張恩輝

長春市第二醫(yī)院檢驗科，吉林長春130062

血小板功能實驗分析前質(zhì)量控制分析

張恩輝

長春市第二醫(yī)院檢驗科，吉林長春130062

目的分析血小板功能的影響因素，為建立和完善血小板功能分析的質(zhì)量控制體系。方法2012年12月—2014年12月隨機選取300名志愿者靜脈血液,在不同血小板血漿量、血小板濃度、誘導劑濃度、血樣放置時間、抗凝劑種類實驗條件下,采用血漿比濁法進行血小板聚集率檢測。結(jié)果血小板濃度1.0×1011/L以下時對血小板凝聚具有明顯影響（P＜0.05）；血小板聚集率隨誘導劑濃度增高而增高,在AA為0.4 mmol/L時,聚集率最低，在從0.7 mmol/L血小板聚集率最高，之后隨AA濃度增大到1.3 mmol/L時，聚集率由（72.9±13.4）降低到（66.7±15.6），有降低的趨勢；樣本常溫放置8 h后血小板聚集率降低明顯；枸櫞酸對血小板凝血作用最明顯。結(jié)論控制血小板功能試驗前的各項影響指標，放置時間，血液樣本的抗凝劑的選擇，誘導劑的選擇都需要嚴格注意，為保證實驗結(jié)果的準確性。

血小板；凝血功能；質(zhì)量控制

血小板聚集是血小板的一個重要生理特性，是其參與止血和血栓形成過程的重要因素之一[1-3]。血小板功能檢測對于臨床相關疾病的診斷和抗血小板藥物的篩選及相關研究有著重要的意義[4-6]。2012年12月—2014年12月該院隨機選取300名健康的志愿者的新鮮血液進行血小板功能檢測，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2012年12月—2014年12月隨機選取300名健康的志愿者的新鮮血液，其中男性為140人，女性為160人。將血液標注1-300，根據(jù)實驗目的不同再進行分組，分別進行不同的血液凝聚實驗。

1.2 實驗方法

（1）不同血小板血漿量對血液聚集的影響，實驗血液樣本為300例，血液比濁法，取血液400 uL，加入枸櫞酸抗凝，分離出血小板血漿，貧血小板血漿，調(diào)血小板數(shù)目至2.5×1011/L后，分別取400 uL、600 uL置于凝聚杯中，分別加入相同誘導劑，分別測凝聚率。

（2）血小板血漿濃度對血液凝聚的影響計算血小板血漿數(shù)，用貧血小板血漿將富血小板血漿配置濃度為2.5× 1011/L、1.5×1011/L、1.0×1011/L/0.5×1011/L五組，加入誘導劑，測得凝聚率。

（3）誘導劑的濃度對血液聚集影響，血漿比濁法，分別取血液400 uL，分離出血小板血漿與貧血小板血漿。計算血小板血漿數(shù)，調(diào)血小板數(shù)目至2.5×1011/L后，加入不同濃度的誘導劑花生四烯酸，0.4 mmol/L、0.5 mmol/L、0.7 mmol/L、1.1 mmol/L、1.3 mmol/L，測凝聚率。

（4）放置時間：分別取400 uL置于6個聚集杯中，放置2 h,4 h 6 h，10 h,24 h，后測凝聚率。

（5）不同抗凝劑對于血小板血漿凝聚影響，分別加入枸櫞酸，乙二胺四乙酸和肝素，置于凝聚杯中，測得凝聚率。

1.3 統(tǒng)計方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理和分析,計量資料采用形式表示，t檢驗、方差分析等統(tǒng)計學方法，計算P值，若有P＜0.05，說明差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不同血小板血漿量量對血液聚集的影響

血小板血漿量分別為400 uL、600 uL對血小板聚集的影響，配對t檢驗400 uL、600 uL組值之間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

表1 不同血小板血漿量量對血液聚集的影響

表1 不同血小板血漿量量對血液聚集的影響

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2.2 血小板血漿濃度對血液凝聚的影響

與富血小板血漿配置濃度為2.5×1011/L進行對比，富血小板血漿配置濃度為1.0×1011/L、0.5×1011/L時差異有統(tǒng)計學意義。與1.5×1011/L比較差異無統(tǒng)計學意義。

