滲透色譜系統(tǒng)凈化，洗脫液經(jīng)真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后氮吹至干，乙腈定容后用帶熒光檢測(cè)器的高效液相色譜儀測(cè)定。結(jié)果，苯并（a）芘在0.21～52.50 ng/mL范圍具有良好的線性，檢出限為0.2 μg/kg，最低定量限為0.7 μg/kg，靈敏度高、線性好、范圍寬。三級(jí)大豆油、四級(jí)菜籽油、一級(jí)菜籽油、一級(jí)山茶油、芝麻油、橄欖油共6 種不同種類和級(jí)別的食用植物油加標(biāo)樣品中低、中、高3 個(gè)添加水平的回收率在98.6%～103.5%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）在2.98%～4.69%之間。2a跟蹤測(cè)定1份芝麻油陽(yáng)性樣品10次，其平均值為10.94 μg/kg，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.12%。建立的方法操作簡(jiǎn)單，能有效去除油脂基質(zhì)的干擾，準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好，克服了GB/T 22509—2008《動(dòng)植物油脂 苯并（a）芘的測(cè)定：反相高效液相色譜法》方法測(cè)定苯并（a）芘時(shí)氧化鋁活度不易控制的技術(shù)難題，檢測(cè)批量植物油樣品中苯并（a）芘時(shí)效率提高。

凝膠滲透色譜；高效液相色譜；食用植物油；苯并（a）芘

苯并（a）芘，又名3,4-苯并芘（benzo(a)pyrene，BaP），可溶于苯、甲苯、環(huán)己烷，少溶于醇，具有高度的脂溶性[1-2]。BaP是多環(huán)芳烴類化合物的典型代表化合物，一般來(lái)源于有機(jī)燃料的不完全燃燒，可在煙草煙霧、汽車尾氣以及油炸煙熏燒烤食物中被檢測(cè)到[3]。GB 2762—2012《食品中污染物限量》[4]規(guī)定油脂及其制品中BaP限量值為10 μg/kg。

測(cè)定BaP的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)主要有GB/T 5009.27—2003《食品中苯并（a）芘的測(cè)定》[5]和GB/T 22509—2008《動(dòng)植物油脂：苯并（a）芘的測(cè)定：反相高效液相色譜法》[6]。GB/T 5009.27—2003《食品中苯并（a）芘的測(cè)定》[5]方法因過(guò)程復(fù)雜、有毒溶劑用量大、熒光本底干擾多、耗時(shí)，檢測(cè)靈敏度不高，很難滿足批量檢測(cè)的要求。雖然GB/T 22509—2008[6]規(guī)定了氧化鋁柱凈化、高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）測(cè)定的方法，但是該方法中氧化鋁的活度控制是技術(shù)難點(diǎn)，不易掌握，實(shí)際檢測(cè)中樣品測(cè)定結(jié)果的重復(fù)性不理想。

凝膠滲透色譜（gel permeation chromatography，GPC）常用于高脂肪樣品的目標(biāo)物凈化[7]。GPC能很好地去除樣品基質(zhì)中可能干擾目標(biāo)化合物的油脂、色素、生物堿、聚合物等高分子化合物[8]。GPC的應(yīng)用已經(jīng)比較普遍，在糙米、果蔬、大豆中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定[9-12]，食品中抗氧化劑、鄰苯二甲酸酯的測(cè)定[13-14]等國(guó)標(biāo)方法中已經(jīng)將GPC作為前處理的主要方法之一。隨著全自動(dòng)GPC儀的快速發(fā)展，徐明雅等[15]報(bào)道了凝膠色譜-高效液相色譜法檢測(cè)BaP的方法，對(duì)GPC的色譜條件和樣品濃縮方法進(jìn)行了摸索，但缺乏對(duì)陽(yáng)性樣品、復(fù)雜樣品的檢測(cè)報(bào)道。馬君剛[16]、諸葛慶[17]等也報(bào)道了凝膠色譜-高效液相色譜-熒光檢測(cè)法的檢測(cè)方法，方法回收率高，準(zhǔn)確性好，但是對(duì)檢測(cè)不同等級(jí)、不同種類油脂的適用情況和對(duì)GPC在處理多批樣品后是否長(zhǎng)效穩(wěn)定、與國(guó)標(biāo)方法的優(yōu)化銜接等沒(méi)有深入報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)在GB/T 22509—2008基礎(chǔ)上，對(duì)前處理過(guò)程進(jìn)行改進(jìn)，以全自動(dòng)GPC儀代替氧化鋁層析柱進(jìn)行凈化，省去氧化鋁活度調(diào)整和手工填裝柱子的麻煩，使得前處理自動(dòng)化程度提高，同時(shí)對(duì)色譜條件進(jìn)行優(yōu)化，用C18柱代替多環(huán)芳烴檢測(cè)專用柱，建立GPC-HPLC方法測(cè)定食用植物油中BaP，以期為國(guó)標(biāo)方法的修訂提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

