唐德華，廖文菊(四川民族學(xué)院環(huán)境與生命科學(xué)系，四川康定626001)

天麻(Gastrodia elata B1)為蘭科植物，其干燥塊莖為常用名貴中藥。天麻具有很高的藥用價值和經(jīng)濟價值，有關(guān)天麻的研究文獻較多［1］。蜜環(huán)菌(Armillariella mellea)隸屬于擔(dān)子菌亞門(Basidiomycotina)傘菌目(Agaricales)白磨科(Tricholomataceae)蜜環(huán)菌屬［Armillaria(Fr.)Staude］［2］。蜜環(huán)菌是天麻生長發(fā)育的基礎(chǔ)，為天麻的生長發(fā)育提供養(yǎng)分。目前，有關(guān)天麻蜜環(huán)菌的研究主要集中在天麻蜜環(huán)菌的培養(yǎng)、天麻蜜環(huán)菌對天麻產(chǎn)量的影響及天麻與蜜環(huán)菌的共生關(guān)系等方面的研究。

1 天麻蜜環(huán)菌的培養(yǎng)研究

為尋找更多適合天麻生產(chǎn)的能培養(yǎng)蜜環(huán)菌的樹材，黃明進等選取桉樹、天竺桂和女貞等8種貴州常見樹材的枝或干作菌材來接種蜜環(huán)菌，不同菌材培養(yǎng)的蜜環(huán)菌菌索的HPLC指紋圖譜有一定的差異，滇鼠刺、女貞和天竺桂較適合作為培育蜜環(huán)菌的菌材［3］。黃萬兵等對貴州天麻主產(chǎn)區(qū)大方、德江等地進行了蜜環(huán)菌的分離及rDNA-ITS序列分析，結(jié)果表明貴州省內(nèi)假蜜環(huán)菌(A.mellea)，A.cepistipes的分布最廣，其次是高盧蜜環(huán)菌(A.gallica)［4］。鄒寧等以天麻種子萌發(fā)形成的小米麻為材料，利用正交設(shè)計研究發(fā)現(xiàn)蜜環(huán)菌液對天麻的組織培養(yǎng)具有良好的促進效果［5］。

蜜環(huán)菌是天麻的共生菌，其菌絲及發(fā)酵液具有與天麻相類似的藥理作用，菌絲生長和多糖產(chǎn)生的最適初始pH為5.0左右，氧氣是影響多糖產(chǎn)生的另一重要因素，菌絲球大小與多糖的產(chǎn)生存在一定的負相關(guān)關(guān)系，即菌絲球大，多糖產(chǎn)量少［6］。天麻品種及蜜環(huán)菌均能影響天麻素含量，雜交種Fl的天麻素含量優(yōu)勢明顯［7］。不同大小天麻和蜜環(huán)菌中的礦質(zhì)元素含量不同，天麻可通過滲透作用從蜜環(huán)菌中獲取礦質(zhì)元素［8］。碳源因素對蜜環(huán)菌生長的影響大于氮源因素，蜜環(huán)菌適宜生長溫度為20～30℃，甘露醇是蜜環(huán)菌體內(nèi)積累較多的小分子糖類成分［9］。

在生產(chǎn)中，蜜環(huán)菌是天麻賴以生存的支柱，蜜環(huán)菌生長的好壞直接影響到后期天麻接菌狀況及產(chǎn)量效果，選擇性狀優(yōu)良的蜜環(huán)菌及適宜的培養(yǎng)基是栽培天麻的關(guān)鍵。蜜環(huán)菌原種純培養(yǎng)菌株的長勢除與菌株自身的遺傳特性有關(guān)外，還依賴于其培養(yǎng)基質(zhì)所提供的養(yǎng)分比例［10］。楊文宏等以分離篩選后的昭通烏天麻野生蜜環(huán)菌為試驗材料，以PDA為基本培養(yǎng)基研究了不同濃度NAA對昭通烏天麻野生蜜環(huán)菌生長的影響，以 5.0 μg/ml為蜜環(huán)菌生長的最佳濃度［11］。

2 天麻蜜環(huán)菌對天麻產(chǎn)量的影響研究

不同蜜環(huán)菌對天麻生物產(chǎn)量及天麻素含量的影響有顯著性差異，我國高海拔地區(qū)不同丙型蜜環(huán)菌對天麻生物產(chǎn)量及天麻素含量的影響有顯著性差異［12－13］。蜜環(huán)菌不同菌株對天麻產(chǎn)量具有一定的影響，蜜環(huán)菌菌株M1能顯著提高天麻產(chǎn)量，室內(nèi)瓶栽和室內(nèi)地栽(室內(nèi)地面覆土栽培)試驗均表現(xiàn)出良好的伴栽效果，適應(yīng)性強［14］。不同蜜環(huán)菌菌株對烏天麻產(chǎn)量的影響不同，其中菌株Ar-4能顯著提高天麻產(chǎn)量［15］。不同菌株對天麻的影響不同，天麻的產(chǎn)量和菌株的生長速度呈正相關(guān)關(guān)系［16］。

