向文軍，黃宇，鄧雙強(qiáng)

(四川文理學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院，四川 達(dá)州 635000)

何首烏為蓼科植物何首烏的干燥塊根，具有延緩衰老、益壽延年之功效。二苯乙烯苷是何首烏中特有的生物活性成分，從結(jié)構(gòu)可知，屬糖苷類(lèi)極性化合物，具有多個(gè)羥基，具有良好的水溶性，同時(shí)具有抗氧化清除自由基、降低膽固醇、保肝等多重功能，應(yīng)用廣泛［1-2］。作為抗衰老的標(biāo)的組分，所以二苯乙烯苷類(lèi)化合物的含量作為何首烏及其制劑的質(zhì)控指標(biāo)。國(guó)際市場(chǎng)對(duì)二苯乙烯苷需求較大。目前，何首烏的有效成分二苯乙烯苷的提取工藝有文獻(xiàn)報(bào)道的有:高純水提取、乙醇提取、微波提取等工藝，但其所得產(chǎn)品純度都不夠高［3-4］。

CO2超臨界萃取效率高，工藝的萃取溫度較低，可使中草藥中有效成分免遭破壞，保持其生物活性;且萃取工藝中傳質(zhì)速度快、萃取率髙、萃取速度快;CO2無(wú)毒，分離容易，不殘留有機(jī)溶劑，產(chǎn)品純天然，同時(shí)節(jié)約了大量的有機(jī)溶劑，無(wú)環(huán)境污染［5-7］。

本文采用CO2超臨界萃取何首烏中的有效成分二苯乙烯苷，由于CO2超臨界流體是一種非極性溶劑，加入極性挾帶劑乙醇，得到的產(chǎn)品純度較高。產(chǎn)品結(jié)構(gòu)式如下:

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料與儀器

何首烏，四川萬(wàn)源;無(wú)水乙醇、甲醇均為分析純;超純水;二苯乙烯苷對(duì)照品(HPLC≥98%)，南京廣潤(rùn)生物制品有限公司。

HL-2L/50MPA-IIA 型超臨界萃取裝置;FZ102型粉碎機(jī);UPT 型超純水機(jī);DZ-2BCII 型電熱恒溫真空干燥箱。

1.2 提取方法

先將何首烏加入粉碎機(jī)粉碎呈粉末狀，精確稱(chēng)取200 g 裝入萃取桶，直接在萃取桶中加入挾帶劑150 mL。開(kāi)啟超臨界萃取裝置，對(duì)萃取釜和兩個(gè)分離釜分別加熱，當(dāng)萃取釜溫度達(dá)到45 ℃時(shí)，分離釜Ⅰ的溫度達(dá)到45 ℃，分離釜Ⅱ的溫度為30 ℃時(shí)，打開(kāi)CO2氣瓶，萃取釜加壓至35 MPa，分離釜Ⅰ的壓力為15 MPa，解析釜Ⅱ的壓力為5 MPa 時(shí)，開(kāi)始循環(huán)萃取，CO2流量為12.5 L/h 時(shí)，可保持各釜壓力平衡。萃取2.5 h 后，泄壓，停止萃取，打開(kāi)萃取釜和分離釜底閥，取得分離產(chǎn)品。用乙醇溶解，用大孔樹(shù)脂過(guò)濾，將濾液放入真空干燥箱室溫下干燥3 h，即得產(chǎn)品。與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，通過(guò)液相測(cè)得含量，計(jì)算萃取收率。

2 結(jié)果與討論

2.1 萃取溫度對(duì)提取二苯乙烯苷的影響

實(shí)驗(yàn)方法同1.2 節(jié)，分別將萃取釜溫度定位30，35，40，45，50 ℃，其他實(shí)驗(yàn)條件不變，萃取收率見(jiàn)圖1。

圖1 萃取溫度對(duì)二苯乙烯苷收率的影響Fig.1 The effect of extraction temperature on the yield of two styrene glycosides