食用植物油（三級(jí)浸出大豆油、四級(jí)壓榨菜籽油、一級(jí)壓榨菜籽油、一級(jí)壓榨山茶油、香油二級(jí)芝麻油、初榨橄欖油等） 市售；BaP標(biāo)準(zhǔn)溶液（5.25 μg/mL，相對(duì)不確定度2.6%，k=2） 中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院；乙酸乙酯-環(huán)己烷（1∶1，V/V）、乙腈（均為色譜純）德國(guó)CNW公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Vario全自動(dòng)凝膠凈化系統(tǒng)（GPC柱規(guī)格：700 mm×25 mm，填料：Bio. Beads S-X3） 德國(guó)LC Tech公司；SENCO R-201旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（配有250 mL梨形燒瓶） 上海申順生物科技有限公司；e2695高效液相色譜儀（配有2475熒光檢測(cè)器、Empower軟件） 美國(guó)Waters公司。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

BaP加標(biāo)使用溶液：將質(zhì)量濃度為5.25 μg/mL BaP標(biāo)準(zhǔn)溶液用乙酸乙酯-環(huán)己烷（1∶1，V/V）逐級(jí)稀釋至21.00 ng/mL。

BaP標(biāo)準(zhǔn)曲線系列溶液：將質(zhì)量濃度為5.25 μg/mL BaP標(biāo)準(zhǔn)溶液用乙腈逐級(jí)稀釋得到質(zhì)量濃度0.21、0.42、0.84、2.10、4.20、10.50、21.00、52.50 ng/mL。

1.3.2 樣品GPC凈化[15]

準(zhǔn)確稱取食用植物油樣品約2 g（精確到0.1mg）到10.0 mL具塞刻度試管中，乙酸乙酯-環(huán)己烷溶解并定容至10.0 mL。充分混勻后經(jīng)0.45 μm微孔過(guò)濾膜過(guò)濾至GPC樣品瓶中，待GPC凈化。

GPC條件：樣品吸取量：5 000 μL；流動(dòng)相：乙酸乙酯-環(huán)己烷（1∶1，V/V）；流速：5.0 mL/min；預(yù)運(yùn)行時(shí)間1 560 s，主運(yùn)行時(shí)間1 320 s，尾洗時(shí)間720 s，系統(tǒng)沖洗3 次。

1.3.3 樣品濃縮[15]

真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)：將GPC收集液轉(zhuǎn)移到250 mL梨形燒瓶中，水浴溫度35 ℃，真空度0.09 MPa條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，氮吹至干，準(zhǔn)確移取1.0 mL乙腈至梨形燒瓶中，充分溶解后將樣品轉(zhuǎn)移到2 mL樣品瓶中，待HPLC分析。

1.3.4 HPLC條件

Waters SunFireTMC18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；柱溫：35 ℃；流動(dòng)相：乙腈-水為88∶12（V/V）；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10 μL；激發(fā)波長(zhǎng)384 nm，發(fā)射波長(zhǎng)406 nm。

1.3.5 方法長(zhǎng)效穩(wěn)定性考察

考察GPC處理系統(tǒng)經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間、多樣品處理后是否保持穩(wěn)定，2011—2013年期間，對(duì)含BaP 11 μg/kg的芝麻油樣品（4 ℃冷藏）進(jìn)行跟蹤檢測(cè)，隔3 個(gè)月測(cè)定1 次，共測(cè)定10 次，每次測(cè)定平行測(cè)定3 次。每次測(cè)定時(shí)同時(shí)制備BaP 10 μg/kg的加標(biāo)樣品作為質(zhì)量控制（quality control，QC）樣品同時(shí)檢測(cè)，QC樣品回收率在98%～104%范圍內(nèi)認(rèn)為質(zhì)控通過(guò)，測(cè)定結(jié)果可靠。依據(jù)色譜圖中雜峰情況和測(cè)定結(jié)果考察本方法長(zhǎng)效穩(wěn)定性。

