西妥昔單抗聯(lián)合化療靶向治療食管癌的療效

張卉索智敏白玉1馬許輝楊德生

(河南大學(xué)淮河醫(yī)院消化內(nèi)科，河南開(kāi)封475000)

摘要〔〕目的檢測(cè)分析西妥昔單抗識(shí)別的靶抗原表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)在食管癌組織中的表達(dá)，探討西妥昔單抗聯(lián)合化療對(duì)食管癌的治療作用。方法應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)80例術(shù)后食管癌患者原發(fā)病灶中EGFR的表達(dá)情況，并分為有靶點(diǎn)組和無(wú)靶點(diǎn)組。每組又隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(西妥昔單抗聯(lián)合化療)和對(duì)照組(常規(guī)化療)。隨訪3年，統(tǒng)計(jì)3年生存率、復(fù)發(fā)率及轉(zhuǎn)移率。結(jié)果在有靶點(diǎn)組，實(shí)驗(yàn)組3年生存率高于對(duì)照組，復(fù)發(fā)率及轉(zhuǎn)移率低于對(duì)照組(P<0.05)；在無(wú)靶點(diǎn)組，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)。結(jié)論EGFR是食管癌靶向治療的有效靶點(diǎn)，西妥昔單抗聯(lián)合化療是食管癌靶向治療的有效方法。

關(guān)鍵詞〔〕表皮生長(zhǎng)因子受體；食管癌；靶向治療

中圖分類(lèi)號(hào)〔〕R735.1〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

基金項(xiàng)目：河南省衛(wèi)生廳資助課題(200803081)

通訊作者：趙寶生(1966-)，男，碩士，教授，主任醫(yī)師，主要從事食管癌臨床研究。

1新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室

第一作者：張卉(1980-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事消化道腫瘤臨床研究。

食管癌發(fā)病率、死亡率分別占我國(guó)全部惡性腫瘤的第4位和第2位。多數(shù)臨床研究證實(shí)食管癌術(shù)后5年生存率不超過(guò)20%〔1〕。因此，臨床上急需研發(fā)治療食管癌的新方法。靶向治療，是在細(xì)胞分子水平上，針對(duì)已經(jīng)明確的致癌位點(diǎn)來(lái)設(shè)計(jì)相應(yīng)的治療藥物，藥物進(jìn)入體內(nèi)會(huì)特異地選擇致癌位點(diǎn)來(lái)相結(jié)合發(fā)生作用，使腫瘤細(xì)胞特異性死亡，而不會(huì)波及腫瘤周?chē)恼＝M織細(xì)胞〔2〕。目前，靶向治療中研究最多的是表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)，本文探討EGFR是否可以作為合適的治療靶應(yīng)用于食管癌的靶向治療。

1對(duì)象與方法

1.1對(duì)象選取2008～2009年新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院收治的80例適合手術(shù)的Ⅱ～Ⅲ期食管癌患者為研究對(duì)象。年齡46～79歲，男52例，女28例，術(shù)前均未接受任何放化療?；颊呔炇鹬橥鈺?shū)。

1.2試劑鼠抗人EGFR單克隆抗體購(gòu)自Santa Cruz公司；SP試劑盒、DAB顯色劑購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)有限公司。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1免疫組織化學(xué)檢測(cè)對(duì)80例病人手術(shù)治療，癌組織經(jīng)常規(guī)10%甲醛固定、脫水、透明、石蠟包埋及切片。采用SP法，石蠟切片脫蠟和水化后，3%H2O2-甲醇消化內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性，修復(fù)抗原，0.5%小牛血清白蛋白封閉非特異性抗體，滴加一抗，滴加生物素化的二抗，滴加鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化酶，DAB顯色、水洗、蘇木素復(fù)染、脫水、透明、中性樹(shù)膠封片。顯微鏡下觀察。

