張百紅 岳紅云

蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院腫瘤科，甘肅蘭州730050

腫瘤檢查點(diǎn)相關(guān)研究進(jìn)展△

張百紅#岳紅云

蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院腫瘤科，甘肅蘭州730050

機(jī)體中有各種檢查點(diǎn)調(diào)控正常細(xì)胞向腫瘤的轉(zhuǎn)化，這些檢查點(diǎn)包括細(xì)胞周期檢查點(diǎn)、代謝檢查點(diǎn)、分化檢查點(diǎn)、衰老檢查點(diǎn)和免疫檢查點(diǎn)等。各種檢查點(diǎn)從細(xì)胞周期、代謝、分化、衰老和免疫等環(huán)節(jié)調(diào)控細(xì)胞的增殖、凋亡、分化和衰老等過(guò)程，以阻止腫瘤的發(fā)生。這些檢查點(diǎn)將成為腫瘤治療的新靶標(biāo)。

腫瘤；檢查點(diǎn)；治療靶標(biāo)

在正常細(xì)胞或干細(xì)胞向腫瘤轉(zhuǎn)化的過(guò)程中，機(jī)體中有一些檢查點(diǎn)來(lái)阻止轉(zhuǎn)化的發(fā)生，猶如“剎車裝置”，或給予細(xì)胞修復(fù)時(shí)間，或改變細(xì)胞命運(yùn)，阻止細(xì)胞在分裂、代謝、分化、衰老和免疫等方面向惡性轉(zhuǎn)化。這些檢查點(diǎn)包括細(xì)胞周期檢查點(diǎn)、代謝檢查點(diǎn)、分化檢查點(diǎn)、衰老檢查點(diǎn)和免疫檢查點(diǎn)等，從不同層面阻斷腫瘤的發(fā)生。

1 細(xì)胞周期檢查點(diǎn)

細(xì)胞周期檢查點(diǎn)保護(hù)細(xì)胞免受分裂過(guò)程中錯(cuò)誤事件的影響。DNA損傷激活了細(xì)胞周期檢查點(diǎn)，阻滯細(xì)胞進(jìn)入分裂周期以贏得時(shí)間進(jìn)行細(xì)胞修復(fù)；細(xì)胞的成功修復(fù)可使檢查點(diǎn)失活，并使細(xì)胞重新進(jìn)入細(xì)胞周期；當(dāng)DNA損傷不能修復(fù)時(shí)，細(xì)胞則需要在永久阻滯和檢查點(diǎn)適應(yīng)之間作出選擇，后者使細(xì)胞勉強(qiáng)復(fù)制的同時(shí)增加了基因組不穩(wěn)定的風(fēng)險(xiǎn)[1]。細(xì)胞周期檢查點(diǎn)主要包括DNA損傷檢查點(diǎn)、DNA修復(fù)檢查點(diǎn)、紡錘體檢查點(diǎn)和倍性檢查點(diǎn)，共同維持細(xì)胞周期的正常進(jìn)行。

1.1 DNA損傷檢查點(diǎn)

DNA損傷激活了細(xì)胞周期進(jìn)程中的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)，招募DNA損傷修復(fù)因子，也有助于有絲分裂期雙鏈斷裂（double-strand breaks，DSB）的修復(fù)[2]。如果修復(fù)不成功，則啟動(dòng)細(xì)胞凋亡和衰老程序，從而阻止細(xì)胞復(fù)制，避免DNA改變引起的細(xì)胞轉(zhuǎn)化[3]。DNA損傷檢查點(diǎn)與腫瘤的發(fā)生相關(guān)。Cdc激酶亞單位（Cdc kinase subunit，Cks）蛋白常常在一些腫瘤中過(guò)表達(dá)，并與腫瘤進(jìn)展相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，Cks可以使細(xì)胞越過(guò)DNA損傷檢查點(diǎn)以增加某些化療藥物的療效[4]。突變型KRAS在人類多種腫瘤中表達(dá)并與腫瘤治療抵抗相關(guān)，然而野生型KRAS也可能通過(guò)突變型KRAS促進(jìn)腫瘤發(fā)生，其機(jī)制是野生型KRAS抑制ATR/Chk1信號(hào)繼而減弱G2期DNA損傷檢查點(diǎn)的激活[5]。

