盧宇明 李 歡 劉 慧 鄢莎莎 陳思錦

1.遵義醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，貴州遵義 200032；2.川北醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，四川南充 637007

九項(xiàng)呼吸道病原體檢測(cè)在小兒呼吸道感染中的診斷價(jià)值

盧宇明1李 歡2劉 慧1鄢莎莎1陳思錦1

1.遵義醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，貴州遵義 200032；2.川北醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，四川南充 637007

目的 探討呼吸道病原體九聯(lián)檢在小兒呼吸道感染中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 對(duì)2012年3月—2013年4月期間在該院住院的呼吸道感染的患兒(共104例)采用九項(xiàng)呼吸道感染病原體IgM抗體檢測(cè)試劑（間接免疫熒光法）同時(shí)檢測(cè)九項(xiàng)病原體的IgM抗體。結(jié)果 在小兒呼吸道感染患者中，九種病原體檢出的陽性率為57.69%，其中主要以肺炎支原體最為常見，占陽性例數(shù)的56.7%，其次為腺病毒40%、嗜肺軍團(tuán)菌23.3%；混合感染占感染比例的33.3%。 結(jié)論 呼吸道病原體九聯(lián)檢在小兒呼吸道感染檢測(cè)中檢出陽性率高，檢測(cè)的病原體種類多，發(fā)現(xiàn)病原體時(shí)間早，對(duì)臨床的及時(shí)診斷、治療及用藥有十分重要的意義。

九聯(lián)檢；小兒呼吸道感染；IgM抗體；呼吸道病原體

呼吸道感染是兒科的常見病、多發(fā)病，發(fā)病率在我國(guó)小兒各類疾病中占首位，其病原體包括病毒、細(xì)菌、支原體、衣原體等，常見的有：呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、副流感病毒（HPIVs）、肺炎支原體（MP）、嗜肺軍團(tuán)菌（LP）。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在住院患兒中，上下呼吸道感染占60%以上，是我國(guó)5歲以下兒童第一位的死亡原因[1]。為了降低小兒呼吸道感染的死亡率，保護(hù)小兒生命健康，對(duì)于病原體的檢測(cè)尤為重要。常用的方法有：病原體的分離培養(yǎng)及組織細(xì)胞培養(yǎng)法、血清學(xué)、直接檢測(cè)法(包括電鏡法)、間接和直接免疫熒光抗體法(IFA／DFA)、酶免疫測(cè)定(EIA)、核酸擴(kuò)增法(PCR)、堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶橋聯(lián)酶標(biāo)(AP-PAAP)法等[2]；但由于小兒的特殊性，可靠的炎性分泌物難以獲得，而痰液和咽部分泌物檢測(cè)易引起口咽部污染，再加上抗生素的廣泛應(yīng)用，血培養(yǎng)陽性率較低，肺炎細(xì)菌病原學(xué)檢測(cè)困難，相對(duì)的小兒血清樣本容易獲得，檢測(cè)相關(guān)抗體較為方便，一份標(biāo)本就可同時(shí)檢測(cè)多種病原體，且特異性高，而且在機(jī)體抗感染中，IgM抗體是最早出現(xiàn)的抗體，血清中檢出IgM，常提示新近發(fā)生感染，可用于感染的早期診斷[3]，為治療贏得時(shí)間。因此該次實(shí)驗(yàn)選取2012年3月—2014年4月在該院就診的104例呼吸道感染的患兒，采用間接免疫熒光法，通過呼吸道病原體九聯(lián)檢，檢測(cè)呼吸道感染患兒血清中的肺炎支原體（MP）、肺炎衣原體（CP）、呼吸道合胞病毒(RSV)、副流感病毒（HPIVs）ⅠⅡⅢ型、嗜肺軍團(tuán)菌(LP)血清1型、腺病毒(ADV)、甲型流感病毒（Influenza A virus）、乙型流感病毒（Influenza B virus）、Q熱立克次體（CB）九類常見病原體的IgM抗體，以探討該方法在小兒呼吸道感染中的臨床應(yīng)用，為臨床用藥及治療提供可靠依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該院住院的呼吸道感染的0～6歲患兒，平均（1.6±0.3）歲，共計(jì)104例，其中男74例，女30例。無菌采集患有呼吸道感染的住院患兒的靜脈血數(shù)毫升，離心分離血清，于采集當(dāng)天由專人完成檢測(cè)。