1.3.2結(jié)果判定免疫組織化學(xué)反應(yīng)結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)，綜合考慮切片中陽(yáng)性細(xì)胞占所觀察同類(lèi)細(xì)胞數(shù)的百分比和陽(yáng)性細(xì)胞著色強(qiáng)度兩項(xiàng)指標(biāo)，半定量判斷結(jié)果。根據(jù)顯色程度判斷陽(yáng)性強(qiáng)度：淡藍(lán)色者為0分；淡黃色者為1分；棕黃色者為2分；棕褐色者為3分。按陽(yáng)性細(xì)胞所占計(jì)數(shù)細(xì)胞百分比計(jì)分：0分為無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞，陽(yáng)性細(xì)胞≤10%計(jì)1分，10%<陽(yáng)性細(xì)胞≤50%計(jì)2分，50%<陽(yáng)性細(xì)胞≤75%計(jì)3分，陽(yáng)性細(xì)胞>75%計(jì)4分。染色強(qiáng)度與陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)分乘積0～2分計(jì)為(-)，3～5分計(jì)為(+)，6～9分計(jì)為()，10～12分計(jì)為()。

1.3.3分組按照EGFR染色結(jié)果，-判定為無(wú)靶點(diǎn)組，+～判定為有靶點(diǎn)組。兩組患者又隨機(jī)平分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。

1.3.4治療方法實(shí)驗(yàn)組：西妥昔單抗+常規(guī)化療。西妥昔單抗使用方法及劑量如下：第1周初始劑量為400 mg·m-2·d-1(靜脈滴注2 h以上)，以后每周維持劑量為250 mg·m-2·d-1(靜脈滴注1 h以上)，輸注速度1 ml/min開(kāi)始，10 min內(nèi)如無(wú)過(guò)敏則加速，最大速度不超過(guò)5 ml/min。每周用1次，共4次。每次使用西妥昔單抗前肌肉注射非那根25 mg以預(yù)防過(guò)敏。西妥昔單抗先于化療藥物使用，第2天應(yīng)用化療藥物，采用順鉑+5-氟尿嘧啶的DF方案：順鉑20 mg·m-2·d-1，5-氟尿嘧啶750 mg·m-2·d-1，連續(xù)5 d靜脈滴注，21 d為1個(gè)周期，連用4個(gè)周期。對(duì)照組化療方案同實(shí)驗(yàn)組。

1.4隨訪觀察出院后隨訪3年，隨訪內(nèi)容包括了解患者癥狀、體征改善和生存情況等，不適復(fù)查CT。統(tǒng)計(jì)兩組患者的三年生存率、復(fù)發(fā)率、轉(zhuǎn)移率。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS15.0軟件，生存時(shí)間用Kaplan-Meier分析，各組率的比較采用χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1EGFR在食管癌組織中的表達(dá)EGFR主要表達(dá)在癌細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)。80例患者中共有48例EGFR表達(dá)陽(yáng)性，陽(yáng)性率60.0%，有32例表達(dá)陰性，陰性率40.0%，見(jiàn)圖1。

EGFR陰性　　　　　　　　EGFR陽(yáng)性 圖1　EGFR在癌組織中的表達(dá)情況(SP，×400)

2.2有靶點(diǎn)組內(nèi)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的療效比較實(shí)驗(yàn)組3年生存率較對(duì)照組明顯提高(66.7% vs 45.8%)；復(fù)發(fā)率(50.0% vs 66.7%)和轉(zhuǎn)移率(41.7% vs 62.5%)明顯降低(均P<0.05)。

2.3無(wú)靶點(diǎn)組內(nèi)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的療效比較實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比三年生存率(50.0% vs 43.8%)、復(fù)發(fā)率(68.8% vs 75.0%)和轉(zhuǎn)移率(50.0% vs 56.3%)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

3討論

藥物治療是食管癌治療的重要方法之一，但傳統(tǒng)的化療藥物因缺乏靶點(diǎn)的選擇性，不僅治療方式不夠個(gè)體化，而且常產(chǎn)生較為嚴(yán)重的毒副反應(yīng)。隨著對(duì)腫瘤發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移過(guò)程中分子生物學(xué)機(jī)制研究的不斷深入，分子靶點(diǎn)藥物的出現(xiàn)為食管癌的治療帶來(lái)了新的希望。由于其擁有靶點(diǎn)明確、特異性強(qiáng)、不易耐藥、對(duì)轉(zhuǎn)移瘤也有較好的效果等特點(diǎn)，正成為研究熱點(diǎn)〔3〕。EGFR是表皮生長(zhǎng)因子受體(HER)家族成員之一，主要參與細(xì)胞的增殖、生長(zhǎng)、遷移、浸潤(rùn)與存活。EGFR信號(hào)通路的異常與腫瘤的惡性表型、正常細(xì)胞凋亡的抑制、血管生成以及腫瘤的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)〔4〕。在人類(lèi)多種腫瘤組織中都存在EGFR異常激活，如非小細(xì)胞肺癌〔5〕、結(jié)直腸癌〔6〕、鼻咽癌〔7〕等的發(fā)生