轉(zhuǎn)錄因子Brd4作為內(nèi)源性抑制劑調(diào)控細(xì)胞對(duì)DNA損傷的信號(hào)反應(yīng)[6]。DNA損傷誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)源性檢查點(diǎn)的激活，包括p53、Rb、上游調(diào)節(jié)因子（p16、p19、核酸外切酶1和毛細(xì)血管擴(kuò)張突變基因）及下游調(diào)節(jié)因子（p21和sestrins）等[7]。內(nèi)源性檢查點(diǎn)清除損傷細(xì)胞，可以阻止腫瘤發(fā)生。另外，還有一些因子能調(diào)控DNA損傷檢查點(diǎn)，如CDK1等[8]。

1.2 DNA復(fù)制檢查點(diǎn)

當(dāng)染色體不能正確地黏附到紡錘體時(shí)，著絲粒激活紡錘體組裝檢查點(diǎn)（spindle assembly checkpoint，SAC）繼而阻止細(xì)胞周期進(jìn)程。一旦所有的著絲粒都穩(wěn)定地黏附到紡錘體上，SAC則不被激活，染色體分離并完成細(xì)胞分裂。DNA復(fù)制檢查點(diǎn)調(diào)控DNA復(fù)制的時(shí)機(jī)、進(jìn)程和細(xì)胞命運(yùn)。SAC延遲細(xì)胞周期時(shí)相直到所有染色體都定位于紡錘體上。Rodriguez-Bravo等發(fā)現(xiàn)，核孔和著絲粒都能發(fā)出“等待分裂”的信號(hào)來(lái)限制有絲分裂的速度，以確保有絲分裂的成功完成，從而維持基因組的穩(wěn)定性[9]。核膜ATR檢查點(diǎn)活性受機(jī)械壓力的調(diào)控，其可調(diào)控核膜可塑性并確保細(xì)胞繼續(xù)復(fù)制[10]。另外，蛋白激酶C（protein kinases C，PKC）是調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的關(guān)鍵因子，控制細(xì)胞周期的啟動(dòng)、發(fā)展和退出。Poli等的研究發(fā)現(xiàn)，PKC可以調(diào)節(jié)G1/S和G2/M檢查點(diǎn)[11]；Topham等發(fā)現(xiàn)BCL2家族成員MCL1的降解可能控制著細(xì)胞凋亡或分裂的命運(yùn)[12]。

1.3 紡錘體檢查點(diǎn)

紡錘體檢查點(diǎn)是有絲分裂期保證染色體正確分離的重要監(jiān)控機(jī)制，維持著基因組的穩(wěn)定性。SAC是真核細(xì)胞中一個(gè)進(jìn)化保守的自我監(jiān)控系統(tǒng)，確保染色體正確黏附至紡錘體上，然后啟動(dòng)分裂后期的染色體分離[13]。腫瘤進(jìn)化選擇了有絲分裂檢查點(diǎn)后，腫瘤細(xì)胞即使在染色體分離錯(cuò)誤時(shí)仍能逃脫有絲分裂壓力所致的細(xì)胞死亡[14]。如果染色質(zhì)不能準(zhǔn)確地黏附到紡錘體上，SAC就會(huì)持續(xù)激活，誘導(dǎo)有絲分裂阻滯，使染色質(zhì)有時(shí)間獲得黏附并準(zhǔn)確地完成分離[15]。另外，有絲分裂期紡錘體方向與細(xì)胞非對(duì)稱分裂的精確性密切相關(guān)。當(dāng)紡錘體不能正確排列極軸時(shí)，紡錘體位置檢查點(diǎn)（spindle position checkpoint，SPOC）可阻止有絲分裂的退出。SAC激活并不是“全或無(wú)”式的，其作用強(qiáng)度依賴于有絲分裂阻滯缺陷蛋白2和有絲分裂檢查點(diǎn)復(fù)合物的數(shù)量，因此，SAC更像一個(gè)變阻器而非開(kāi)關(guān)[16]。