由圖1 可知，萃取溫度在30 ～45 ℃之間，溫度升高，有利于溶質(zhì)溶解，萃取收率逐漸升高。但超過(guò)45 ℃時(shí)，由于二苯乙烯苷屬糖苷類(lèi)化合物，穩(wěn)定性較差，萃取收率反而降低。

2.2 萃取壓力對(duì)提取二苯乙烯苷的影響

實(shí)驗(yàn)方法同1. 2 節(jié)，分別將萃取釜壓力定為27.5，30，32.5，35，37.5 MPa，其他實(shí)驗(yàn)條件不變，萃取收率見(jiàn)圖2。

圖2 萃取壓力對(duì)二苯乙烯苷收率的影響Fig.2 The effect of extraction pressure on the yield of two styrene glycosides

由圖2 可知，萃取壓力加大，CO2流體密度越大，溶解效果越好，萃取收率越高。壓力達(dá)到35 MPa以后，上升不再明顯。因此，確定最佳萃取壓力為35 MPa。

2.3 萃取時(shí)間對(duì)提取二苯乙烯苷的影響

實(shí)驗(yàn)方法同1.2 節(jié)，分別將萃取時(shí)間定為1，1.5，2，2. 5，3 h，其他實(shí)驗(yàn)條件不變，萃取收率見(jiàn)圖3。

圖3 萃取時(shí)間對(duì)二苯乙烯苷收率的影響Fig.3 The effect of extraction time on the yield of two styrene glycosides

由圖3 可知，萃取時(shí)間越長(zhǎng)，溶質(zhì)在溶劑中溶解的越充分，2.5 h 時(shí)已達(dá)到充分溶解，再延長(zhǎng)萃取時(shí)間，收率無(wú)明顯變化，故萃取時(shí)間選擇2.5 h。

2.4 CO2流量對(duì)二苯乙烯苷萃取率的影響

實(shí)驗(yàn)方法同1.2 節(jié)，分別將CO2流量定為7.5，10，12.5，15，17.5 L/h，其他實(shí)驗(yàn)條件不變，萃取收率見(jiàn)圖4。

圖4 CO2 流量對(duì)二苯乙烯苷萃取率的影響Fig.4 The effect of carbon dioxide flux on the extraction of two styrene glycosides

由圖4 可知，CO2流量對(duì)二苯乙烯苷萃取率的影響相對(duì)較小，流量越大，傳質(zhì)推動(dòng)力越大，溶解越容易，萃取率升高。但CO2流量越大，CO2氣體要的越多，造成不必要的浪費(fèi)，本實(shí)驗(yàn)選擇CO2流量12.5 L/h。

2.5 挾帶劑對(duì)提取二苯乙烯苷的影響

實(shí)驗(yàn)方法同1.2 節(jié)，分別加入挾帶劑無(wú)水乙醇、甲醇、超純水100，125，150，175，200 mL，其他實(shí)驗(yàn)條件不變，萃取收率見(jiàn)圖5。

圖5 不同挾帶劑對(duì)二苯乙烯苷收率的影響Fig.5 The effect of different entraining agent on the yield of two stilbene glucosides

由圖5 可知，加入挾帶劑乙醇萃取率較甲醇、超純水高，且在加入挾帶劑150 mL 時(shí)萃取率達(dá)到最佳。挾帶劑超純水后處理較甲醇、無(wú)水乙醇困難，萃取率最低。挾帶劑過(guò)多，則減弱了CO2超臨界萃取的作用，萃取率反而下降。本實(shí)驗(yàn)得出，加入挾帶劑150 mL 無(wú)水乙醇，萃取率達(dá)到最大。

3 結(jié)論

CO2超臨界萃取何首烏中的有效成分二苯乙烯苷，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)，確定加入挾帶劑乙醇150 mL，萃取時(shí)間2.5 h，萃取溫度45 ℃，CO2流量12.5 L/h，萃取壓力35 MPa，得率為4.64%。后處理簡(jiǎn)單、純度高、萃取收率好，有利于二苯乙烯苷的工業(yè)化及作為藥用的機(jī)理研究。

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