馬少朋，李婷婷，姚維平，高桂生，史秋梅* ，張艷英，高光平(．河北省辛集市畜牧局，河北辛集 0560;．河北省灤南縣畜牧服務中心，河北灤南 06500;．河北省撫寧縣畜牧水產局，河北撫寧 06600;．河北科技師范學院動物科技學院，河北省預防獸醫(yī)學重點實驗室，河北昌黎 066600)

現代醫(yī)學研究發(fā)現紫錐菊多糖和黃芪多糖具有免疫調節(jié)作用，能夠提高機體的特異性和非特異性免疫功能，它能提高淋巴細胞的轉化率、提高機體對抗原的免疫應答能力［1－4］。根據2種多糖能增強小鼠和雞等動物免疫功能的研究報道［5－8］，針對仔豬消化吸收能力差、抗病力低、易腹瀉等特點，筆者制備了2種中藥組成的方劑——紫錐菊復方，用不同劑量的紫錐菊復方飼喂仔豬后，檢測仔豬外周血淋巴細胞的轉化率以及豬呼吸繁殖障礙綜合征疫苗的抗體水平，來探討紫錐菊復方對仔豬的免疫功能的影響，以期為其今后臨床應用提供理論依據。

1 材料與方法

1．1 中草藥與試驗試劑 紫錐菊、黃芪等均購自秦皇島市百草堂大藥房。上?？祆`牌膠體金試紙條，用于豬繁殖呼吸障礙綜合征抗體效價測定。

1．2 試驗動物 80頭杜×長×大三元雜交仔豬，由秦皇島市某種豬場提供。

1．3 復方中藥制劑的制備 清洗除去雜質，篩選出不合格的或混入的非中藥成分，除去灰塵，濕潤中藥原料。藥物浸泡3 h，水提3次(每次10倍量水，煎煮1 h)，經過濾過－濃縮－噴霧干燥－分裝的流程制成顆粒狀制劑(1 g生藥提取中藥制劑 0．24 g)。

1．4 試驗動物分組及處理 選取臨床檢查健康的15日齡左右杜長大三元雜交仔豬80頭，按照性別和體重隨機分為4組(對照組、1．5%復方中藥制劑組、1．0%復方中藥制劑組和0．5%復方中藥制劑組)，每組20頭。

1．5 淋巴細胞轉化試驗 淋巴細胞轉化試驗采用形態(tài)學檢查法，應用非特異性有絲分裂原植物血凝素(PHA)作為刺激物，具體操作參照何昭陽等［9］方法進行。

1．6 豬繁殖呼吸障礙綜合征抗體水平的測定 健康仔豬在20日齡、50日齡免疫豬呼吸繁殖障礙綜合征疫苗，分別在20、30、40、50、60、70、80 日齡每組隨機選取10 頭仔豬，于前腔靜脈采集全血3 ml，3 000 r/min離心15 min，分離血清，－20℃冰箱中保存，使用膠體金試紙條按照檢測試劑盒說明書進行抗體檢測。

1．7 數據處理 利用SPSS 11．3GLM程序對試驗數據進行統計分析。

2 結果與分析

2．1 對仔豬T淋巴細胞轉化率的影響 由表1可知，在20、30日齡，4組斷奶仔豬T淋巴細胞轉化率差異均不顯著(P＞0．05);在40、50日齡，與對照組相比，0．5%復方中藥制劑組仔豬T淋巴細胞轉化率分別提高20．48%和19．19%(P＜0．01)，1．0% 復方中藥制劑組分別提高 13．34% 和 20．19%(P ＜ 0．01)，1．5% 復方中藥制劑組分別提高 16．79% 和18．47%(P＜0．01);80日齡，與對照組相比1．5%復方中藥 制劑組仔豬T淋巴細胞轉化率提高13．36%(P＜0．01)。

表1 紫錐菊復方對仔豬T淋巴細胞轉化率的影響

2．2 豬繁殖呼吸障礙綜合征抗體效價 從表2可以看出，免疫合格豬所占比例在60日齡(二免)以后開始升高，達到合格水平(1∶16)，因此新生仔豬20日齡免疫1次后，應至少在45～50日齡加強免疫1次，二免后仔豬抗體水平均能達到合格以上，在免疫前后飼料中添加紫錐菊復方效果較好，以1%復方中藥制劑組能促進其產生較好免疫力，70～90日齡以后，中和抗體效價與對照組比能提高2．0～2．1 log2。

該試驗結果表明，豬繁殖呼吸障礙綜合征疫苗接種后，1．5%復方中藥制劑組添加紫錐菊復方混飲給藥，可以顯著提高疫苗免疫的中和抗體水平，與對照組差異顯著(P＜0．05)。試驗組抗體產生快，持續(xù)時間長，說明紫錐菊復方對豬繁殖呼吸障礙綜合征抗體產生具有明顯的促進作用，可有效地提高豬的體液免疫作用。

