董佳佳 王雪 貢濟(jì)宇

(長春中醫(yī)藥大學(xué) 吉林長春 130117)

隨著對人參研究的深入和發(fā)展,人參的化學(xué)成分和藥理作用已逐漸被發(fā)現(xiàn)。人參須根中人參皂苷以Rb1,Rc,Rd和Re居多,含量約為8%,對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)等均有藥理作用。本文采用水和不同濃度乙醇提取的人參提取液,通過小鼠翻正反射實驗[1],研究人參改善睡眠作用。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑

人參(購自于長春宏檢藥材公司),其產(chǎn)地均為吉林省,由長春中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室蔡廣知老師鑒定為五加科植物人參PanaxginsengC.A.Mey.的干燥根;戊巴比妥鈉(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,臨用時以蒸餾水配制,閾劑量:配制成5.0mg/ml的溶液,閾下劑量:配制成3.5mg/ml的溶液);地西泮片(2ml:10mg;,江蘇濟(jì)川制藥有限公司);甲醇(北京化工廠)。

1.2 實驗動物

人參ICR小鼠,清潔級,18-22g,雌雄各半,由吉林大學(xué)實驗動物中心提供。

1.3 藥液的制備

1.3.1 50%醇提液的制備

稱取一定量的人參藥材,用8倍量50%乙醇加熱回流提取3次,每次0.5h,合并提取液,濾過濃縮至折合生藥5g/ml,即得人參50%醇提液。

1.3.2 75%醇提液的制備

按照“1.3.1”項下方法,采用75%乙醇,即得人參75%醇提液。

1.3.3 90%醇提液的制備

按照“1.3.1”項下方法,采用90%乙醇,即得人參90%醇提液。

1.3.4 水提液的制備

稱取一定量的人參藥材,用12倍量蒸餾水煎煮提取3次,每次1h,合并提取液,濾過濃縮至折合生藥5g/ml,即得人參水提液。

表1 不同濃度醇提與水提藥液對戊巴比妥鈉所致小鼠的睡眠潛伏期和睡眠時間影響(min,±s)

1.4 實驗方法與指標(biāo)

將60只實驗動物放置實驗室適應(yīng)環(huán)境,一周后隨機(jī)分為6組,每組10只,隨機(jī)分為空白對照組、A組(50%醇提液)、B組(75%醇提液)、C組(90%醇提液)、D組(水提液)、陽性對照組6組。A-D組為實驗動物組,經(jīng)灌胃途徑按照50g/kg劑量給藥,空白對照組和陽性對照組給予相同體積蒸餾水,連續(xù)灌胃給藥7d。末次給藥30min后,其余經(jīng)腹腔注射給予50mg/kg的戊巴比妥鈉(注射體積為0.2ml/20g體重),以腹腔注射時間至翻正反射消失時間記為睡眠潛伏期,以翻正反射消失的持續(xù)時間記為睡眠時間為指標(biāo),分別記錄睡眠潛伏期時間和睡眠時間。

2 實驗結(jié)果

水提液和不同濃度醇提液對戊巴比妥鈉所致小鼠的睡眠潛伏期和睡眠時間影響,見表1,圖1。

實驗結(jié)果顯示,陽性對照組比與空白對照組能明顯縮短小鼠睡眠潛伏期且顯著延長睡眠時間(p<0.05),表明該試驗方法可靠。與空白對照組比,A組(50%醇提液)和B組(75%醇提液)對戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠潛伏期與睡眠時間均有明顯差異, B組(75%醇提液)明顯縮短了睡眠潛伏期和延長睡眠時間,差異具有顯著性意義(p<0.05)。因此,75%醇提的人參改善睡眠作用效果最佳。

3 討論

人參總皂苷提取方法較多,如浸漬法、回流提取法、超聲波提取法等[2-3]。人參須根對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)等均有藥理作用。本文采用水和不同濃度乙醇提取的人參提取液,通過小鼠翻正反射實驗,研究人參改善睡眠作用。本文采用水提和不同濃度醇提的人參提取液,通過小鼠翻正反射實驗,研究人參改善睡眠作用,為后續(xù)開發(fā)具有改善睡眠功能和記憶功能的中藥復(fù)方制劑提供了科學(xué)依據(jù)。

[1]張博,李廷利.天然冰片與合成冰片對戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠時間的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2013,11,11(31):2512～2514.

[2]謝麗玲,任理,賴縣生,曹俊輝,莫全毅,陳蔚文.紅參中人參總皂苷的提取純化工藝研究[J].中藥材,2009,10,32(10):1602～1605.

[3]毛祖林,李曉波,龔文明,范薇.人參皂苷提取工藝優(yōu)選.時珍國醫(yī)國藥,2008,19 (11):762～2763.