2 結(jié)果與分析

2.1 樣品前處理方法的改進(jìn)

2.1.1 凈化方法

GB/T 22509—2008[5]前處理采用氧化鋁柱，方法中規(guī)定2 次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不能超過(guò)重復(fù)性限r(nóng)=0.0843m＋0.313和再現(xiàn)性限R=0.100m＋0.256的要求（式中，m為兩次測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值），而日常檢驗(yàn)工作中經(jīng)常出現(xiàn)平行雙試樣測(cè)定結(jié)果超出該要求，需要重新測(cè)定的情況，比如雙試樣測(cè)定結(jié)果為5.6、6.5 μg/kg，絕對(duì)差值為0.9μg/kg，大于重復(fù)性限r(nóng)（r=0.82），不滿足重復(fù)性限要求。原因主要在于：1）油脂和BaP之間的分離平衡對(duì)氧化鋁活性非常敏感，而活度又很難控制；2）不同品牌不同批次氧化鋁活性存在差異；3）環(huán)境因素特別是空氣中水分影響氧化鋁活性；4）方法中提供的氧化鋁活度測(cè)試方法，本身有一定的誤差；5）氧化鋁吸附能力有限，處理的樣品量有限；6）柱子填充效果對(duì)雜質(zhì)和目標(biāo)物流出曲線有影響?；谏鲜鲈?，不僅需要通過(guò)反復(fù)測(cè)定質(zhì)控樣品——調(diào)整水的添加量來(lái)確認(rèn)合適的氧化鋁活性，而且需要穩(wěn)定的柱子填充技藝，要求高、操作繁瑣。

楊琳等[18]報(bào)道了采用乙腈飽和正己烷液-液提取的方法進(jìn)行前處理，吳海智等[19]則采用四氫呋喃-乙腈溶解定容后直接測(cè)定，雖然簡(jiǎn)便，但是檢出限高，干擾雜質(zhì)多，對(duì)高效液相系統(tǒng)特別是色譜柱的污染和損傷嚴(yán)重。另外，吳敏[20]、Dost[21]、胡浩軍[22]等報(bào)道的固相萃取前處理中都需要對(duì)油脂進(jìn)行皂化，步驟繁瑣，王紅青[23]、戴啟鳳[24]、文君[25]等報(bào)道的固相萃取方法樣品處理量小，僅為0.3 g油脂。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)：由于固相萃取柱柱容量小，對(duì)未經(jīng)精煉和精煉程度低的三級(jí)、四級(jí)菜籽油、芝麻油等復(fù)雜基質(zhì)樣品的凈化能力有限，固相萃取處理后的樣品液濃縮后有黃褐色油狀物殘留。

全自動(dòng)GPC處理系統(tǒng)，其原理為分子空間排阻，油脂分子和BaP分子大小差距大，可以有效分離，凝膠分子對(duì)BaP理論上不存在吸附，使得洗脫簡(jiǎn)單，即使BaP含量高，也容易恢復(fù)到初始柱效，柱子可重復(fù)使用。本實(shí)驗(yàn)采用的GPC處理系統(tǒng)樣品處理量可以達(dá)到1 g油脂，由于上樣體積和流速控制精準(zhǔn)，方法的精密度和重復(fù)性高。圖1是四級(jí)壓榨菜籽油樣品經(jīng)GPC凈化、濃縮和測(cè)定的色譜圖，測(cè)定值為12.6 μg/kg。由圖1可見(jiàn)，GPC前處理對(duì)于精煉程度低、色澤深、基質(zhì)復(fù)雜的初級(jí)壓榨植物油樣品也可以去除油脂基質(zhì)干擾，有效凈化，方法可行。

