魏宏蓮，王 崇，蘇軍華，時東彥

（河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院檢驗科，河北石家莊050000）

臨床分離銅綠假單胞菌耐藥性分析與監(jiān)控管理

魏宏蓮，王 崇，蘇軍華，時東彥*

（河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院檢驗科，河北石家莊050000）

目的 回顧性分析臨床分離的418株銅綠假單胞菌，觀察其科室分布及耐藥性特征，并對多重耐藥銅綠假單胞菌采取有效控制措施。方法采用法國Vitek 2 compact全自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)進(jìn)行鑒定與藥敏試驗，參照CLSI 2012版標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果，數(shù)據(jù)分析采用WHONE 5.6軟件。結(jié)果418株銅綠假單胞菌主要來源于呼吸內(nèi)科、重癥監(jiān)護(hù)病房、神經(jīng)外科；標(biāo)本以呼吸道痰液為主占78.72%；阿米卡星耐藥率最低為4.79%，其次為頭孢吡肟和頭孢他啶，分別為25.36%和29.19%，其余抗菌藥物耐藥率均超過30%，其中氨曲南耐藥率最高為50.72%。結(jié)論 銅綠假單胞菌分離主要來自下呼吸道標(biāo)本，其耐藥性較高。臨床應(yīng)重視藥敏試驗并合理使用抗菌藥物，同時加強銅綠假單胞菌的監(jiān)控與感染管理。

銅綠假單胞菌；抗菌藥；抗藥性

銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）屬于假單胞菌屬，是一種需氧革蘭陰性桿菌，廣泛存在于醫(yī)院的環(huán)境中，是臨床上常見的院內(nèi)獲得性感染的重要致病菌，可引起嚴(yán)重的感染如肺炎、泌尿系統(tǒng)感染和創(chuàng)面感染等［1］。由于其較強的耐藥性及生物膜形成，使得感染難以治愈。本研究回顧性分析我院住院患者銅綠假單胞菌臨床分布及耐藥特征，旨在加強預(yù)防管理與感染監(jiān)控，結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 418株銅綠假單胞菌分離自2013年1月—2014年1月我院住院患者送檢的痰液、肺泡灌洗液、尿液、分泌物和血液等標(biāo)本，剔除同一患者同一部位重復(fù)分離的菌株。

1.2 菌株分離鑒定和藥敏 標(biāo)本的接種、分離培養(yǎng)嚴(yán)格按照無菌操作進(jìn)行，鑒定和藥敏試驗采用法國生物梅里埃Vitek 2 compact全自動微生物分析系統(tǒng)。

1.3 藥敏結(jié)果判讀 參照2012版CLSI標(biāo)準(zhǔn)，質(zhì)控菌株為銅綠假單胞菌ATCC27853，標(biāo)準(zhǔn)菌株來自衛(wèi)生部臨檢中心。

1.4 數(shù)據(jù)處理 標(biāo)本臨床資料和鑒定、藥敏結(jié)果導(dǎo)入WHONET5.6軟件數(shù)據(jù)庫進(jìn)行統(tǒng)計分析，分離于同一患者的只對初次分離株進(jìn)行分析。

2 結(jié) 果

我院2013年1月—2014年1月共分離出418株銅綠假單胞菌，其中黏液型銅綠假單胞菌15株，黏液型銅綠假單胞菌對哌拉西林／他唑巴坦、頭孢他啶、頭孢吡肟、亞胺培南、美洛培南、慶大霉素、環(huán)丙沙星、阿米卡星、哌拉西林耐藥率均小于10%。標(biāo)本主要來源于下呼吸道的痰液，329株（78.72%），其次為灌洗液、分泌物和尿液，分別為26株（6.22%）、23株（5.50%）和22株（5.26%），其他的18株（4.31%）。以呼吸內(nèi)科、重癥監(jiān)護(hù)室和神經(jīng)外科分離率較高，分別為161株（38.52%）、89株（21.29%）、83株（19.86%）。其次依次為心臟內(nèi)科26株（6.22%）、消化內(nèi)科21株（5.02%）、普外科20株（4.78%）、兒科18株（4.31%）。418株銅綠假單胞菌對11種抗菌藥物的耐藥率，最高的是氨曲南212株（50.72%），其次為慶大霉素198株（47.37%）和哌拉西林177株（42.34%），除頭孢吡肟（25.36%）和頭孢他啶（29.19%）外，其他藥物耐藥率超過30%。見表1。

表1 418株銅綠假單胞菌對11種抗菌藥物的耐藥率Table 1 Drug resistance of 418 isolates of Pseudomonas aeruginosa to 11 anti-bacterial agents

3 討 論

銅綠假單胞菌廣泛存在于醫(yī)院的環(huán)境中，且具有天然多重耐藥性。隨著侵入性醫(yī)療操作的增多，抗生素和免疫抑制劑的廣泛使用，人口老齡化等因素，使該菌成為醫(yī)院感染的重要病原菌，主要導(dǎo)致呼吸道、泌尿道和血液感染［2］。由其引起的醫(yī)院獲得性肺炎特別是呼吸機相關(guān)性肺炎約占10%～35%，已成為醫(yī)院獲得性肺炎的主要致病菌。其主要致病物質(zhì)是內(nèi)毒素，此外還有菌毛、莢膜、胞外酶和外毒素等多種致病因子。多重耐藥和泛耐藥成為銅綠假單胞菌感染的一個嚴(yán)重問題，及時有效地監(jiān)測銅綠假單胞菌分布，掌握其耐藥性，顯得極為重要。

