孫 茜，王 聰，賈 曦，孫雅堃，陳妹紅

(1.河北省保定市第一中心醫(yī)院檢驗科，河北保定071000;2.河北省保定市第一中心醫(yī)院心電圖室，河北保定071000)

1 764例血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析

孫 茜1，王 聰1，賈 曦1，孫雅堃1，陳妹紅2*

(1.河北省保定市第一中心醫(yī)院檢驗科，河北保定071000;2.河北省保定市第一中心醫(yī)院心電圖室，河北保定071000)

目的了解血培養(yǎng)中常見病原菌的組成以及各類病原菌對抗菌藥物的耐藥性，為臨床醫(yī)生合理選用抗菌藥物解決患者病痛提供依據(jù)。方法 收集臨床送檢的血培養(yǎng)標(biāo)本，應(yīng)用法國生物梅里埃公司BacT/Alert3D全自動血培養(yǎng)儀、配套培養(yǎng)基、鑒定儀系統(tǒng)鑒定菌種及藥敏試驗。結(jié)果1 764份血培養(yǎng)分離出病原菌179株，其陽性率為10.1%，其中革蘭陽性菌68株(38.0%)，革蘭陰性菌111株(62.0%);病原菌中占首位的是大腸埃希菌，其次是凝固酶陰性菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌。藥敏結(jié)果顯示絕大部分檢出的病原菌均有耐藥情況出現(xiàn)。結(jié)論臨床醫(yī)生應(yīng)重視患者早期的血培養(yǎng)檢驗，并嚴(yán)格根據(jù)藥敏結(jié)果合理使用抗菌藥物。對血培養(yǎng)的檢測應(yīng)更加規(guī)范，從而提高病原菌的檢出率，并及時檢測病原菌變化及耐藥趨勢。

無菌培養(yǎng);抗藥性，細(xì)菌;微生物敏感性試驗

隨著創(chuàng)傷性治療技術(shù)在醫(yī)院的應(yīng)用，治療中大量使用廣譜抗生素和激素使血流感染的發(fā)生率逐漸升高，耐藥菌株也隨之增加，給臨床治療患者感染帶來了一定困難。一般情況下由口腔手術(shù)或常規(guī)牙科操作，感染的下尿路插管、膿腫切塊引流及各種內(nèi)置器械的細(xì)菌生長而使細(xì)菌一過性侵入血流，導(dǎo)致短暫的菌血癥對健康人影響不大，但對機(jī)體免疫力低下或伴有其他嚴(yán)重疾病的患者可產(chǎn)生嚴(yán)重后果［1］。血培養(yǎng)是檢測患者體內(nèi)是否有病原菌最常用的一種方法，也是最簡單最快速的。血培養(yǎng)檢查病原菌對診斷菌血癥、感染性心內(nèi)膜炎、臨床不明原因感染、假體植入后感染或插管相關(guān)性菌血癥等疾病有一定的指導(dǎo)意義。陽性的血培養(yǎng)結(jié)果不僅能確立而且證實患者的疾病是由感染病原菌引起的，更重要的是血培養(yǎng)還可以提供病原菌對于抗生素的敏感性試驗，從而優(yōu)化抗生素治療指導(dǎo)醫(yī)生合理用藥。本研究旨在為了我院患者病原菌的組成和分布以及對常用抗菌藥物的耐藥情況。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 收集2012年4月—2013年2月我院患者血液標(biāo)本共1 764份，重復(fù)送檢者相同結(jié)果不予統(tǒng)計。

1.2 儀器與試劑 法國梅里埃BacT/Alert3D全自動血培養(yǎng)儀，血培養(yǎng)瓶，VITEK-32全自動微生物分析系統(tǒng)，配套藥敏卡及藥敏紙片。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本的采集與處理 患者高熱寒戰(zhàn)時及抗生素治療前或下一次使用抗生素前，在嚴(yán)格無菌的條件下抽取血液標(biāo)本。兒童采血3～5 mL注入兒童瓶，成人采血5～10 mL注入成人瓶，嬰幼兒采血量不應(yīng)超過其總血量的1%，混勻后立即送檢。血培養(yǎng)儀報告陽性后，轉(zhuǎn)種血平板與麥康凱平板，并涂片革蘭染色鏡檢(鏡檢結(jié)果應(yīng)及時報告臨床醫(yī)生)，放入35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24 h。培養(yǎng)出細(xì)菌挑取單個菌落進(jìn)行涂片、革蘭染色、鏡檢。陰性標(biāo)本培養(yǎng)7 d后仍無微生物生長，經(jīng)盲種后證實無細(xì)菌生長。

1.3.2 菌株鑒定及藥敏方法 使用VITEK全自動鑒定系統(tǒng)，部分菌株采用K-B方法。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌 (ATCC25922)、銅綠假單胞菌(ATCC27853)、金黃色葡萄球菌(ATCC29213)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 將藥敏結(jié)果輸入WHONET 5.6中進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，同一患者的相同菌株只作一次分析。