圖 1 四級(jí)菜籽油BaP陽(yáng)性樣品色譜圖Fig.1 Chromatography of BaP positive sample

2.1.2 濃縮和定容方法

以真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)代替旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，溫度由GB/T 22509—2008的65 ℃降低為35 ℃，而且蒸發(fā)速度加快、時(shí)間縮短。一步濃縮至近干，氮吹至干后，直接以1.0 mL乙腈而不是100 μL乙腈-四氫呋喃混合試劑溶解樣品。目的是通過(guò)增加定容溶劑體積的方法代替反復(fù)洗滌、濃縮、定容的步驟，并且只需普通2 mL樣品瓶，不需要特殊樣品瓶。僅乙腈就可以滿足測(cè)試要求，不需要特別引入四氫呋喃，避免了國(guó)標(biāo)法的麻煩。

2.2 HPLC色譜條件的改進(jìn)

GB/T 22509—2008采用25 cm多環(huán)芳烴色譜柱長(zhǎng)柱作為HPLC分析柱，本實(shí)驗(yàn)中采用15 cm C18短柱作為分析柱，由圖1可以看出，雜質(zhì)和BaP目標(biāo)峰有效分離，說(shuō)明15 cm C18短柱可以滿足檢測(cè)要求，如果不具備多環(huán)芳烴色譜柱，可以采用實(shí)驗(yàn)室普遍配備的C18柱代替，省去添置的麻煩。其余色譜條件，不需做更改。

2.3 線性范圍和檢出限

BaP標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，按法進(jìn)樣分析，結(jié)果表明BaP在0.21～52.50 ng/mL范圍呈現(xiàn)良好的線性，以溶液中BaP的質(zhì)量濃度X（ng/mL）對(duì)峰面積Y進(jìn)行線性回歸，線性回歸方程為Y=1.27×106X＋1.47×104，相關(guān)系數(shù)R為0.999 9，靈敏度高、線性好、范圍寬。

采用在空白基質(zhì)中添加BaP標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法，以RSN為3計(jì)算出的檢出限為0.2 μg/kg，以RSN為10計(jì)算出的最低定量限為0.7 μg/kg。

2.4 回收率和精密度

取不含BaP的三級(jí)大豆油、四級(jí)菜籽油、一級(jí)菜籽油、一級(jí)山茶油、芝麻油、橄欖油樣品各一個(gè)，準(zhǔn)確稱取各樣品（1.680 0±0.000 2）g于10 mL容量瓶中，然后準(zhǔn)確加入一定量的BaP加標(biāo)使用溶液，用乙酸乙酯-環(huán)己烷（1∶1，V/V）溶液定容至刻度，充分混勻后經(jīng)0.45 μm微孔過(guò)濾膜過(guò)濾至GPC樣品瓶中，配成低、中、高3 個(gè)水平的QC樣品，每一平行測(cè)定6 次（表1）。結(jié)果表明，樣品中低、中、高3 個(gè)水平的添加均具有較好的精密度與準(zhǔn)確度，回收率在98.6%～103.5%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.98%～4.69%之間，不受植物油的品種、等級(jí)、工藝的影響。雖然上述BaP標(biāo)準(zhǔn)溶液添加到油脂樣品中進(jìn)行加標(biāo)回收考察時(shí)，結(jié)果理想，但是將BaP標(biāo)準(zhǔn)溶液直接按GPCHPLC法進(jìn)行加標(biāo)回收考察，回收率僅為14.2%，說(shuō)明樣品基質(zhì)效應(yīng)非常顯著。因此，進(jìn)行GPC流出曲線考察時(shí)必須將標(biāo)準(zhǔn)溶液添加到植物油樣品中，否則得到的流出時(shí)間不能和實(shí)際樣品匹配。

表 1 加標(biāo)回收率和精密度（x±s，n=6）Table 1 Spiked recoveries and RSDs (x± s,, n=6))

2.5 方法長(zhǎng)效穩(wěn)定性

表 2 陽(yáng)性樣品跟蹤檢測(cè)結(jié)果（x±s）Table 2 Results of repeated determinations of the same BaP positive sample (ple (x± s)