1.2 方法

九聯(lián)檢檢測(cè) 采用間接免疫熒光法（IFA），基于待測(cè)樣本中的特異性抗體與吸附在載玻片上的特定抗原反應(yīng)，未與抗原結(jié)合的免疫球蛋白在洗滌步驟中除去，在接下來的步驟中，抗原-抗體復(fù)合物與熒光標(biāo)記的抗人球蛋白反應(yīng)，通過熒光顯微鏡即可觀察結(jié)果。質(zhì)量控制：每一次試驗(yàn)設(shè)立陰性和陽性對(duì)照，嚴(yán)格按照九聯(lián)檢試劑說明規(guī)范操作，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和有效性。試劑盒名稱：九項(xiàng)呼吸道感染病原體IgM抗體檢測(cè)試劑盒（PNEUMOSLIDE IgM）；產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：YZB/SPA 5210-2009。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均采用SPSS19.00軟件進(jìn)行處理，同組數(shù)據(jù)以陽性率表示，不同組間樣本陽性率比較采用χ2檢驗(yàn)。

表2 呼吸道感染中九種病原體陽性數(shù)

2 結(jié)果

104例患兒中，檢出陽性例數(shù)60例，陽性率57.69%；其中男性74例，陽性42例，陽性率56.76%；女性30例，陽性18例，陽性率60.00%。男性組與女性組間陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.09，P>0.05）,性別間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 呼吸道病原體IgM九聯(lián)檢陽性率

在所檢測(cè)的九種病原體中以肺炎支原體陽性率最高，占陽性例數(shù)的56.7%；其次是腺病毒，占陽性例數(shù)的40%；排在第三位的是嗜肺軍團(tuán)菌，占陽性例數(shù)的23.3%；第四位的是乙型流感病毒，占陽性例數(shù)的15.0%；第五位的是呼吸道合胞病毒，占陽性例數(shù)的10.0%；以上五種病原體占總陽性例數(shù)的94.6%，為呼吸道常見病原體。見表2。

在60例檢測(cè)出陽性的患兒中，有20例為混合型感染，比例為33.3%，其中以嗜肺軍團(tuán)菌+肺炎支原體+腺病毒、嗜肺軍團(tuán)菌+肺炎支原體、支原體+腺病毒三種類型最常見，分別為5例（23.8%）、5例（23.8%）、3例（14.3%）。肺炎支原體合并其它病原體感染合計(jì)18例，占混合感染的90.0%。見表3。

表3 混合型病原體感染情況

3 討論

呼吸道感染的發(fā)病率一直位居小兒各類疾病的首位，對(duì)它的早期診斷對(duì)于臨床治療及用藥有十分積極的意義。近年來，由于抗生素的廣泛應(yīng)用、病原體的變異及流行病學(xué)的改變等多種因素的影響，各種病原體在小兒呼吸道感染中的比例均有所變化，為臨床準(zhǔn)確用藥、對(duì)癥治療造成了一定困難；因此，我們針對(duì)各種病原體感染后引起血清抗體的改變，并結(jié)合IgM抗體的特點(diǎn)選擇了九聯(lián)檢這種試劑，僅需一份血清即可對(duì)呼吸道感染中的九種病原體進(jìn)行檢測(cè)，通過檢測(cè)患兒的血清，探討該方法在其中的臨床應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果表明，在小兒呼吸道感染患者中，九種病原體檢出的陽性率達(dá)57.69%，占呼吸道感染病原體的一半以上，且檢測(cè)的是機(jī)體抗感染中最早出現(xiàn)的IgM抗體，為臨床快速準(zhǔn)確地確定呼吸道感染的病因以及及時(shí)用藥治療有十分重要的意義。