許多SAC均可調(diào)控細(xì)胞的有絲分裂。紡錘體檢查點(diǎn)在維持染色體分離和基因組穩(wěn)定方面發(fā)揮重要作用，MAD2作為紡錘體檢查點(diǎn)的關(guān)鍵酶，在多種腫瘤細(xì)胞中過(guò)表達(dá)[17]。MAD1可以減弱有絲分裂檢查點(diǎn)信號(hào)而引起染色體不穩(wěn)定。SAC信號(hào)持續(xù)時(shí)間與未黏附染色體的數(shù)目相關(guān)，并控制細(xì)胞進(jìn)入分裂后期的開(kāi)始時(shí)間。研究發(fā)現(xiàn)，因分裂后期促動(dòng)復(fù)合物/細(xì)胞周期體（anaphasepromoting complex/cyclosome，APC/C）抑制劑的合成相對(duì)緩慢，在染色體黏附至紡錘體后的幾分鐘內(nèi)，細(xì)胞并不立即進(jìn)入分裂后期[18]。Han等發(fā)現(xiàn)，有絲分裂蛋白Bub3可以促進(jìn)BubR1和Cdc20的相互作用，維持有絲分裂檢查點(diǎn)的信號(hào)[19]。Aurora B激酶可以調(diào)節(jié)有絲分裂期姊妹染色單體的方向。Aurora B激酶缺乏使細(xì)胞失去糾正著絲粒-微管黏附錯(cuò)誤的能力并引起異倍體。Aurora B激酶增加也會(huì)導(dǎo)致染色體錯(cuò)誤分離，其機(jī)制是Aurora B激酶引起著絲粒-微管黏附持續(xù)地破壞和紡錘體不穩(wěn)定[20]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Aurora B激酶通過(guò)匯集染色質(zhì)或微管維持染色體的方向[21]。另外，腫瘤抑制蛋白pVHL發(fā)揮有絲分裂檢查點(diǎn)的功能并調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂[22]。紡錘體檢查點(diǎn)監(jiān)控著染色體分離時(shí)的錯(cuò)誤，然而僅僅依賴紡錘體檢查點(diǎn)以確保細(xì)胞分裂后期姊妹染色質(zhì)的成功分離顯然是不夠的，細(xì)胞也通過(guò)其他方式保證正常的細(xì)胞分裂，包括Cdk1失活去除有絲分裂檢查點(diǎn)的監(jiān)控和穩(wěn)定著絲粒黏附、減緩分裂后期檢查點(diǎn)激活等[23]。

1.4 倍性檢查點(diǎn)

SAC缺陷可能引起異倍體的發(fā)生，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生，倍性檢查點(diǎn)可阻止異倍體的發(fā)生。Hippo信號(hào)通路能感知細(xì)胞中異常染色體的數(shù)目，使細(xì)胞周期阻滯，以此阻止腫瘤的發(fā)生。Hippo通路激酶LATS2是非中心體誘導(dǎo)性激活過(guò)程中一個(gè)關(guān)鍵性的染色體倍性檢查點(diǎn)[24]。乳腺癌細(xì)胞中的異倍體與M ps1檢查點(diǎn)基因的高表達(dá)相關(guān)，而M ps1高表達(dá)有助于乳腺癌細(xì)胞對(duì)異倍體的耐受[25]。

2 代謝檢查點(diǎn)

2.1 調(diào)控抗腫瘤免疫

代謝檢查點(diǎn)可以調(diào)控代謝狀態(tài)，從而影響抗腫瘤免疫?？鼓[瘤免疫過(guò)程需要淋巴細(xì)胞快速大量地增殖，這需要代謝重組提供能量以形成新的細(xì)胞群。激活的T細(xì)胞除轉(zhuǎn)化為有氧糖酵解和谷氨酰胺代謝途徑來(lái)適應(yīng)這種需要外，還通過(guò)其他一些特殊代謝和途徑影響細(xì)胞周期和免疫功能[26]。T細(xì)胞中大量氨基酸的攝入受抗原和T細(xì)胞抗原受體調(diào)控，這主要通過(guò)上調(diào)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Slc7a5來(lái)實(shí)現(xiàn)。因此，Slc7a5作為一個(gè)關(guān)鍵的代謝檢查點(diǎn)可幫助T細(xì)胞完成代謝重組[27]。細(xì)胞代謝可以激活自然免疫。研究發(fā)現(xiàn)，Tsc1-Rheb-m TORC1信號(hào)通路、Myc依賴的生物能量激活及生物合成活動(dòng)的相互作用構(gòu)成了關(guān)鍵的代謝檢查點(diǎn)，這個(gè)代謝檢查點(diǎn)調(diào)控樹(shù)突狀細(xì)胞的生成和分化[28]。

