劉曉霞，付立波

(長(zhǎng)春師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春130032)

催產(chǎn)素(Oxytocin，OT)又稱縮宮素，是哺乳動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生的一種激素，主要由下丘腦室旁核與視上核神經(jīng)元分泌，又稱神經(jīng)肽［1－2］，催產(chǎn)素在臨床上應(yīng)用于引產(chǎn)、催產(chǎn)、產(chǎn)后以及流產(chǎn)后宮縮無力等［3］，主要使子宮收縮頻率與強(qiáng)度增加。產(chǎn)生原因與Ca2+的內(nèi)流相關(guān)，另外催產(chǎn)素也參與骨骼肌的收縮，且還與平滑肌收縮的作用機(jī)制密切相關(guān)［8］。但有關(guān)催產(chǎn)素對(duì)骨骼肌活動(dòng)的影響，尤其是對(duì)蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌的收縮影響，尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。因此，本實(shí)驗(yàn)采用浸潤(rùn)標(biāo)本，連接張力換能器及BL－410生物信號(hào)記錄與分析系統(tǒng)，觀察并記錄了催產(chǎn)素對(duì)蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌標(biāo)本收縮活動(dòng)的影響，以其為催產(chǎn)素對(duì)肌肉組織的活動(dòng)變化提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 材料

蟾蜍20只，體重為40～50g;用任氏液將催產(chǎn)素分別配制成0.5%、1%和1.5%的溶液。

1.1.2 儀器

生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)記錄與分析系統(tǒng)(BL－420s，成都泰盟科技有限公司);生物張力感受器(FT－100，成都泰盟科技有限公司)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 標(biāo)本制備與處理

按常規(guī)方法制備蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌標(biāo)本［4］。在肌肉端結(jié)扎一根棉線備用，將其置于任氏液中穩(wěn)定5min進(jìn)行實(shí)驗(yàn)備用，依照先后順序分別用配制好濃度為0.5%、1%、1.5%的催產(chǎn)素浸潤(rùn)好的紗布對(duì)腓腸肌標(biāo)本浸潤(rùn)，且每組實(shí)驗(yàn)都需要用任氏液作為對(duì)照組。

1.2.2 儀器的連接與實(shí)驗(yàn)

將分離好的蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌標(biāo)本置于肌槽中，將股骨固定。結(jié)扎在腓腸肌上的棉線與張力換能器相連并將張力換能器固定在萬能支架上。張力換能器與BL－420s生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)相連，啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，在標(biāo)本上依次分別用浸有0.5%、1%、1.5%濃度的催產(chǎn)素的紗布蓋上，每次更換濃度后需用任氏液對(duì)標(biāo)本清洗并間隔5min開始測(cè)量，分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)記錄與觀察。

1.2.3 數(shù)據(jù)記錄與處理

數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差來表示，浸潤(rùn)催產(chǎn)素前后的組間差異用配對(duì)t檢驗(yàn)，用P＜0.05;P＜0.01;P＜0.001作為是否有顯著性差異的標(biāo)志。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度催產(chǎn)素對(duì)離體蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌收縮閾強(qiáng)度的影響

將任氏液作用于坐骨神經(jīng)－腓腸肌的閾強(qiáng)度趨于穩(wěn)定，無較大波動(dòng)。0.5%和1.5%的催產(chǎn)素浸潤(rùn)后的腓腸肌閾強(qiáng)度與原有閾強(qiáng)度無顯著的差異(p＞0.05;p＞0.05)。而與用催產(chǎn)素浸潤(rùn)前相比較，1%的催產(chǎn)素對(duì)坐骨神經(jīng)－腓腸肌標(biāo)本浸潤(rùn)后，閾強(qiáng)度有所降低，數(shù)據(jù)有顯著差異，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。這表明骨骼肌收縮的閾強(qiáng)度在一定程度上受催產(chǎn)素的影響，但其影響與催產(chǎn)素的濃度有關(guān)，即在一定范圍內(nèi)催產(chǎn)素降低了骨骼肌收縮的閾強(qiáng)度，提高了骨骼肌收縮的興奮性(表1)。

表1 離體蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌閾強(qiáng)度的影響(± s，n=5) mv

表1 離體蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌閾強(qiáng)度的影響(± s，n=5) mv

注:*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。

浸潤(rùn)濃度正常任氏液 0.5%催產(chǎn)素 1%催產(chǎn)素 1.5%催產(chǎn)素1 0.618 ±0.0117 0.62 0.60 0.62 0.61 2 0.62 0.62 0.61 0.63 3 0.64 0.63 0.60 0.60 4 0.65 0.62 0.59 0.63 5 0.63 0.64 0.61 0.62比較 0.632 ±0.0116 0.622 ±0.0133 0.606 ±0.0102*