都與腫瘤組織中EGFR的異?；罨嘘P(guān)。EGFR的生物特性提示它能成為抗癌治療的潛在靶點(diǎn)，因此人們有針對(duì)性地設(shè)計(jì)阻斷EGFR信號(hào)傳遞的靶向抗癌藥物。其中西妥昔單抗便是代表藥物，它是目前唯一一個(gè)獲批準(zhǔn)上市的特異性針對(duì)EGFR的IgG1單克隆抗體?？膳c表達(dá)于癌細(xì)胞表面的EGFR特異性結(jié)合，并競(jìng)爭(zhēng)性阻斷EGFR和其他配體如腫瘤壞死因子α(TNF-α)和表皮生長(zhǎng)因子(EGF)的結(jié)合。西妥昔單抗與HER結(jié)合后會(huì)刺激后者的降解，使HER的表達(dá)下調(diào)，進(jìn)而阻斷其酪氨酸激酶磷酸化以及細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，從而抑制癌細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡；還可減少基質(zhì)金屬蛋白酶和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的產(chǎn)生，從多發(fā)面發(fā)揮作用起到抗癌作用。體外實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示，西妥昔單抗可抑制過(guò)度表達(dá)EGFR的腫瘤細(xì)胞的增殖，而對(duì)缺乏EGFR表達(dá)的腫瘤細(xì)胞則沒(méi)有抗腫瘤活性〔8〕。本研究免疫組化結(jié)果顯示，EGFR主要表達(dá)在食管癌組織，癌旁組織和正常組織基本未見(jiàn)表達(dá)，這與王玉峰等〔9〕的研究結(jié)果一致。利用抗體對(duì)腫瘤特異抗原的選擇性，西妥昔單抗也能特異性地靶向癌細(xì)胞，起到抗癌作用。本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，對(duì)EGFR表達(dá)陽(yáng)性的患者，西妥昔單抗有顯著的治療效果。而對(duì)缺乏EGFR表達(dá)的患者，西妥昔單抗則不能起到抗癌作用，綜上所述，EGFR可以作為合適的治療靶應(yīng)用于食管癌的靶向治療。西妥昔單抗聯(lián)合化療為EGFR陽(yáng)性的腫瘤患者帶來(lái)新的希望，其可能成為食管癌綜合治療的一種新的有效方法。

4參考文獻(xiàn)

1孫燕,石遠(yuǎn)凱.臨床腫瘤內(nèi)科手冊(cè)〔M〕.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:516-23.

2李巖,馬杰.腫瘤分子靶向治療學(xué)〔M〕.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:63-5.

3何向明.分子靶點(diǎn)藥物治療食管癌的臨床研究進(jìn)展〔J〕.中國(guó)腫瘤,2009;18(4):299-303.

4唐炳華,王繼峰.醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)〔M〕.北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2007:146-7.

5席妍,王彥榮,杜鵑.非小細(xì)胞肺癌組織EGFR、CXCR4的表達(dá)及其與MVD的相關(guān)性〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志,2012;32(9):1550-2.

6王玉,方明治,金黑鷹,等.表皮生長(zhǎng)因子受體靶向治療結(jié)直腸癌的臨床進(jìn)展〔J〕.世界華人消化雜志,2010;18(17):1804-9.

7唐冬寒,張鈺霞,蔡靜.西妥昔單抗聯(lián)合放化療治療局部晚期鼻咽癌的臨床療效觀察〔J〕.腫瘤藥學(xué),2013;2(3):119-21.

8崔嵐,逄曉云,王曉珉.新型抗腫瘤藥物西妥昔單抗〔J〕.中國(guó)藥師,2005;18(4):332-4.

9王玉峰,王新帥,高社干,等.表皮生長(zhǎng)因子受體在食管癌中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.中華實(shí)用診斷與治療雜志,2012;26(9):868-70.

〔2014-08-17修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢(mèng)園)