細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂時(shí)，營(yíng)養(yǎng)和能量的獲得對(duì)免疫細(xì)胞的影響至關(guān)重要。已發(fā)現(xiàn)的幾個(gè)關(guān)鍵代謝檢查點(diǎn)均能調(diào)控免疫細(xì)胞的能量代謝和增殖。研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)nip1蛋白是一個(gè)新的代謝檢查點(diǎn)，調(diào)控前B細(xì)胞可獲得足夠的代謝能力以完成細(xì)胞分裂[29]。Tsc1可以調(diào)控免疫檢查點(diǎn)和細(xì)胞代謝，從而影響記憶T細(xì)胞的生成和功能[30]。代謝檢查點(diǎn)激酶m TOR可以刺激自然殺傷細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)攝入和生長(zhǎng)，并正反饋至白介素-15受體，從而維持自然殺傷細(xì)胞的增殖[31]。

2.2 調(diào)節(jié)細(xì)胞周期

代謝檢查點(diǎn)決定分裂細(xì)胞是否有足夠的營(yíng)養(yǎng)完成整個(gè)細(xì)胞周期；如果營(yíng)養(yǎng)不足則啟動(dòng)分裂周期退出程序，誘導(dǎo)細(xì)胞自噬，最終激活細(xì)胞死亡通路。在代謝壓力下，自噬基因Atg7和抑癌基因p53共同調(diào)節(jié)細(xì)胞周期抑制因子p21的轉(zhuǎn)錄，Atg7缺乏則增加DNA損傷誘導(dǎo)p53依賴的細(xì)胞凋亡；因此，Atg7通過(guò)p53調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和細(xì)胞存活[32]。代謝檢查點(diǎn)激酶mTOR通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期G1期檢查點(diǎn)來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期。造血干細(xì)胞（hematopoietic stem cells，HSC）在缺氧的微環(huán)境中保持在G0期，呈現(xiàn)一種獨(dú)特的代謝表型。HSC通過(guò)丙酮酸脫氫酶激酶（pyruvate dehydrogenase kinase，PDK）依賴的無(wú)氧糖酵解產(chǎn)生5′-三磷酸腺苷，升高的PDK抑制糖酵解代謝向線粒體有氧代謝的轉(zhuǎn)入；在糖酵解功能缺陷的HSC中，PDK過(guò)表達(dá)有恢復(fù)糖酵解、細(xì)胞周期靜止和干細(xì)胞的能力；因此，PDK作為代謝檢查點(diǎn)可控制糖代謝狀態(tài)，從而調(diào)節(jié)HSC的靜止和功能[33]。

3 分化檢查點(diǎn)

分化檢查點(diǎn)調(diào)控細(xì)胞在不同壓力下的分化，既保證干細(xì)胞或胚胎細(xì)胞分化又阻止異常分化。研究發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)錄因子BATF作為分化檢查點(diǎn)可以限制DNA損傷時(shí)HSC的自我更新，誘導(dǎo)HSC淋巴分化[34]，另一方面卻阻止CD8+T細(xì)胞分化[35]。糖原合成酶激酶-3β是一個(gè)新的分化檢查點(diǎn)，控制炎性微環(huán)境下?lián)p傷的間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化進(jìn)程[36]，轉(zhuǎn)錄因子T-bet和Eomes也是控制自然殺傷細(xì)胞成熟分化的關(guān)鍵檢查點(diǎn)[37]。

4 衰老檢查點(diǎn)