天麻的產(chǎn)量與質(zhì)量不僅與天麻麻種及萌發(fā)菌、蜜環(huán)菌2個菌種各自的質(zhì)量有關(guān)，而且還與為蜜環(huán)菌生長提供營養(yǎng)的菌材、各種相關(guān)因素的互作及栽培技術(shù)有關(guān)［17］。蜜環(huán)菌和菌材多了反而會抑制天麻的生長發(fā)育，導(dǎo)致天麻生長量減少和產(chǎn)量降低［18］。在栽培天麻時，選用未拌栽過天麻的密環(huán)菌有利于天麻的生長，同時要注意有可靠的栽培技術(shù)和科學(xué)的管理方法作保證［19］。栽培天麻的產(chǎn)量與質(zhì)量不僅取決于麻種的質(zhì)量，而且與菌種的無性繁殖代數(shù)密切相關(guān)，蜜環(huán)菌連續(xù)無性繁殖代數(shù)越高其質(zhì)量越差，采用誘導(dǎo)子實體方法可以使退化的蜜環(huán)菌復(fù)壯，其促進天麻生長及天麻素積累的作用也得以恢復(fù)［20］。

3 天麻與蜜環(huán)菌的共生關(guān)系

天麻與蜜環(huán)菌長期共生演化后，無葉綠素而不能進行光合作用，自身不能吸收營養(yǎng)，必須依靠蜜環(huán)菌侵入天麻體內(nèi)后為其供應(yīng)營養(yǎng)，天麻與蜜環(huán)菌的關(guān)系極為復(fù)雜［21］。天麻和蜜環(huán)菌對環(huán)境條件要求的一致性是它們建立共生關(guān)系的環(huán)境基礎(chǔ)，在營養(yǎng)上兩者之間的依賴性是它們建立共生關(guān)系的物質(zhì)基礎(chǔ)。特殊條件下，蜜環(huán)菌也會分解天麻塊莖以滿足自己的營養(yǎng)需要。在一般情況下，正常的共生關(guān)系對天麻是有利的，對蜜環(huán)菌也無害［22］。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)奧氏蜜環(huán)菌(Armillaria ostoyae)、高盧蜜環(huán)菌、Ajezoensis、芥黃蜜環(huán)菌(A.sinapina)、A.singuza 等5 種蜜環(huán)菌均可與天麻共生［23］。

蜜環(huán)菌代謝產(chǎn)物對天麻種子發(fā)芽初期有抑制作用［24］。蜜環(huán)菌胞內(nèi)提取液對天麻生長有一定的抑制作用，蜜環(huán)菌胞外提取液對天麻生長有促進作用，但不如活體蜜環(huán)菌的作用大［25］。蜜環(huán)菌能從天麻中獲取營養(yǎng)，且蜜環(huán)菌和天麻之間存在營養(yǎng)物質(zhì)的相互交流，菌麻之間存在著特殊的共生關(guān)系［26］。彭述敏等采用單因素試驗和正交試驗法進行了云南昭通2株優(yōu)良天麻共生蜜環(huán)菌生長條件篩選研究［27］。徐錦堂等利用顯微鏡和電鏡觀察到天麻種子可與紫萁小菇(Mycena osmundicola Lange)、蘭小菇(M.orchidicola Fan et Guo)等小菇屬真菌共生萌發(fā)形成原球莖［28］。胡忠等分離出了天麻抗真菌蛋白(GAFP)，并進行了測序與基因克?。?9］。

4 結(jié)語

國內(nèi)學(xué)者對天麻及蜜環(huán)菌進行了大量的研究，結(jié)果表明蜜環(huán)菌對天麻生長及產(chǎn)量的提高等具有十分重要的現(xiàn)實意義。近年來，分子生物學(xué)研究方法已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用，王守現(xiàn)等利用RAPD分子標記技術(shù)對收集的13個天麻栽培生產(chǎn)用蜜環(huán)菌菌株/菌種進行有效區(qū)分并分析其遺傳多樣性［30］。鄧艷芹采用ISSR分子標記對西部7個地理位置的與天麻共生的90個蜜環(huán)菌菌株進行遺傳多樣性以及遺傳分化分析［31］。目前對貴州地區(qū)天麻研究較多，而對其他天麻主產(chǎn)區(qū)，如四川、云南、陜西等地區(qū)的天麻的研究較少。因此，需加強對蜜環(huán)菌性狀品種的優(yōu)化篩選及對四川、云南、陜西等天麻及蜜環(huán)菌的研究，以促進天麻產(chǎn)業(yè)發(fā)展。

［1］張宏杰，周建軍，李新生.天麻研究進展［J］.氨基酸和生物資源，2003，25(1):17－20.

［2］邵力平，沈瑞祥，張素軒，等.真菌分類學(xué)［M］.北京:中國林業(yè)出版社，1984:1 －262.

［3］黃明進，羅春麗，劉紅昌，等.貴州8種樹材對天麻蜜環(huán)菌生長的影響［J］.貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42(2):115 －118.