2 結(jié) 果

2.1 病原菌分布情況 從標(biāo)本中分離出病原菌株共179株，陽性率為10.1%。其中革蘭陽性菌68株(38.0%)，革蘭陰性菌111株(62.0%)。

2.2 病原菌的藥敏分析

2.2.1 革蘭陽性菌的藥敏分布 葡萄球菌61株是檢出率最多的革蘭陽性菌，占檢出菌的34.0%，鏈球菌與腸球菌所占比例相對較少。葡萄球菌中凝固酶陰性菌占大多數(shù)，金黃色葡萄球菌8株，僅占葡萄球菌屬的13.1%。主要革蘭陽性菌對抗菌藥物的耐藥情況，見表1。

2.2.2 革蘭陰性菌的藥敏分布 在革蘭陰性菌中大腸埃希菌63株為首要致病菌，占總檢出菌的35.2%，其次為肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、沙雷菌。主要革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥情況，見表2。

表2 主要革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥率Table2 Main gram-negative bacteria to antimicrobial drugs (株數(shù)，%)

3 討 論

血流感染已經(jīng)成為臨床常見且嚴(yán)重的感染性疾病，了解血流感染的病原菌及耐藥性，對臨床診斷和指導(dǎo)用藥，提高治愈率，降低病死率有重要意義［2］。本研究臨床送檢標(biāo)本共1 764份，分離出病原菌179株，陽性率為10.1%，與報道接近［3］，其中革蘭陽性菌68株(38.0%)，革蘭陰性菌111株(62.0%);大腸埃希菌、凝固酶陰性菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌是血培養(yǎng)陽性主要致病菌。

隨著近年來醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展進(jìn)步，侵入性治療和檢查的增多破壞了人體正常防御機(jī)制，凝固酶陰性葡萄球菌成為血流感染第一位的病原菌［4］。該菌可產(chǎn)生大量的細(xì)胞間脂多糖黏附素與細(xì)胞外黏液樣物質(zhì)，可通過不同途徑吸附在導(dǎo)管表面，因此也可引起導(dǎo)管相關(guān)感染［5］。有資料顯示，血培養(yǎng)中分離凝固酶陰性葡萄球菌被認(rèn)為污染或者可疑污染比例可達(dá)44.1%［6］。所以，應(yīng)結(jié)合患者是否具有菌血癥的癥狀(如白細(xì)胞計數(shù)是否升高等)綜合判斷［7］。

本研究革蘭陰性菌的感染以大腸埃希菌居多，其次為肺炎克雷伯菌和銅綠假單胞菌，這與文獻(xiàn)報道基本一致［8］。革蘭陰性桿菌的耐藥機(jī)制種類繁多，產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌的檢出率為34.63%，產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯菌的檢出率為12.85%。產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對亞胺培南、美洛培南、頭孢替坦、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌藥敏感，可作為治療性藥物。但大多數(shù)的革蘭陰性菌對青霉素類和一、二代頭孢菌素的耐藥率較高均在30%以上，對氨芐西林的耐藥率最高，在75%以上。據(jù)文獻(xiàn)報道，產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶腸桿菌耐藥性高于非產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶［9］。

由于各類侵入性治療、廣譜抗生素的廣泛使用，血流感染中的細(xì)菌耐藥率也在上升，給臨床治療帶來很大的困難［10］。臨床醫(yī)生應(yīng)高度重視細(xì)菌的培養(yǎng)和藥敏結(jié)果，仔細(xì)研究病原菌的耐藥率和藥敏結(jié)果，了解病原菌的耐藥規(guī)律結(jié)合患者的自身情況合理使用抗菌藥物，以減少廣譜抗生素的使用，使耐藥菌株產(chǎn)生的幅度降低，尤其是多重耐藥菌株的產(chǎn)生。

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(本文編輯:劉斯靜)

Distribution and drug resistance of pathogenic bacteria in 1 764 blood samples by culture

SUN Qian1，WANG Cong1，JIA Xi1，SUN Ya-kun1，CHEN Mei-hong2*
( 1． Department of Laboratory，the First Central Hospital of Baoding City，Hebei Province， Baoding 071000，China; 2． Department of Electrocardiographic Room，the First Central Hospital of Baoding City Hebei Province，Baoding 071000，China)

Objective To understand the composition of the common pathogens in blood culture and a variety of pathogens to antimicrobial agents in the hospital.To offer the basis for the rational use of antimicrobial drugs to solve the patients＇pain.MethodsThe collection involved 1 764 blood samples. France bioMérieux BacT/Alert3D fully automatic blood culture instrument，supporting medium，identification system were used to identify the pathogens and susceptibility test.ResultsA total of1 764 blood samples showed the culture positive rate 10.1%，and there were 179 isolated positive bacteria，among which gram-positive bacteria were 68(38.0%)，gram-negative bacteria 111(62.0%)，at the first place of pathogens as E.coli followed by coagulase-negative bacteria，Klebsiella pneumonia，Pseudomonas aeruginosa.The susceptibility results showed that most of the detected pathogens were resistant to different anti-bacteria agents.ConclusionClinicians should pay attention to early blood culture of patients，and strictly stick to the rational use of antimicrobial agents based on susceptibility results.

axenic culture;drug resistance，bacterial;microbial sensitivity tests

R37

A

1007-3205(2015)02-0177-04

2014-04-02;

2014-05-19

孫茜(1972-)，女，河北保定人，河北省保定市第一中心醫(yī)院副主任檢驗師，醫(yī)學(xué)碩士，從事臨床檢驗學(xué)研究。

*通訊作者

10.3969/j.issn.1007-3205.2015.02.020