端粒因通過(guò)調(diào)節(jié)衰老檢查點(diǎn)限制細(xì)胞增殖而被看作是重要的腫瘤抑制因素[38]。染色體的末端有一個(gè)被稱之為“端粒”的結(jié)構(gòu)。染色體每復(fù)制一次，細(xì)胞分裂一次，端粒即縮短一點(diǎn)，縮短到一定程度，細(xì)胞即進(jìn)入衰老程序。端粒最主要的功能是維持染色體長(zhǎng)度。端粒維持染色體長(zhǎng)度的觀點(diǎn)來(lái)自兩個(gè)危險(xiǎn)因素的存在：即，DNA損傷反應(yīng)所致的染色體末端雙鏈DNA斷裂和DNA丟失。端粒通過(guò)連接序列特異性末端保護(hù)因子和補(bǔ)充端粒酶來(lái)阻止這兩個(gè)危險(xiǎn)的發(fā)生。端粒給自身戴上一頂被稱為shelterin的帽子（由六種蛋白構(gòu)成），從而形成自我保護(hù)[39]。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)端粒功能失調(diào)時(shí)，細(xì)胞周期檢查點(diǎn)緩和，端粒酶促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。隨著端粒酶的減少，腫瘤的生長(zhǎng)因端粒誘導(dǎo)的檢查點(diǎn)恢復(fù)而減慢；然而，腫瘤也可因獲得端粒延長(zhǎng)替代機(jī)制而繼續(xù)生長(zhǎng)。進(jìn)一步研究顯示，端粒延長(zhǎng)替代使腫瘤的PGC-1β過(guò)表達(dá)，可調(diào)節(jié)線粒體功能而促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)；端粒酶不僅維持端粒長(zhǎng)度，還可驅(qū)動(dòng)細(xì)胞周期[40]。另外，端粒損傷誘導(dǎo)的基因組可強(qiáng)化腫瘤的發(fā)生[41]。

人類體細(xì)胞經(jīng)歷一個(gè)有限的復(fù)制過(guò)程，這種復(fù)制潛能的耗盡被稱為衰老。當(dāng)端粒不能發(fā)揮正常的保護(hù)功能時(shí)，細(xì)胞衰老便被啟動(dòng)。研究發(fā)現(xiàn)，衰老細(xì)胞包含DNA損傷檢查點(diǎn)激酶CHK1和CHK2的激活形式，而其端粒則聯(lián)系著DNA損傷反應(yīng)蛋白的表達(dá)；如果衰老細(xì)胞的DNA損傷檢查點(diǎn)激酶失活則可能重新啟動(dòng)細(xì)胞周期，提示端粒通過(guò)誘導(dǎo)DNA損傷檢查點(diǎn)反應(yīng)來(lái)啟動(dòng)細(xì)胞衰老，從而抑制腫瘤的發(fā)生[42]。因此，端粒無(wú)疑是最重要的衰老檢查點(diǎn)。

5 免疫檢查點(diǎn)

免疫檢查點(diǎn)是指免疫系統(tǒng)中存在的一些抑制性信號(hào)通路，通過(guò)調(diào)節(jié)外周組織中免疫反應(yīng)的持續(xù)性和強(qiáng)度來(lái)避免組織損傷，并參與維持對(duì)自身抗原的耐受[43]。免疫檢查點(diǎn)幫助腫瘤細(xì)胞免疫逃避，是腫瘤發(fā)生的促動(dòng)因素。在有效的抗腫瘤免疫過(guò)程中，T細(xì)胞作為核心執(zhí)行者，首先被T細(xì)胞受體介導(dǎo)的抗原識(shí)別信號(hào)所激活，同時(shí)眾多的共刺激信號(hào)和共抑制信號(hào)精細(xì)調(diào)節(jié)T細(xì)胞反應(yīng)的強(qiáng)度和質(zhì)量，這些抑制信號(hào)即為免疫檢查點(diǎn)。腫瘤細(xì)胞可以通過(guò)免疫檢查點(diǎn)，抑制T細(xì)胞的激活，從而逃避免疫殺傷。除了細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞抗原4和程序化死亡1兩個(gè)免疫檢查點(diǎn)外，Ceeraz等又鑒定出了兩個(gè)共刺激因子B7家族檢查點(diǎn)：T細(xì)胞激活V區(qū)Ig抑制因子（V-domain Ig suppressor of T cell activation，VISTA）和B7-H6[44]。已發(fā)現(xiàn)的免疫檢查點(diǎn)還包括淋巴細(xì)胞激活基因3、T細(xì)胞免疫球蛋白和mucin蛋白3，這些分子常常在腫瘤特異性T細(xì)胞和病原特異性T細(xì)胞中共同表達(dá)[45]。VISTA是一個(gè)抑制T細(xì)胞調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的檢查點(diǎn)，可阻斷T細(xì)胞的激活。Lines等發(fā)現(xiàn)，VISTA在腫瘤微環(huán)境中高表達(dá)，可以抑制T細(xì)胞激活，誘導(dǎo)Foxp3表達(dá)[46]。另外，免疫檢查點(diǎn)VISTA的阻斷可以促進(jìn)炎性表型，提高機(jī)體免疫反應(yīng)的持續(xù)性和強(qiáng)度[47]。