2.2 不同濃度催產(chǎn)素對(duì)離體蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌收縮幅度的影響

將任氏液作用于坐骨神經(jīng)－腓腸肌的收縮幅度趨于穩(wěn)定，無較大波動(dòng)。0.5%的催產(chǎn)素浸潤(rùn)后腓腸肌的收縮幅度明顯增大，與用催產(chǎn)素浸潤(rùn)前相比，具有極顯著差異(p＜0.01)。1%的催產(chǎn)素浸潤(rùn)后腓腸肌的收縮幅度出現(xiàn)增大趨勢(shì)，與用催產(chǎn)素浸潤(rùn)前相比，具有顯著差異，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。而1.5%的催產(chǎn)素浸潤(rùn)后腓腸肌的收縮幅度與浸潤(rùn)前相比無顯著差異(P＞0.05)。表明在一定濃度范圍內(nèi)(0.5% ～1%)，骨骼肌的收縮幅度隨著濃度的增加而增大，且增大的幅度隨濃度增加逐漸減小，超過一定濃度范圍后，骨骼肌的收縮幅度不隨催產(chǎn)素變化，且與浸潤(rùn)前骨骼肌的收縮幅度相近(表2)。

表2 離體蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌收縮幅度的影響(± s，n=5) g

表2 離體蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌收縮幅度的影響(± s，n=5) g

注:*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。

浸潤(rùn)濃度正常任氏液 0.5%催產(chǎn)素 1%催產(chǎn)素 1.5%催產(chǎn)素1 22.138 ±2.6707 21.14 23.12 23.64 18.70 2 22.36 24.23 26.30 25.53 3 21.06 24.79 23.27 24.99 4 23.00 24.12 23.58 20.37 5 22.41 23.63 24.89 21.10比較 21.994 ±0.7643 23.97 ±0.5657＊＊ 24.33 ±1.1275*

2.3 不同濃度催產(chǎn)素對(duì)離體蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌收縮潛伏期的影響

將任氏液作用于坐骨神經(jīng)－腓腸肌收縮的潛伏期趨于穩(wěn)定，無較大波動(dòng)。0.5%的催產(chǎn)素浸潤(rùn)后腓腸肌收縮的潛伏期明顯減小，與用催產(chǎn)素浸潤(rùn)前相比，具有極顯著差異(p＜0.01)。1%的催產(chǎn)素浸潤(rùn)后腓腸肌收縮的潛伏期也出現(xiàn)減小趨勢(shì)，與用催產(chǎn)素浸潤(rùn)前相比，具有顯著差異，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。1.5%的催產(chǎn)素浸潤(rùn)后收縮的潛伏期與浸潤(rùn)前相比無顯著差異(P＞0.05)。表明在一定濃度范圍內(nèi)(0.5% ～1%)，骨骼肌收縮的潛伏期隨著濃度的增加而減小，骨骼肌的興奮性升高。且減小的幅度隨濃度增加逐漸減小，超過一定濃度范圍后，骨骼肌收縮的潛伏期不隨催產(chǎn)素變化，且與浸潤(rùn)前骨骼肌收縮的潛伏期數(shù)值相近(表3)。

表3 離體蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌潛伏期的影響(± s，n=5) ms

表3 離體蟾蜍坐骨神經(jīng)－腓腸肌潛伏期的影響(± s，n=5) ms

注:*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。

浸潤(rùn)濃度正常任氏液 0.5%催產(chǎn)素 1%催產(chǎn)素 1.5%催產(chǎn)素33.766 ±1.6830 33.60 32.40 30.66 34.51 2 35.61 33.61 29.76 35.68 3 34.77 32.97 31.23 30.69 4 36.86 31.62 33.21 34.42 5 35.41 33.71 32.18 33.53比較 35.250 ±1.0677 32.862 ±0.7805＊＊ 31.408 ±1.1958*1

