趙志鈞 鮑舟君 姚燕珍 李翊衛(wèi)? 劉華生

自身抗體在自身免疫性肝病中的診斷價(jià)值

趙志鈞 鮑舟君 姚燕珍 李翊衛(wèi)? 劉華生

目的 探討自身抗體檢測(cè)在自身免疫性肝?。ˋILD）中的診斷價(jià)值。方法 對(duì)22例自身免疫性肝炎（AIH）患者、21例原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）患者和4例重疊綜合征（OS）患者的血清進(jìn)行自身抗體的檢測(cè)。采用間接免疫熒光法和免疫印跡法測(cè)定抗核抗體（ANA）、抗線粒體抗體（AMA）、抗平滑肌抗體（ASMA）、抗F-肌動(dòng)蛋白抗體和LKM-1、LC-1、SLA/LP抗體。結(jié)果 AIH患者ANA陽性率為81.8%；PBC患者ANA陽性率為81.0%。與乙型肝炎組（HBV）和正常對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。AIH組和PBC組ANA以高滴度（＞1：320）為主。PBC組AMA和AMA-M2陽性率分別為76.2%和81.0%，與AIH組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 自身抗體檢測(cè)對(duì)自身免疫性肝病診斷和鑒別診斷具有重要的意義。

自身抗體 自身免疫性肝病 診斷

自身免疫性肝病（AILD）是一組肝臟免疫耐受機(jī)制失衡引起的肝細(xì)胞或膽管上皮慢性損傷性炎癥疾病，根據(jù)其臨床表現(xiàn)、生化、免疫學(xué)、影像學(xué)和組織病理學(xué)特點(diǎn)，可分為以肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行性損傷為主的自身免疫性肝炎（AIH），以膽道系統(tǒng)受累為主的原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）和原發(fā)性硬化型膽管炎（PSC），以及重疊綜合征（OS）。AILD起病隱匿，初期癥狀與病毒性肝炎相似，而其治療原則和病毒性肝炎則完全不同。因此早期診斷對(duì)AILD的病情監(jiān)測(cè)和預(yù)后具有重要價(jià)值。本文回顧性分析2012年5月至2014年7月本院收治的47例AILD患者的自身抗體檢測(cè)結(jié)果，以探討自身抗體檢測(cè)對(duì)AILD的診斷價(jià)值。

1 臨床資料

1.1 一般資料 47例病例診斷均符合美國肝臟學(xué)會(huì)的診斷依據(jù)及國際自身免疫性肝炎組（IAIHG）修訂的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)［1］。其中AIH 22例，男1例，女21例；年齡18～69歲，平均（58.0±10.8）歲。PBC 21例，男6例，女15例；年齡40～78歲，平均（56.4±8.0）歲。OS 4例，均為PBC-AIH重疊綜合征，女，年齡50～63歲，平均（55.0±6.3）歲。以HBV感染者和健康體檢者為對(duì)照組。其中HBV感染組38例，男5例，女33例；年齡37～76歲，平均（57.1±10.6）歲。健康體檢者30例，其中男6例，女24例；年齡40～72歲，平均（56.0±10.2）歲。所有體檢人員肝、腎、心功能正常，并排除自身免疫性疾病。

1.2 自身抗體檢測(cè) 自身抗體檢測(cè)包括抗核抗體（ANA）、抗線粒體抗體（AMA）、抗平滑肌抗體（ASMA）、抗F-肌動(dòng)蛋白抗體。方法為間接免疫熒光法（ⅡF）。試劑由歐蒙（杭州）醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司提供。選用HEp-2細(xì)胞、猴肝和大鼠腎組織冷凍切片作為抗原，將待測(cè)血清1：100倍稀釋后同抗原基質(zhì)孵育30min，經(jīng)異硫氰酸熒光素標(biāo)記的羊抗人IgG結(jié)合30min后，洗片封片，熒光顯微鏡下觀察，出現(xiàn)黃綠色熒光為陽性。1.3 抗肝抗原譜檢測(cè) 抗肝抗原譜檢測(cè)包括抗線粒體抗體-M2亞型（AMA-M2），抗肝腎微粒體1型抗體（LKM-1）、抗肝細(xì)胞溶質(zhì)抗原1型抗體（LC-1），抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗體（SLA/LP）。采用免疫印跡法檢測(cè)。試劑由德國歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司提供。將待測(cè)血清1：100倍稀釋后同抗原基質(zhì)孵育30min，再用酶標(biāo)抗人IgG孵育30min，用底物顯色10min。觀察特定區(qū)域是否有陽性條帶。