［4］黃萬兵，桂陽，朱國勝，等.貴州天麻主產(chǎn)區(qū)蜜環(huán)菌的分離及rDNA-ITS序列分析［J］.西南師范大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版，2014，39(6):35 －42.

［5］鄒寧，柏新富.蜜環(huán)菌液對天麻試管快繁的影響［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36(33):14456 －14458.

［6］譚周進，謝達平，王征，等.蜜環(huán)菌胞外多糖的發(fā)酵條件研究［J］.微生物學(xué)通報，2002，29(3):33 －37.

［7］盧學(xué)琴.蜜環(huán)菌菌株對天麻素含量的影響［J］.中藥材，2007，30(10):1210－1212.

［8］王晶宇，趙致，李金玲，等.貴州大方紅桿天麻及其蜜環(huán)菌中的礦質(zhì)元素含量［J］.貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41(7):46 －48.

［9］程顯好，郭順星.蜜環(huán)菌固體培養(yǎng)特性［J］.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報，2006，28(4):553 －557.

［10］王守現(xiàn)，劉宇，許峰，等.蜜環(huán)菌原種品種及配方篩選試驗［J］.中國食用菌，2010，29(5):17 －18，20.

［11］楊文宏，黃美娟，黃海泉.萘乙酸對昭通烏天麻野生蜜環(huán)菌生長的影響［J］.北方園藝，2013(9):169－171.

［12］孫士青，陳貫虹.不同蜜環(huán)菌對天麻生物產(chǎn)量及天麻素含量的影響［J］.山東科學(xué)，2003，16(2):7 －10.

［13］孫士青，史建國，李雪梅，等.丙型蜜環(huán)菌對天麻生物產(chǎn)量及天麻素含量的影響［J］.山東科學(xué)，2008，21(4):10 －12.

［14］陳明義，李福后，邊銀丙.蜜環(huán)菌不同菌株對天麻產(chǎn)量的影響［J］.食用菌學(xué)報，2004，11(1):46 －48.

［15］季寧，李玉.不同蜜環(huán)菌菌株對烏天麻產(chǎn)量的影響［J］.菌物研究，2008，6(4):231 －233.

［16］王秋穎，郭順星，關(guān)鳳斌.不同來源蜜環(huán)菌對天麻產(chǎn)量影響的研宄［J］.中草藥，2001(9):74 －76.

［17］彭述敏，陳玉惠，敖新宇.蜜環(huán)菌與菌材不同組合對昭通烏天麻種子萌發(fā)及生長的影響［J］.西南林業(yè)大學(xué)學(xué)報，2012，32(3):47 －54.

［18］姚啟華，王紹柏.天麻蜜環(huán)菌材培養(yǎng)技術(shù)的源起、發(fā)展與展望［J］.食用菌，2013(6):5－6.

［19］王曉玲，王曉多，劉安發(fā)，等.天麻共生密環(huán)菌生長情況的實驗研究［J］.貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2005(4):340 －341.

［20］孫士青，馬耀宏，孟慶軍，等.野生、退化、復(fù)壯蜜環(huán)菌對天麻產(chǎn)量及天麻素量的影響［J］.中草藥，2009，40(8):1300 －1302.

［21］張維經(jīng)，李碧峰.天麻與蜜環(huán)菌的關(guān)系［J］.植物學(xué)報，1980，22(1):57－62.

［22］蔡義榮.淺論天麻和蜜籠不菌及其共生關(guān)系［J］.生物學(xué)通報，1987(1):11 －12.

［23］CHA J Y.IGARASHI T.Armillaria species associated with Gastrodia elata in Japan［J］.Eur J For Path，1995，25:319 －326.

［24］冉硯珠，徐錦堂.蜜環(huán)菌抑制天麻種子發(fā)芽的研究［J］.中藥通報，1988，13(10):15 －16.

［25］鄒寧，柏新富，呂劍濤，等.組織培養(yǎng)中天麻與蜜環(huán)菌共生機理的研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38(34):19312 －19313.

［26］蘭進，徐錦堂.蜜環(huán)菌和天麻共生營養(yǎng)關(guān)系的放射性自顯影研究［J］.真菌學(xué)報，1994，13(3):219 －222.

［27］彭述敏，陳玉惠，程立君，等.2株優(yōu)良天麻共生蜜環(huán)菌生長條件篩選［J］.中國食用菌，2010，29(4):22 －25.

［28］徐錦堂，范黎.天麻種子/原球莖和營養(yǎng)繁殖莖被菌根真菌定殖后的細胞分化［J］.植物學(xué)報，2001，43(10):1003 －1010.

［29］胡忠，黃清藻，劉小燭.天麻抗真菌蛋白GAfP－I的一級結(jié)構(gòu)和cDNA克隆［J］.云南植物研究，1999，21(2):131 －138.

［30］王守現(xiàn)，劉宇，張英春，等.蜜環(huán)菌菌株遺傳多樣性RAPD分析［J］.食用菌學(xué)報，2009，16(3):15 －19.

［31］鄧艷芹.湖北西部天麻共生蜜環(huán)菌的遺傳多樣性及協(xié)同進化［D］.武漢:中國科學(xué)院武漢植物園，2007.