張慧娟，梁宗夏，廖少羽，楊 海，鐘 羨，羅偉軍

惠州市第三人民醫(yī)院，廣東 惠州 516002

彌漫性結(jié)締組織病是風(fēng)濕性疾病中的一大類疾病，其免疫學(xué)特征是患者產(chǎn)生自身抗體。本文對246例分別患有系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、系統(tǒng)性硬化癥（PSS）、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）、混合性結(jié)締組織?。∕CTD）、皮肌炎和多發(fā)性皮肌炎（PD/PM）、干燥綜合征（SS）、重疊綜合征（OLs）等彌漫性結(jié)締組織病患者進(jìn)行抗ANA多肽抗體譜檢測，并探討ANA譜與彌漫性結(jié)締組織病發(fā)生的相關(guān)性及對臨床診斷的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2006年6月～2014年4月來我院住院及門診患者246例病人及健康人對照血清160例。其中女169例，男77例，女：男為2.19:1，平均年齡57.8±16.9歲，彌漫性結(jié)締組織病246病人中，其中系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）34例，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）29例，混合性結(jié)締組織?。∕CTD）28例，進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（PSS）87例；多發(fā)性肌炎／皮肌炎（DM/PM）35例；干燥癥（SS）22例；重疊綜合征(OLs)11例。健康人血清160例。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

（1）SLE符合1997年美國風(fēng)濕病協(xié)會(huì)（ACR）修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）RA按1987年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)；（3）混合性結(jié)締組織病按1986年8月在日本東京召開的國際學(xué)術(shù)討論會(huì)上sharp（美國）標(biāo)準(zhǔn)；（4）皮肌炎按1982年Maddin等提出的診斷標(biāo)準(zhǔn)；（5）系統(tǒng)性硬化癥（PSS）按1995年施守義所提出的診斷標(biāo)準(zhǔn)；（6）原發(fā)性干燥綜合征（PSS）符合2002年歐洲研究組標(biāo)準(zhǔn)；（7）重疊綜合征（OLs）采用鈴木提出的診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］。

1.3 試劑與方法

試劑采用深圳亞輝龍生物制品有限公司提供的抗核抗體（ANA）譜試劑盒。采用Western blot法，可同時(shí)檢測抗 dsDNA、Histone、抗 SmD1、抗 U1-snPNP、抗SSA/Ro60KD、抗SSA/Ro52KD、抗CENP-B、抗SCl-70、抗Jo-1，結(jié)果判斷以檢測膜條出現(xiàn)功能質(zhì)控帶和判斷指示帶為標(biāo)準(zhǔn)，具體操作均按試劑盒操作說明書進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

不同組別間率的比較用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

ANA用硝酸纖維膜上的顯色帶與陽性標(biāo)準(zhǔn)對照判斷陽性抗體，共檢測246例彌漫性結(jié)締組織病患者標(biāo)本，檢測彌漫性結(jié)締組織病患者與對照組ANA抗體譜陽性率比較，見表1。

表1 彌漫性結(jié)締組織病患者與對照組ANA抗體譜陽性率比較（n,%）

3 討論

抗核抗體是以真核細(xì)胞抗核體是以真核細(xì)胞的核成份為靶抗原的自身抗體的總稱［2］。由于抗原不同，從而產(chǎn)生了針對細(xì)胞核的多種成分的抗體群。ANA有3個(gè)組成部分：抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體和可提取的核抗原（ENA），ENA又包括抗Sm、抗UIRNP、抗SSA、抗SSB、抗Scl-70抗體等多種自身抗體［3］。本研究結(jié)果顯示抗dsDNA抗體陽性率在SLE患者為44.1%，顯著高于MCTD的25%、DM/PM的5.7%（P<0.05）。PSS和SS患者抗dsDNA抗體均為陰性。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者自身抗體的主要診斷指標(biāo)是抗dsDNA、抗Sm的陽性檢出率分別為44.1%和47%，在對照組中可以看到：陽性檢出率均為1.3%。可見抗dsDNA、抗Sm在診斷SLE有極顯著意義。SLE患者中抗ANA抗體與臨床癥狀有關(guān)?？筍m是酸性糖蛋白，有人認(rèn)為它是SLE的標(biāo)記抗體?？笰NA抗體陽性譜的分布有一定傾向性，SLE癥狀緩解，抗ANA抗體條帶數(shù)減少［4］。

混合性結(jié)締組織病是一種綜合征，其特點(diǎn)為臨床上具有系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性肌炎及系統(tǒng)性硬化癥等結(jié)締組織病的臨床表現(xiàn)，但又不符合其中一種疾病的診斷，且在血清中有高效價(jià)抗核糖核蛋白（RNP）抗體的一種自身性免疫性疾病。本實(shí)驗(yàn)測得抗UIRNP抗體的陽性為96.4%。對照組抗UIRNP抗體陽性率則為0.6%。故抗UIRNP抗體是MGTD的特征抗體，對診斷MCTD具有極顯著意義。