免疫檢查點(diǎn)抑制劑除通過(guò)激活免疫反應(yīng)發(fā)揮抗腫瘤免疫效應(yīng)外，也可能通過(guò)異位效應(yīng)發(fā)揮抗腫瘤作用[48]。腫瘤疫苗雖然顯示了有希望的抗腫瘤效應(yīng)，但Ⅲ期臨床試驗(yàn)并未證明其能延長(zhǎng)患者的生存時(shí)間；免疫檢查點(diǎn)抑制劑可能為腫瘤患者帶來(lái)生存獲益[49]。

6 結(jié)語(yǔ)

雖然腫瘤的發(fā)生是一個(gè)受各種動(dòng)力驅(qū)動(dòng)的發(fā)展過(guò)程，但是仍有眾多的檢查點(diǎn)阻止腫瘤的發(fā)生。針對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的不同階段，機(jī)體從細(xì)胞周期、代謝、分化、衰老和免疫等環(huán)節(jié)調(diào)控細(xì)胞的增殖、凋亡、分化和衰老，阻止腫瘤的發(fā)生。研究腫瘤的檢查點(diǎn)無(wú)疑將開(kāi)啟腫瘤治療策略的新思路。

［1］K lermund J,Bender K,Luke B.High nutrient levels and TORC1 activity reduce cell viability follow ing prolonged telomere dysfunction and cell cycle arrest[J]. Cell Rep,2014,9(1):324-335.

［2］Vasileva A,Hopkins KM,Wang X,et al.The DNA damage checkpoint protein RAD9A is essential formalemeiosis in themouse[J].JCell Sci,2013,126(Pt 17):3927-3938.

［3］Insinga A,Cicalese A,Faretta M,et al.DNA damage in stem cells activates p21,inhibits p53,and induces symmetric self-renew ing divisions[J].Proc Natl Acad Sci USA,2013,110(10):3931-3936.

［4］Del Rincón SV,Widschwendter M,Sun D,et al.Cks overexpression enhances chemotherapeutic efficacy by overriding DNA damage checkpoints[J/OL].Oncogene, 2014,137:1-7[2014-05-26].http://www.nature.com/onc/ journal/vaop/ncurrent/full/onc2014137a.htm l.

［5］Grabocka E,Pylayeva-Gupta Y,Jones M J,et al.Wildtype H-and N-Ras promotemutant K-Ras-driven tumorigenesis by modulating the DNA damage response[J]. Cancer Cell,2014,25(2):243-256.

［6］Floyd SR,Pacold ME,Huang Q,et al.The bromodomain protein Brd4 insulates chromatin from DNA damage signalling[J].Nature,2013,498(7453):246-250.

［7］Sperka T,Wang J,Rudolph KL.DNA damage checkpoints in stem cells,ageing and cancer[J].Nat Rev Mol Cell Biol,2012,13(9):579-590.

［8］Yu B,Dalton WB,Yang VW.CDK1 regulatesmediator of DNA damage checkpoint 1 during m itotic DNA damage[J].Cancer Res,2012,72(21):5448-5453.