在所檢測(cè)的九項(xiàng)病原體中，以肺炎支原體最為常見，占陽性例數(shù)的56.7%，較董玉琳?qǐng)?bào)道的21.98%高[4]，而比較接近國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道的50%，是小兒最易感染的呼吸道病原體，主要引起小兒上呼吸道感染和肺炎；其次是腺病毒，占陽性例數(shù)的40.0%，能引起上呼吸道疾病，常伴隨有急驟發(fā)熱和輕度呼吸道感染，在所檢測(cè)的腺病毒感染患兒中有22.7%出現(xiàn)不同程度的呼吸困難；第三位的是嗜肺軍團(tuán)菌，占陽性例數(shù)的23.3%；其后依次是乙型流感病毒15%，呼吸道合胞病毒10.0%，肺炎衣原體和甲型流感病毒3.3%，副流感病毒0%。該次實(shí)驗(yàn)中未發(fā)現(xiàn)副流感病毒，可能與該病原體感染的患者數(shù)目較少有關(guān)。在該次實(shí)驗(yàn)60例病原體檢出陽性患兒中，有20例屬于混合型感染，占感染比例的33.3%，混合感染的比例較高，主要以嗜肺軍團(tuán)菌+肺炎支原體+腺病毒、嗜肺軍團(tuán)菌+肺炎支原體、肺炎支原體+腺病毒三種類型最常見，分別為5例（23.8%）、5例（23.8%）、3例（14.3%），合計(jì)占混合感染的65.0%，提示臨床醫(yī)生在治療呼吸道感染的患兒時(shí)注意混合感染的情況，避免遺漏病因，徹底治療。

由于該次實(shí)驗(yàn)的呼吸道感染的患兒例數(shù)偏少，并不能精確反應(yīng)小兒呼吸道感染的情況，故僅提供參考，有待進(jìn)一步探討。

4 結(jié)論

呼吸道病原體IgM九聯(lián)檢在小兒呼吸道感染檢測(cè)中檢出陽性率高，檢測(cè)的病原體種類多，發(fā)現(xiàn)病原體時(shí)間早，對(duì)臨床的及時(shí)診斷、治療及用藥有十分重要的意義。

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Nine respiratory pathogens detection in diagnosis of children's respiratory tract infection

LU Yuming LI Huan LIU Hui YAN Shasha CHEN Sijin
1.Department of laboratory medicine Zunyi Medical College Guizhou Zunyi 200032；2.North Sichuan Medical College Department of laboratory medicine Sichuan Nanchong 637007

[Abstrac]Objective Discussion on nine joint inspection of respiratory tract pathogens in children with respiratory tract infection and its clinical application value.Methods from March 2012 to Aoril 2014 in the attached Hospital of Zunyi Medical College Hospital of respiratory tract infections in children(a total of 104 cases)uses nine respiratory infections IgM antibody detection reagents(indirect immunofluorescence)simultaneous detection of IgM antibodies of pathogens.Results In patients with respiratory tract infection in children,nine species of pathogenic examination out of positive rate of 57.69%,mainly to Mycoplasma pneumoniae is the most common,56.7%of the total number of positive cases,followed by adenovirus cent,Legionella pneumophila 40%;33.3%in mixed infection accounted for the proportion infected.Conclusion Nine joint inspection of respiratory tract pathogens in children with respiratory tract infection in a high positive rate of detection,type of pathogen detection,pathogen found earlier,clinical diagnosis,treatment and medication in a timely manner is very important in.

Nine joint inspection；Respiratory tract infection in children；IgM antibodies；Respiratory tract pathogens

R725.6

A

1674-0742（2015）01（b）－0171-02

2014-10-5）

盧宇明（1990-），男，江西上饒人，本科，醫(yī)學(xué)學(xué)士學(xué)位，主要從事醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床相關(guān)疾病的研究。