跟蹤檢測(cè)含BaP的芝麻油樣品期間，該GPC系統(tǒng)共處理植物油樣品1 451 批次。10 次檢測(cè)中，圖譜重復(fù)性較好，雜質(zhì)峰集中在4 min前，熒光響應(yīng)強(qiáng)度穩(wěn)定在30以內(nèi)，QC樣品回收率在98%～104%范圍內(nèi)，表2是10 次跟蹤檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果表明，10 次測(cè)定結(jié)果在10.56～11.28 μg/kg之間，平均值為（10.94±0.23） μg/kg，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.12%。可見(jiàn)：GPC系統(tǒng)處理多樣品后保持穩(wěn)定，GPCHPLC方法長(zhǎng)效穩(wěn)定，同時(shí)說(shuō)明冷藏條件下芝麻油中BaP質(zhì)量分?jǐn)?shù)穩(wěn)定。

3 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)對(duì)GB/T 22509—2008進(jìn)行改進(jìn)，建立了GPCHPLC法測(cè)定食用植物油中BaP含量的方法，并進(jìn)行了加標(biāo)回收考察和陽(yáng)性樣品跟蹤檢測(cè)。結(jié)果表明：該方法操作簡(jiǎn)單，能有效去除油脂基質(zhì)干擾，準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好，是一種靈敏度高、線性范圍寬，樣品適應(yīng)性強(qiáng)，高效穩(wěn)定的檢測(cè)方法，前處理過(guò)程較GB/T 22509—2008自動(dòng)化程度提高，過(guò)程簡(jiǎn)化，在批量食用植物油樣品中BaP的測(cè)定時(shí)效率提高。

[1] LUTTRELL W E, THOMAS C J, Toxic tips: benzo(a)pyrene[J]. Journal of Chemical Health and Safety, 2007, 14: 21-22.

[2] MAKAROV V I, SAMSONOV Y N, KOROLEV V V, et al. Contents of 3,4-benzo(a)pyrene and dibutyl phthalate in background atmospheric aerosols in west Siberia, and in wind drifted aerosol exhaust out of the chimneys of heat power station[J]. Journal of Aerosol Science, 1996, 27(Suppl 1): 119-120.

[3] 李雋晹, 巴乾, 黃超, 等. 苯并(a)芘的健康危害及作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志, 2014(2): 154-156.

[4] 衛(wèi)生部. GB 2762—2012 食品中污染物限量[S]. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2012.

[5] 遼寧省衛(wèi)生防疫站. GB/T 5009.27—2003 食品中苯并(a)芘的測(cè)定[S].北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2003.

[6] 董廣彬, 鄭順利, 王春燕, 等. GB/T 22509—2008 動(dòng)植物油脂: 苯并(a)芘的測(cè)定: 反相高效液相色譜法[S]. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2008.

[7] FONTCUBERTA M, ARQUéS J, VILLALBí J R, et a1. Chlorinated organic pesticides in marketed food: Barcelona, 2001-06[J]. Science of the Total Environment, 2008, 389(1): 52-57.

[8] MUKHERJEE I, GOPAL M. Chromatographic techniques in the analysis of organochlorine pesticide residues[J]. Journal of Chromatography A, 1996, 754(1/2): 33-42.

[9] 沈崇鈺, 儲(chǔ)曉剛, 徐錦忠, 等. GB/T 5009.207—2008 糙米中50 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測(cè)定[S]. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2008.

[10] 牟峻, 王明泰, 鄒明強(qiáng), 等. GB/T 5009.218—2008 水果和蔬菜中多種農(nóng)藥殘留量的測(cè)定[S]. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2008.

[11] 陳冬東, 祁彥, 張新忠, 等. GB/T 23816—2009 大豆中三嗪類除草劑殘留量的測(cè)定[S]. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2009.

[12] 李曉娟, 祁彥, 張新忠, 等. GB/T 23818—2009 大豆中咪唑啉酮類除草劑殘留量的測(cè)定[S]. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2009.

[13] 穆同娜, 許華, 趙玉琪, 等. GB/T 23373—2009 食品中抗氧化劑丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)與特丁基對(duì)苯二酚(TBHQ)的測(cè)定[S]. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2009.

[14] 常宇文, 李偉, 周相娟, 等. GB/T 21911—2008 食品中鄰苯二甲酸酯的測(cè)定[S]. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2008.