表2 紫錐菊復方對豬繁殖呼吸障礙綜合征疫苗抗體效價的影響

3 討論

T淋巴細胞在細胞免疫中起主要作用，當其受到PHA等刺激后，可轉化為體積較大的淋巴母細胞，可釋放多種細胞因子，參與細胞免疫反應。淋巴細胞轉化試驗結果表明，仔豬外周血淋巴細胞轉化率，在試驗開始時各組與對照組差異均不顯著;40日齡，1．0%復方中藥制劑和1．5%復方中藥制劑組顯著和極顯著高于對照組，0．5%復方中藥制劑組與對照組差異不顯著;在50日齡，1．0%復方中藥制劑組和1．5%復方中藥制劑組顯著高于對照組，0．5%復方中藥制劑組與對照組差異不顯著。這表明一定劑量的紫錐菊復方能提高仔豬淋巴細胞的轉化率，增強仔豬的細胞免疫功能。對豬繁殖呼吸障礙綜合征疫苗接種后抗體水平檢測結果表明，在試驗開始時各組仔豬抗體水平差異不顯著，50和70日齡各試驗組豬繁殖呼吸障礙綜合征抗體水平均極顯著高于對照組。在相同日齡條件下，各試驗組抗體水平均隨紫錐菊復方應用劑量的增加而呈上升趨勢。由此可見，應用一定劑量的紫錐菊復方能夠提高豬繁殖呼吸障礙綜合征疫苗的抗體水平，表明紫錐菊復方對仔豬的體液免疫功能具有一定的促進作用。江和基等［10］飼料中添加玉屏風散提高仔豬免疫球蛋白含量和免疫細胞中CD4(T輔助細胞)和CD8(T抑制細胞)的比例，增加血清的補體、IL-2、γ-干擾素等成分，在一定程度上提高豬體內非特異性免疫水平，增強豬體的抵抗力，有利于斷奶仔豬的生長發(fā)育。劉建成等［11］和馬玉芳等［12］也證實了在仔豬、生長肥育豬的飼料中添加一定量的中藥添加劑，具有改善豬的生長性能和提高機體免疫功能的作用。這表明在飼料中添加一定量的中草藥添加劑對豬的生產性能和免疫功能有改善作用。

筆者通過對仔豬外周血淋巴細胞轉化率、豬繁殖呼吸障礙綜合征抗體水平等免疫指標的檢測，初步探討了紫錐菊復方對仔豬非特異性免疫功能、體液免疫功能的影響，為進一步研究紫錐菊復方對豬免疫功能的影響奠定了基礎。

［1］付海寧，鐘英杰，郝衛(wèi)剛，等．紫錐菊提取物增強雞新城疫疫苗免疫效果的研究［J］．中國家禽，2014，36(24):13 －17．

［2］宋紅衛(wèi)，李秀菊，岳立．紫錐菊提取物對肉仔雞免疫功能的影響［J］．飼料博覽，2014(6):7－9．

［3］李宏全，段縣平．黃芪多糖對雞新城疫和傳染性腔上囊病疫苗免疫力的影響［J］．中國獸醫(yī)醫(yī)學雜志，2001，31(9):12 －14．

［4］張艷．黃芪多糖對燒傷小鼠細胞免疫功能的作用［J］．中國藥理學通報，1995，11(2):136 －138．

［5］易先國，雷咸波，何書海，等．紫芪顆粒對小鼠免疫功能的影響［J］．中國獸醫(yī)雜志，2012，48(1):43 －45．

［6］代雪立，石達友，莫桂芬，等．紫錐菊復方對高溫條件下蛋雞生產性能及血液生化指標的影響［J］．中國畜牧獸醫(yī)，2011，38(9):15 －18．

［7］李樹鵬，郝艷霜，歐陽五慶．黃芪多糖與紫錐菊提取物納米乳的制備及免疫佐劑效應研究［J］．西北農林科技大學學報:自然科學版，2011，39(10):10 －16．

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［9］何昭陽，胡桂學，王春鳳，等．動物免疫學實驗技術［M］．長春:吉林科學技術出版社，2002:156 －157．

［10］江和基，黃志堅，謝紅兵，等．精制玉屏風散對仔豬免疫功能和生長性能的影響［J］．福建農林大學學報:自然科學版，2006，35(6):640－643．

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［12］馬玉芳，劉建成，黃一帆，等．中藥飼料添加劑對仔豬生產性能和免疫功能的影響［J］．福建農林大學學報:自然科學版，2003，32(4):496－499．