1.4 病毒性肝炎檢測(cè) 病毒性肝炎標(biāo)志物的檢測(cè)采用化學(xué)發(fā)光法，儀器為雅培公司的Abbott-i2000型，試劑和標(biāo)準(zhǔn)品均由雅培公司提供。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料以n或%表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ANA及滴度在AILD患者中檢測(cè)結(jié)果 見表1。

表1 各組ANA抗體滴度檢測(cè)結(jié)果［n（%）］

2.2 AILD組間ANA核型結(jié)果 見表2。

表2 AILD各組間ANA核型比較（n）

2.3 各組間自身抗體和抗肝抗原譜檢出率 見表3。

表3 各組間自身抗體和抗肝抗原譜檢出率的比較［n（%）］

3 討論

目前AIH、PBC診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”是肝組織的病理學(xué)檢查，但AILD的肝組織活檢特異性不強(qiáng)，受取材標(biāo)本局限，對(duì)檢查結(jié)果影響較大［2］。隨著對(duì)自身抗體檢測(cè)手段的提高和抗體譜的不斷完善，自身抗體的檢測(cè)在AILD患者診斷中的價(jià)值越來越受重視。

本資料結(jié)果表明，AILD患者以中年女性居多。AILD患者中又以AIH和PBC兩類患者數(shù)為多，本資料因缺乏PSC病例，故未做這方面的探討。AIH病因不明、起病隱匿、缺乏疾病特異性臨床表現(xiàn)和相應(yīng)的病原體［3］，而且病情可以輕至無任何臨床癥狀重至急性發(fā)作［4］，隨著臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的積累和對(duì)AIH認(rèn)識(shí)的提高，人們逐漸認(rèn)識(shí)到AIH相關(guān)自身抗體在AIH的診斷與分型中的重要作用，并在AIH的診療指南中將AIH相關(guān)自身抗體的地位提到與ALP、球蛋白等其他診斷重要指標(biāo)相同的地位［5］。本資料中，有81.8%的患者ANA為陽性，同時(shí)AIH患者ANA抗體滴度高，18例陽性病例中有9例滴度＞1：320。對(duì)其中ANA陽性的AIH患者做核型分析顯示，有5例為著絲點(diǎn)熒光模式。另外，ANA陽性率和抗體滴度與AIH相似，其核型以著絲點(diǎn)和胞漿顆粒型多見。但進(jìn)一步分析表明，兩組在AMA和AMA-M2的陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，本資料中AIH組和PBC組AMA陽性率分別為13.6%和76.2%，AMA-M2的陽性率為4.5%和81.0%。且AMA在疾病早期即可出現(xiàn)，從而說明AMA對(duì)PBC早期診斷具有重要的意義［6］。

本資料中涉及到4例OS病例，均為AIH-PBC OS，其并非是單純PBC與AIH在生物化學(xué)和病理等方面疊加，正確認(rèn)識(shí)、診斷PBC-AIH OS非常必要。本資料亦顯示4例OS病例ANA均陽性，有3例滴度＞1∶100，核型分析有3例為≥2種的熒光模式，自身抗體檢測(cè)中4例患者均AMA-M2陽性。

1 Czaja AJ, Freese DK． Diagnosis and treatment of autoimmune hepatitis ．Hepatology, 2002, 36(2):479～497．

2 劉燕京． 自身抗體在自身免疫性肝病中的表達(dá)及臨床價(jià)值． 中國實(shí)用醫(yī)藥, 2013, 8(28):102～103．

3 Malnick S, Duek G, Melzer E, et al． The treatment of autoimmune hepatitis． Curr Clin Pharmacol, 2012, 7(4):318～327．

4 Peng M, Li Y, Zhang M, et al． Clinical features in different age groups of patients with autoimmune hepatitis． Exp Ther Med, 2014, 7(1):145～148．

5 Rigopoulou EI, Zachou K, Gatselis N, et al． Autoimmune hepatitis in patients with chronic HBV and HCV infections: patterns of clinical characteristics, disease progression and outcome． Ann Hepatol, 2013～2014, 13(1):127～135．

6 蔡曉燕, 董光富, 崔陽． 原發(fā)性膽汁性肝硬化63例． 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志, 2011, 27(12):2208～2210．

316000 浙江省舟山醫(yī)院

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