[15] 徐明雅, 潘丹杰, 夏必坤. 凝膠滲透色譜-高效液相色譜法測(cè)定食用植物油中苯并(a)芘含量的研究[J]. 理化檢驗(yàn): 化學(xué)分冊(cè), 2011, 47(增刊1): 172-173; 177.

[16] 馬君剛, 張煌濤, 于紅, 等. GPC-HPLC-FLD法測(cè)定動(dòng)植物油脂中的苯并(a)芘[J]. 食品科學(xué), 2012, 33(10): 278-281.

[17] 諸葛慶, 葛樂(lè)勇, 曾紅燕, 等. GPC-HPLC-FLD法檢測(cè)食用植物油中的苯并(a)芘[J]. 食品科技, 2013, 38(8): 294-297.

[18] 楊琳, 陳青俊, 歐菊芳, 等. 高效液相色譜法快速測(cè)定植物油中苯并(a)芘含量[J]. 糧食與油脂, 2012(7): 34-36.

[19] 吳海智, 周叢, 袁列江, 等. 高效液相色譜法快速測(cè)定植物油中苯并芘的研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2011, 39(10): 6075-6076.

[20] 吳敏, 李政, 黎翠玉, 等. 固相萃取-高效液相色譜-熒光檢測(cè)法聯(lián)合測(cè)定食品中苯并(a)芘[J]. 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào), 2012, 3(2): 82-88.

[21] DOST K, IDELI C. Determination of polycyclic aromatic hydrocarbons in edible oils and barbecued food by HPLC/UV-Vis detection[J]. Food Chemistry, 2012, 133(1): 193-199.

[22] 胡浩軍, 侯逸眾, 黃方取. 固相萃取-氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定植物油中苯并(a)芘和苯并(e)芘[J]. 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2014, 24(1l): 1570-1572.

[23] 王紅青, 韓里明, 屠海云, 等. 固相萃取-超高效液相色譜熒光法測(cè)定植物油中苯并(a)芘[J]. 食品科學(xué), 2012, 33(14): 216-218.

[24] 戴啟鳳, 徐敏. 反相高效液相色譜法測(cè)定芝麻油中苯并(a)芘[J]. 科技創(chuàng)新導(dǎo)報(bào), 2014(11): 102-103.

[25] 文君, 孫丹紅, 王希希. 高效液相色譜法測(cè)定植物油中苯并(a)芘[J].預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào)雜志, 2013, 29(12): 1074-1077.

Determination of Benzo(a) Pyrene in Edible Vegetable Oils by Gel Permeation Chromatography

XU Mingya1, PAN Danjie1, JIN Micong2
(1. Hangzhou Grain and Oil Central Inspection Station, Hangzhou 310009, China； 2. Zhejiang Provincial Key Laboratory of Health Risk Appraisal for Trace Toxic Chemicals, Ningbo Municipal Center for Disease Control and Prevention, Ningbo 315010, China)

A gel permeation chromatography (GPC) method for sample clean-up, followed by high performance liquid chromatography (HPLC) with fl uorescence detection was developed for the determination of benzo(a)pyrene (BaP) in edible vegetable oils. The samples were cleaned up by GPC, evaporated under vacuum atmosphere and then determined by HPLC. The results showed this method was sensitive and had a good linearity within the concentration range of 0.21–52.50 ng/mL. The limit of detection was 0.2 μg/kg and the limit of quantization was 0.7 μg/kg. The mean recoveries of standard additions in different kinds and grades of edible vegetable oils were between 98.6% and 103.5%, with relative standard deviations (RSDs) (n = 6) in the range of 2.98%–4.69%. The average of ten repeated determinations of BaP in one positive sample during the years 2011 to 2013 was 10.94 μg/kg with a RSD of 2.12%, suggesting good repeatability of this method. This GPC-HPLC method is simple, sensitive and reliable for the determination of benzo(a)pyrene in edible vegetable oils.

gel permeation chromatography (GPC); high performance liquid chromatography (HPLC); edible vegetable oil; benzo(a)pyrene

O657.7

A

1002-6630（2015）08-0240-04

10.7506/spkx1002-6630-201508045

2014-07-02

徐明雅（1982—），女，工程師，碩士，研究方向?yàn)榧Z油及制品的檢測(cè)。E-mail：2528491555@qq.com