3 討論

肌肉的收縮與Ca2+濃度有關(guān)，收縮的機(jī)制是由肌絲之間的滑動(dòng)造成的。且肌肉的收縮特性與其狀態(tài)有關(guān)，骨骼肌組織中收縮蛋白數(shù)量或肌肉的內(nèi)部功能狀態(tài)發(fā)生改變時(shí)，肌肉收縮的速度、張力等生理特性也會(huì)變化［5］。催產(chǎn)素可以增強(qiáng)子宮平滑肌的收縮，導(dǎo)致子宮收縮頻率和強(qiáng)度的增強(qiáng)，平滑肌的收縮與Ca2+的內(nèi)流密切相關(guān)，細(xì)胞外的Ca2+內(nèi)流后，胞漿內(nèi)的Ca2+濃度逐漸上升，同時(shí)與鈣調(diào)素結(jié)合，激活酶被激活，使得相應(yīng)的肌凝蛋白磷酸化，橫橋出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)，引起平滑肌收縮。同樣骨骼肌收縮與Ca2+密切相連，參與骨骼肌收縮的蛋白質(zhì)主要有肌球蛋白、肌絲蛋白、原肌凝蛋白和肌鈣蛋白四種［7］，在骨骼肌中細(xì)胞內(nèi)游離的Ca2+濃度上升是引起肌肉收縮的原因，一個(gè)完整的單收縮曲線有潛伏期、收縮期和舒張期，Ca2+濃度下降時(shí)收縮開始進(jìn)入舒張期。骨骼肌興奮的產(chǎn)生同樣是由于Ca2+通道開放并順濃度梯度進(jìn)入胞漿內(nèi)與肌鈣蛋白結(jié)合，引發(fā)肌絲滑行產(chǎn)生骨骼肌收縮等一系類的生理反應(yīng)過程［9］。蟾蜍腓腸肌收縮的原因是肌細(xì)胞中Ca2+向細(xì)胞質(zhì)中釋放，導(dǎo)致細(xì)肌絲的橫橋結(jié)合位點(diǎn)暴露［10］。而已有實(shí)驗(yàn)證明人體子宮平滑肌有收縮受體，故認(rèn)為縮宮素通過與受體結(jié)合而發(fā)揮作用，并且Ca2+的內(nèi)流參與催產(chǎn)素的作用機(jī)制。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明蟾蜍的腓腸肌收縮受一定濃度范圍內(nèi)催產(chǎn)素的影響，其閾強(qiáng)度、收縮幅度和潛伏期都出現(xiàn)了不同程度的變化。

綜合以上觀點(diǎn)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果相結(jié)合推斷出，在一定催產(chǎn)素濃度范圍內(nèi)，由于Ca2+的內(nèi)流參與催產(chǎn)素的相關(guān)活動(dòng)而導(dǎo)致胞漿內(nèi)Ca2+濃度上升，骨骼肌收縮開始增強(qiáng)，提高了骨骼肌的興奮性。隨著催產(chǎn)素劑量加大，將引起肌張力持續(xù)增高，最后可致其強(qiáng)直收縮。因此催產(chǎn)素濃度超過一定濃度范圍時(shí)，催產(chǎn)素的活動(dòng)已無法增強(qiáng)，活動(dòng)相應(yīng)減少，Ca2+內(nèi)流量減少，骨骼肌收縮會(huì)到原來的幅度且不隨催產(chǎn)素的濃度發(fā)生變化。但由于平滑肌的收縮機(jī)制存在很多不同說法，雖與Ca2+的內(nèi)流有關(guān)，但子宮肌收縮和肌細(xì)胞協(xié)調(diào)的作用機(jī)理有所不同［8］，促進(jìn)子宮平滑肌的小劑量催產(chǎn)素也因人而異，骨骼肌收縮特性也與自身有關(guān)，該結(jié)果尚需進(jìn)一步的探討。

［1］何鳳琴，邰發(fā)道，張育輝，等.加壓素和催產(chǎn)素在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的作用［J］.生物學(xué)通報(bào)，2006，41(8):10－13.

［2］高慶軍，孟凡竹，劉巍，等.催產(chǎn)素在側(cè)腦室內(nèi)對(duì)正常大鼠的鎮(zhèn)痛作用［J］.中國(guó)婦幼保健，2014，29(31):5154－5157.

［3］劉超斌，王梅英，李東舫.催產(chǎn)素的研究進(jìn)展［J］.中華婦產(chǎn)科雜志，1999，34(5):312.

［4］解景田，趙靜.生理學(xué)實(shí)驗(yàn)［M］.2版.北京:高等教育出版社，2002:30－31.

［5］艾洪波，常蘭蘭.茶對(duì)離體坐骨神經(jīng)腓腸肌收縮特性的影響［J］.廣東茶葉，2009:42－45.

［6］鄭倩，劉行海，周賢峰，等.參麥注射對(duì)蟾蜍骨骼肌收縮的影響［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，2(14):14－17.

［7］王加真，張軍.鈣與肌肉收縮［J］.臨沂醫(yī)專學(xué)報(bào)，1996，18(4):319 －321.

［8］Ciray HN.Back strom T，Ulmsten U.Ineffectiveness of oxytocin of intercellular communication between term pregnant human myometrial cells before labor［J］.Am J Obstet Gynecol，1998(178):855－861

［9］王玢，左明雪.人體及動(dòng)物生理學(xué)［M］.2版.北京:高等教育出版社，2001.

［10］馬雪瀧，吳孝兵，吳邊.茶多酚對(duì)蟾蜍坐骨神經(jīng)干興奮傳導(dǎo)及骨骼肌收縮的影響［J］.資源開發(fā)與市場(chǎng)，2009，25(7):577－580.