楊春雷甘建駿劉 燕
(1 昆明市公安局高新分局 云南 昆明 650118;2 昆明醫(yī)科大學法醫(yī)學院 云南 昆明 650000;3 云南省警官學院 云南 昆明 650000)
GC/MS法在檢驗乙草胺案件中的應用
楊春雷1甘建駿2劉 燕3
(1 昆明市公安局高新分局 云南 昆明 650118;2 昆明醫(yī)科大學法醫(yī)學院 云南 昆明 650000;3 云南省警官學院 云南 昆明 650000)
應用GC/MS法對水中乙草胺進行了分析。其方法靈敏、易操作,是水中乙草胺檢測的一種有效方法。
GC/MS 乙草胺 固相萃取
乙草胺(Acetochlor) 屬于酰胺類選擇性除草劑,具有低毒、高效、安全等特性,是拉索(甲草胺)等的理想替代品,于1971年由美國Monsanto公司開發(fā)。別名∶禾耐斯(Harness)、消草胺(Sacemid)、MON097、Acemit等?;瘜W名稱:2-甲基-6-乙基-N(乙氧甲基)-2-氯代乙酰替苯胺,分子式∶C14H20ClNO2,分子量為269.76,分子結構式:
純品為淡黃色液體,原液外觀為棕色或紫色均相透明液體,不易揮發(fā),不易光解,熔點0℃,沸點162℃,相對密度1.11,25℃時水中溶解度為223 mg/L。在堿性時相對穩(wěn)定,酸性強時不穩(wěn)定,溶于乙醚、丙酮、氯仿、苯、甲苯、乙醇、乙酸乙酯等大多數(shù)有機溶劑。此類除草劑對人畜低毒,對眼睛和皮膚有刺激作用,對水生生物有極高毒性。近年來,此類除草劑使用廣泛,將乙草胺投入魚塘、水井、水缸、食物中進行犯罪的案件逐漸增多,也有由于意外事故、自殺等原因引起人畜中毒的案件發(fā)生。
采用常規(guī)的萃取方法,從水樣中檢測乙草胺有一定的困難,有時甚至難以檢出,采用固相萃取和GC/MS分析技術,不但分析速度快,而且結論準確。實驗表明,本文所建立的方法對乙草胺投毒案件的檢驗可取得滿意的效果。
1.1 儀器條件
前處理儀器:振蕩器、電熱恒溫水浴鍋。儀器:Finnigan TRACE GC/POLARISQ氣/質聯(lián)用儀,EI源;色譜柱:J&W DB-5 MS(30m×0.25mm×0.25μm)毛細柱;進樣口溫度:280℃;離子源溫度:200℃;傳輸線溫度:270℃;柱溫:120℃ (1min) 20℃/min280℃(10min)。
1.2 試劑
去離子水,氯仿、乙酸乙酯、甲醇均為分析純,散裝GDX-301、GDX-403(60~80目)固相萃取劑(河北產)、氫氧化鈉。
2.1 固體檢材的提取凈化
取檢材用無水硫酸鈉脫水后加氯仿提取,活性炭和中性氧化鋁凈化,50℃水浴揮干,甲醇溶解后抽取1ul供GC/MS分析。
2.2 固相萃取法
主要用于液體類檢材的提取凈化。將用甲醇活化好的GDX-403固相萃取劑放入100ml待檢水樣內,振蕩20min,或振蕩后靜置過夜,濾集固相萃取劑于長約20cm,內徑0.5cm,塞有少量脫脂棉的小層析柱中,去離子水10ml淋洗,干燥,再用乙酸乙酯洗脫劑以1滴/秒的速度洗脫,收集洗脫液于尾管雞心瓶中,50℃水浴揮干,甲醇溶解后抽取1ul供GC/MS分析。用GDX-301固相萃取劑與GDX-403固相萃取劑在同等條件下同步進行實驗。
2.3 液-液萃取法
將100ml待檢水樣調至PH11,加50ml乙酸乙酯,振蕩20min。離心,分取有機相置于8個帶刻度尾管雞心瓶中,50℃水浴,濃縮至1個雞心瓶中揮干。
圖為一案例魚塘水中乙草胺的總離子流圖及質譜圖,通過譜庫檢索,在8.71min處中檢出乙草胺;由圖可看出,在本文所用色譜條件下,乙草胺的峰形較好。
圖 魚塘水中乙草胺的總離子流圖及質譜圖(Rt8.71色譜峰為乙草胺)
固相萃取法在生物檢材中微量毒物分析方面應用較為廣泛,尤其是在大體積液體樣品中對分析物的萃取凈化方面有優(yōu)勢。本文經過對固相萃取法和液液萃取法所提取的水樣的色譜圖、乙草胺的峰高和峰面積的比較,固相萃取法具有提取雜質較少、提取率高的優(yōu)點,省去了因濃縮溶劑而帶來分析物的損失,另外固相萃取法在提取過程中具有操作簡單、無兩相間乳化,所用時間更短的優(yōu)勢,既提高了效率,也大大減少了有機試劑的用量,減少了檢驗人員與有毒試劑的接觸。另外,經過對實驗結果的比較,在相同條件下,固相萃取劑GDX-403(60~80目)的提取效果較好。
由于乙草胺對水生生物有極高毒性,對致魚蝦等動物死亡的案件中檢材提取應盡量充分、多點采集;另外,送檢的魚塘水通常含有一些雜質,為了不影響萃取效果,在操作時應先過濾魚塘水再進行固相萃取。
筆者所在實驗室用此方法對2003~2014年昆明地區(qū)發(fā)生的涉及此類除草劑的10余起案件中的檢材進行檢驗,其中檢出乙草胺的案件有7起,甲草胺1起,丁草胺2起。此方法在實際檢驗工作中得到了較好的驗證。
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(責任編輯:于 萍)
D913.93
A
2095-7939(2015)02-0079-02
2014-12-02
楊春雷(1976-),男,云南昆明人,云南省昆明市公安局高新分局主檢法醫(yī)師,碩士,主要從事刑事科學技術理化檢驗研究。