表2 血小板血漿濃度對血液凝聚的影響

表2 血小板血漿濃度對血液凝聚的影響

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2.3 誘導劑的濃度對血液聚集影響

隨AA濃度增高,聚集率降低,0.7 mmmol/L組值只與0.4 mmol/L組t值=-3.3差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

表3 不同濃度誘導劑對血小板聚集的影響

表3 不同濃度誘導劑對血小板聚集的影響

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3 討論

通過實驗結(jié)果我們可以看出，血小板血漿量分別為400 uL、600 uL對血小板聚集無明顯影響，血小板血漿配置濃度為2.5×1011/L進行對比，配置濃度為1.0*1011/L、0.5×1011/L差異有統(tǒng)計學意義，1.5×1011/L差異無統(tǒng)計學意義，誘導劑濃度為0.4 mmol/L時,聚集率最低，0.7 mmol/L血小板聚集率最高，AA濃度增高,聚集率降低,0.7 mmmol/L組與0.4 mmol/L組值差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。在AA 1.0 mmol/L濃度時,8 h后血小板聚集率降低明顯,時間2 h組與4 h、6 h、組之間AA聚集率差異無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，AA為0.5 mmol/L濃度時,2 h組同6 h、8 h組值之間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05），說明濃度較低時放置時間對于血小板凝聚具有顯著作用。同李祖蘭等[7-8]的研究方法一致。

血小板的凝聚實驗是一個非常嚴謹?shù)募夹g，為了得到更加精確，準確的診斷結(jié)果，就需要對實驗過程更加精細，所以對于血小板檢測就需要更加敏感和特異在進行血小板功能實驗分析前應當對實驗的條件即樣本放置時間，抗凝劑，誘導劑種類等各方面做到均一化，為保證得到準確、可靠，經(jīng)濟的實驗結(jié)果提供根據(jù)。

[1]邵永生.組合檢驗法在EDTA依賴性假性血小板減少癥中的應用[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2013,33(16)：2036.

[2]周倩.1種血細胞分離機預測采集后血小板計數(shù)的評估[J].中國輸血雜志,2012,25(10)：957.

[3]尹小明.SD大鼠血小板聚集實驗測定方法的研究[J].南昌大學學報：醫(yī)學版,2013,53(8)：6.

[4]王志杰.血小板功能與抗體檢查[J].中外健康文摘，2012,9 (24)：102.

[5]張永紅.血小板功能檢測進展及臨床應用[J].臨床合理用藥雜志，2012,5(23)：216.

[6]萬鵬,童華生,張興欽,等.新型凝血和血小板功能分析儀在彌散性血管內(nèi)凝血早期診斷中的價值[J].中國急救醫(yī)學，2014,34(9)：96.

[7]李祖蘭.血小板聚集實驗誘導劑儲存條件及配制[J].標記免疫分析與臨床,2012(4)：241-243.

[8]ThachilJ,TohCH.Currentconcepts in the management of disseminated intravascular coagulation[J].Thrombosis research, 2012(1)：54-59.

Experimental Analysis of Platelet Function Analysis of Quality Control

ZHANG En-hui
Changchun second hospital laboratory,Changchun,Jilin Province,130062 China

ObjectiveA Factor Analysis of platelet aggregation,for the establishment and improvement of platelet function analysis of the quality control system.Methods300 volunteers venous blood,platelet-rich plasma at different volume, platelet concentration,inducer concentration,blood storage time,type and experimental conditions anticoagulants plasma, plasma assay was performed using platelet aggregation testing.ResultsPlatelet concentration 1.0*1011/L or less obvious effect on platelet aggregation（P＜0.05）；induced platelet aggregation with increased and increased concentration in AA0.4mmol/L,the aggregation rate lowest in from 0.7mmol/L platelet aggregation highest rate further increased with the AA concentration,platelet aggregation rate decreased;sample placed at room temperature for 8h platelet aggregation rate decreased significantly;the most obvious citrate platelet clotting effect.ConclusionControl of platelet function tests before impact indicators,the accuracy of the experimental results has a crucial role.

Platelets;Coagulation;Quality control

R4

A

1674-0742（2015）11（a）-0189-02

2015-08-09）

張恩輝（1972-）,女，吉林長春人，本科，主管檢驗師，研究方向：臨床檢驗。