我院銅綠假單胞菌的標(biāo)本來源以下呼吸道痰液為主，占到78.72%，與張譯心等［3］報道的71.9%類似，但明顯高于莫善穎等［4］報道的44.2%。其次為肺泡灌洗液、分泌物和尿液。分離科室主要是呼吸內(nèi)科、重癥監(jiān)護(hù)室和神經(jīng)外科，占到總分離率的70%，具有我院獨有的特色，可能與我院是綜合性醫(yī)院和送檢標(biāo)本種類有關(guān)。我院銅綠假單胞菌耐藥性明顯偏高，對阿米卡星（4.79%）耐藥率最低，其次為頭孢吡肟（25.36%），比Mohnarin 2011年全國細(xì)菌耐藥監(jiān)測結(jié)果阿米卡星（23.4%）低，而頭孢吡肟（21.2%）略高［5］，同2005年我院銅綠假單胞菌比較阿米卡星和頭孢吡肟耐藥率有所下降［6］，但與2011年亞胺培南和美羅培南的耐藥率24.6%和20.3%比較有明顯升高［7］，原因可能與患者臨床用藥受限有關(guān)。這和黃燕新等［8］報道的亞胺培南的耐藥率10.5%有明顯差異。環(huán)丙沙星耐藥率在35%以上，明顯高于龐眾多等［9］報道的低于20%。哌拉西林的敏感性下降到42.34%，因此不建議哌拉西林作為治療銅綠假單胞菌感染特別是重癥感染的經(jīng)驗性用藥。

418株菌中我們共分離15株黏液型銅綠假單胞菌，由于黏液型銅綠假單胞菌產(chǎn)生大量藻酸鹽可在菌體外形成生物被膜，逃逸機體的免疫清除，一旦感染很難從患者體內(nèi)清除，是造成肺囊性纖維化的重要病原菌。氨曲南的耐藥性稍高，但明顯低于非黏液型。值得注意的是體外藥敏試驗僅測試了浮游細(xì)菌對抗菌藥物的敏感性，并不能反映其生物被膜對抗菌藥物的影響。這就造成了黏液型銅綠假單胞菌體外藥敏試驗敏感，但臨床用藥治療大多無效現(xiàn)象。原因可能是由于存在生物被膜，造成通透性差，抗菌藥物不易通過，即使抗菌藥物濃度很高，仍不能殺滅被膜下的細(xì)菌。生物被膜還能夠避免細(xì)菌與免疫細(xì)胞及抗體相互作用，抑制吞噬細(xì)胞吞噬，產(chǎn)生免疫逃逸，從而使細(xì)菌長期存在。除生物膜外主動外排泵系統(tǒng)在銅綠假單胞菌多重耐藥機制中起著主導(dǎo)作用。我們下一步將探討多重耐藥銅綠假單胞菌耐藥的分子機制并進(jìn)行菌株的同源性分析。銅綠假單胞菌引起的感染是難治的，但是近年來秦金喜等［10］發(fā)現(xiàn)其產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)綠膿素對光滑念珠菌和細(xì)菌體外有抑菌活性。

憑經(jīng)驗治療，不重視藥敏試驗，不合理使用抗菌藥物，是造成銅綠假單胞菌耐藥日趨嚴(yán)重的主要原因。因此，回顧性分析相關(guān)危險因素，制定監(jiān)控與感染管理措施，有針對性地提出防控對策是至關(guān)重要的。我院加強了檢驗科、感染控制處和信息中心多科室合作，增加了銅綠假單胞菌感染的監(jiān)測力度，若出現(xiàn)疑似銅綠假單胞菌院感病例，網(wǎng)上直接預(yù)警并通知臨床科室，感染控制處人員親自現(xiàn)場指導(dǎo)如何消毒和患者隔離。感染患者和醫(yī)務(wù)人員均實施標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防措施，若無條件單間隔離的，盡量相同感染的安置在同一病室。同時做好環(huán)境清潔消毒，要求醫(yī)務(wù)人員嚴(yán)格執(zhí)行手衛(wèi)生規(guī)范。從而減少了醫(yī)院內(nèi)獲得性銅綠假單胞菌感染的發(fā)生。

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（本文編輯：劉斯靜）

Clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa resistance analysis and monitoring management

WEI Hong-lian，WANG Chong，SU Jun-hua，SHI Dong-yan*
（Department of Laboratory Medicine，the Second Hospital of Hebei Medical University，Shijiazhuan g 050000，China）

ObjectiveTo retrospectively analyze 418 clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa，observe the department distribution and drug resistance characteristics，and take effective control for multi-drug resistant P.aeruginosa.MethodsVitek 2 compact automated microbial identification and susceptibility for identification and susceptibility testing were used.Data were analyzed according to CLSI 2012 breakpoints with WHONET 5.6 sofeware.Results418 isolates of P.aeruginosa were mainly from the respiratory medicine department，ICU and neurosurgery department.The samples from the sputum of respiratory tract were predominant，representing 78.72%.The drug resistance of P.aeruginosa to Amikacin was the lowest as 4.79%，followed by Cefepime and Ceftazidime，respectively，25.36%and 29.19%，and the rest of antimicrobial drug resistance rate over 30%，of which the highest Aztreonam was 50.72%.ConclusionP.aeruginosa is mainly from respiratory tract specimens higher resistance.Antimicrobial resistance surveillance plays an important role in controlling hospital infection.The monitoring and management measures should be strengthened.

Pseudomonas aeruginosa；anti-bacterial agents；drug resistance

R378

A

1007-3205（2015）01-0045-03

2014－07－17；

2014－08－13

魏宏蓮（1975－），女，河北深州人，河北醫(yī)科大學(xué)的第二醫(yī)院副主任檢驗師，醫(yī)學(xué)學(xué)士，從事臨床微生物耐藥性研究。

*通訊作者。E-mail：shidongyan73＠126.com

10.3969／j.issn.1007-3205.2015.01.017