系統(tǒng)性硬皮病（PSS）是一種全身性結(jié)締組織病，以皮膚和各臟器系統(tǒng)（如胃腸道、肺、心、腎等）的炎癥、血管和膠原纖維化的病損為主要表現(xiàn)，是一種以血管病變和嚴(yán)重纖維化為特征的結(jié)締組織?。?-6］。有研究報(bào)道無論是PSS伴隨繼發(fā)性雷諾現(xiàn)象還是原發(fā)性雷諾現(xiàn)象時(shí)，PSS患者體抗Scl-70抗體水平均顯著升高，提示微血管受累，且繼發(fā)性雷諾現(xiàn)象的病程與機(jī)體抗Scl-70抗體平增高呈正相關(guān)［7］?？筍cl-70抗體被視為PSS的血清標(biāo)記性抗體，陽性常與彌漫性皮膚病變、近端皮膚累及、心臟受累、并發(fā)腫瘤及肺間質(zhì)纖維化密切相關(guān)，被認(rèn)為是預(yù)后不良的指標(biāo)[8]?？笴ENP-B在PSS中陽性率較高，達(dá)13.8%，但特異性較差。雖然目前認(rèn)為抗CENP-B也是PSS的標(biāo)志性抗體之一，但在臨床應(yīng)用中應(yīng)注意鑒別診斷。PSS患者系統(tǒng)受累是其死亡的主要原因，尤其是硬皮病腎危象、肺間質(zhì)病變和肺動(dòng)脈高壓［9-10］，因此早期診斷和治療系統(tǒng)受累是改善PSS預(yù)后的關(guān)鍵。

本研究中SS患者抗SSA抗體和抗SSB抗體陽性率為68.2%和59.1%，SLE患者抗SSA抗體和抗SSB抗體陽性率為32.4%和14.7%，二者間無明顯差異?？筍SA抗體和抗SSB抗體在部分正常人中陽性率為4.4%和2.5%，這意味著抗SSA抗體和抗SSB抗體診斷SS的特異性并不高。但兩者聯(lián)合檢測可提高SS診斷率［11］。

多發(fā)性肌炎（PM）和皮肌炎（DM）抗J0-1陽性檢出率為31.4%組陽性率為0%，有較好特異性。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）：抗dsDNA、抗JO-I陽性檢出率分別為6.9%、6.9%，而對照組則為1.3%和0%。檢測抗dsDNA、抗JO-I對診斷RA有一定意義但不具特異性，故應(yīng)結(jié)合其它實(shí)驗(yàn)檢查和臨床表現(xiàn)進(jìn)行診斷。

重疊綜合征是指患者同時(shí)或先后出現(xiàn)兩種或兩種以上明確診斷的結(jié)締組織病，一般為多發(fā)性肌炎（PM）、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、舍格倫綜合征（SS）、系統(tǒng)性硬化中的兩種或兩種以上的疾病重疊。本組并存的風(fēng)濕病以PSS、SLE和RA為主，抗dsDNA、抗Sm、抗UIRNP、抗SSA抗體的陽性率為45.4%、18.2%、45.4%、18.2%。本實(shí)驗(yàn)分析中發(fā)現(xiàn)重疊綜合征患者的抗dsDNA、抗Sm、抗UIRNP、抗SSA抗體的陽性率較高，且抗ANA抗體譜有多個(gè)抗體出現(xiàn)，因此，實(shí)驗(yàn)室檢查重疊綜合征的診斷能提供可靠的依據(jù)。

綜上所述，抗ANA多肽抗體譜檢測靈敏度高、結(jié)果可靠、方法簡便、易于推廣，對彌漫性結(jié)締組織病患者的診斷有重要的臨床價(jià)值。不同的抗ANA抗體在各種彌漫性結(jié)締組織病患者中的陽性率有明星差異，有些自身抗體屬某些疾病的標(biāo)記性抗體或特異性抗體，對自身免疫性疾病的診斷與鑒別診斷有極為重要的意義。

［1］王洪武,劉又寧,樸哲龍,等.結(jié)締組織病重疊綜合征37例臨床分析［J］.臨床內(nèi)科雜志,2001,18(5):369-71.

［2］馬東來，張少靜，（德）斯特克.自身抗體及免疫熒光模式[M].北京科學(xué)出版社,2000:32-8.

［3］葉應(yīng)嫵,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.南京:東南大學(xué)出版社,2006:655-66.

［4］鄧安梅,仲人前,施笑梅,等.自身免疫病患者可抽提核抗體譜與體液免疫的關(guān)系［J］.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1999,22(5):42-5.

［5］葉任高,陸再英.內(nèi)科學(xué).［M］6版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:933-6.

［6］ Steen VD.Clinical manifestations of systemic sclerosis［J］.Semin Cutan Med Surg,1998,17(1):48-54.

［7］ Sulli A,Soldano S,Pizzorni C,et al.Raynaud's phenomenon and plasma endothelin:correlations with capillaroscopic patterns in systemic sclerosis［J］.J Rheumatol,2009,36(6):1235-9.

［8］楊 海,梁宗夏,張慧娟,等.抗Scl-70抗體檢測與臨床應(yīng)用［J］.中國免疫學(xué)雜志,2014,30(4):533-4.

［9］ Koenig M,Dieude M,Senecal JL.Predictive value of antinuclear autoantibodies:The lessons of the systemic sclerosis autoantibodies［J］.Autoimmun Rev,2008,7(8,SI):588-93.

［10］ Bussone G,Berezne A,Pestre V,et al.The scleroderma kidney:progress in risk factors,therapy,and prevention［J］.Curr Rheumatol Rep,2011,13(1):37-43.

［11］冀春梅,王振明,馬居鳳.抗核抗體譜檢測在自身免疫性疾病中的意義［J］.實(shí)用醫(yī)技雜志,2008,15(5):583-4.