［9］Rodriguez-Bravo V,Maciejowski J,Corona J,et al.Nuclear pores protect genome integrity by assembling a prem itotic and Mad1-dependent anaphase inhibitor[J]. Cell,2014,156(5):1017-1031.

［10］Kumar A,Mazzanti M,M istrik M,et al.ATR mediates a checkpoint at the nuclear envelope in response to mechanical stress[J].Cell,2014,158(3):633-646.

［11］Poli A,Mongiorgi S,Cocco L,et al.Protein kinase C involvement in cell cycle modulation[J].Biochem Soc Trans,2014,42(5):1471-1476.

［12］Topham CH,Taylor SS.M itosis and apoptosis:how is the balance set?[J].Curr Opin Cell Biol,2013,25(6): 780-785.

［13］Bolanos-Garcia VM.Formation of multiprotein assemblies in the nucleus:the spindle assembly checkpoint [J].Int Rev Cell Mol Biol,2014,307:151-174.

［14］Sinnott R,Winters L,Larson B,et al.Mechanisms promoting escape from mitotic stress-induced tumor cell death[J].Cancer Res,2014,74(14):3857-3869.

［15］Burgess A,Rasouli M,Rogers S.Stressing mitosis to death[J].Front Oncol,2014,4:140.

［16］Collin P,Nashchekina O,Walker R,et al.The spindle assembly checkpointworks like a rheostat rather than a toggle sw itch[J].Nat Cell Biol,2013,15(11):1378-1385.

［17］Bian Y,Kitagawa R,Bansal PK,et al.Synthetic genetic array screen identifies PP2A as a therapeutic target in Mad2-overexpressing tumors[J].Proc Natl Acad Sci USA,2014,111(4):1628-1633.

［18］Dick AE,Gerlich DW.Kinetic framework of spindle assembly checkpoint signalling[J].Nat Cell Biol,2013, 15(11):1370-1377.

［19］Han JS,Vitre B,FachinettiD,etal.Bimodalactivation of BubR1 by Bub3 sustainsmitotic checkpointsignaling[J]. Proc Natl Acad SciUSA,2014,111(40):E4185-4193.

［20］Mu?oz-Barrera M,Monje-Casas F.Increased Aurora B activity causes continuous disruption of kinetochore-microtubule attachments and spindleinstability[J].Proc Natl Acad Sci USA,2014,111(38):E3996-4005.

［21］Campbell CS,Desai A.Tension sensing by Aurora B kinase is independent of survivin-based centromere localization[J].Nature,2013,497(7447):118-121.

［22］Hell MP,Duda M,Weber TC,et al.Tumor suppressor VHL functions in the control ofmitotic fidelity[J].Can-cer Res,2014,74(9):2422-2431.

［23］Kops GJ.Cell division:SACing the anaphase problem [J].Curr Biol,2014,24(6):R224-226.

［24］Zhao B,Guan KL.Hippo pathway key to ploidy checkpoint[J].Cell,2014,158(4):695-696.

［25］Daniel J,Coulter J,Woo JH,et al.High levels of the Mps1 checkpoint protein are protective of aneuploidy in breast cancer cells[J].Proc Natl Acad Sci USA, 2011,108(13):5384-5389.

［26］Wang R,Green DR.Metabolic checkpoints in activated T cells[J].Nat Immunol,2012,13(10):907-915.

［27］Sinclair LV,Rolf J,Emslie E,et al.Control of am inoacid transport by antigen receptors coordinates themetabolic reprogramm ing essential for T cell differentiation [J].Nat Immunol,2013,14(5):500-508.

［28］Wang Y,Huang G,Zeng H,et al.Tuberous sclerosis 1 (Tsc1)-dependent metabolic checkpoint controls development of dendritic cells[J].Proc Natl Acad Sci USA, 2013,110(50):E4894-4903.

［29］Park H,Staehling K,Tsang M,etal.Disruption of Fnip1 reveals ametabolic checkpoint controlling B lymphocyte development[J].Immunity,2012,36(5):769-781.

［30］Shrestha S,Yang K,Wei J,et al.Tsc1 promotes the differentiation of memory CD8+T cells via orchestrating the transcriptional and metabolic programs[J]. Proc Natl Acad Sci USA,2014,111(41):14858-14863.

［31］Mar?ais A,Cherfils-Vicini J,Viant C,et al.Themetabolic checkpoint kinase m TOR is essential for IL-15 signaling during the development and activation of NK cells[J].Nat Immunol,2014,15(8):749-757.

［32］Lee IH,Kawai Y,Fergusson MM,et al.Atg7 modulates p53 activity to regulate cell cycle and survival during metabolic stress[J].Science,2012,336(6078): 225-228.

［33］Takubo K,Nagamatsu G,Kobayashi CI,et al.Regulation of glycolysis by Pdk functions as a metabolic checkpoint for cell cycle quiescence in hematopoietic stem cells[J].Cell Stem Cell,2013,12(1):49-61.

［34］Wang J,Sun Q,Morita Y,et al.A differentiation checkpoint limits hematopoietic stem cell self-renewal in response to DNA damage[J].Cell,2012,148(5):1001-1014.

［35］Kurachi M,Barnitz RA,Yosef N,et al.The transcription factor BATF operates as an essential differentiation checkpoint in early effector CD8+T cells[J].Nat Immunol,2014,15(4):373-383.

［36］Kong X,Liu Y,Ye R,et al.GSK3βis a checkpoint for TNF-α-mediated impaired osteogenic differentiation ofmesenchymal stem cells in inflammatory microenvironments[J].Biochim Biophys Acta,2013,1830 (11):5119-5129.

［37］Gordon SM,Chaix J,Rupp LJ,et al.The transcription factors T-bet and Eomes control key checkpoints of natural killer cell maturation[J].Immunity,2012,36(1): 55-67.

［38］Kong CM,Lee XW,Wang X.Telomere shortening in human diseases[J].FEBS J,2013,280(14):3180-3193.

［39］Sfeir A,de Lange T.Removal of shelterin reveals the telomere end-protection problem[J].Science,2012,336 (6081):593-597.

［40］Hu J,Hwang SS,Liesa M,et al.Antitelomerase therapy provokes ALT and m itochondrial adaptive mechanisms in cancer[J].Cell,2012,148(4):651-663.

［41］Davoli T,de Lange T.Telomere-driven tetraploidization occurs in human cells undergoing crisis and promotes transformation ofmouse cells[J].Cancer Cell,2012,21 (6):765-776.

［42］d'Adda di Fagagna F,Reaper PM,Clay-Farrace L,et al.A DNA damage checkpoint response in telomere-initiated senescence[J].Nature,2003,426(6963):194-198.

［43］任軍,黃紅艷.靶向免疫檢查點(diǎn)的腫瘤免疫治療現(xiàn)狀與趨勢(shì)[J].中國(guó)腫瘤臨床,2014,41(7):415-418.

［44］Ceeraz S,Nowak EC,Noelle RJ.B7 family checkpoint regulators in immune regulation and disease[J].Trends Immunol,2013,34(11):556-563.

［45］Nirschl CJ,Drake CG.Molecular pathways:coexpression of immune checkpoint molecules:signaling pathways and implications forcancer immunotherapy[J]. Clin Cancer Res,2013,19(18):4917-4924.

［46］Lines JL,Pantazi E,Mak J,et al.VISTA is an immune checkpointmolecule for human T cells[J].Cancer Res, 2014,74(7):1924-1932.

［47］Wang L,Le Mercier I,Putra J,et al.Disruption of the immune-checkpoint VISTA gene imparts a proinflammatory phenotype w ith predisposition to the development of autoimmunity[J].Proc Natl Acad Sci USA, 2014,111(41):14846-14851.

［48］Postow MA,Callahan MK,Barker CA,et al.Immunologic correlates of the abscopal effect in a patient w ith melanoma[J].N Engl JMed,2012,366(10):925-931.

［49］Brahmer JR.Immune checkpoint blockade:the hope for immunotherapy as a treatment of lung cancer?[J]. Sem in Oncol,2014,41(1):126-132.

R730.1

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2015.13.03.05

2013年甘肅省自然科學(xué)基金（1308RJZA 181）

#通信作者（corresponding author），e-mail：bhzhang1999@126.com

2014-10-28）