施杏芬,朱聰英
(浙江省獸藥飼料監(jiān)察所,浙江杭州311000)
復合預混合飼料是配合飼料的核心,其混合均勻度的好壞直接影響配合飼料的品質。飼料混合均勻度測定的現(xiàn)行標準有GB/T 5918和GB/T 10649,然而這兩種標準均不適用于復合預混合飼料和維生素預混合飼料。本實驗旨在選擇合適的方法開展預混合飼料中混合均勻度的測定??紤]到脂溶性維生素相對不穩(wěn)定,而維生素B2不僅比較穩(wěn)定,而且在預混合飼料產品中添加量比較適中,因此依據(jù)GB/T 14701-2002標準,采用高效液相色譜法測定維生素B2含量,用其含量的變異系數(shù)來衡量復合預混合飼料的混合均勻度。方法簡便易行,企業(yè)可以結合定期檢驗同時進行混合均勻度驗證。
從同一批產品中抽取10個有代表性的原始樣品,每個樣品在一點集中采集,每個樣品的采樣量為50~100 g,試樣制備按GB/T 20195執(zhí)行。
2.1 試劑與溶液 乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)、庚烷磺酸鈉(優(yōu)級純)、冰乙酸(優(yōu)級純)、三乙胺(色譜純)、甲醇(色譜純)。提取液:稱取50 mg EDTA于1000 mL容量瓶,加純水溶解后,加入25 mL冰乙酸和5 mL三乙胺,并用純水定容至刻度搖勻。流動相:稱取50 mg EDTA和1.1 g庚烷磺酸鈉于1000 mL容量瓶,加純水溶解,加入25 mL冰乙酸和5 mL三乙胺,并用純水定容至刻度搖勻,再用冰乙酸或三乙胺調pH至3.40±0.02,過0.45 μm濾膜。取該溶液860 mL與甲醇140 mL混合,超聲脫氣,待用。
2.2 主要儀器 高液相色譜儀(配紫外檢測器)、超聲波清洗器、pH計。
2.3 標準溶液配制 準確稱取維生素B2標準品(含量≥98.0%)0.0100 g于200 mL棕色容量瓶,加1 mL冰乙酸和100 mL純水,置50℃超聲波清洗器中超聲溶解,冷卻至室溫后用純水定容至刻度,搖勻,此溶液濃度為50 μg/mL,4℃冰箱避光保存6個月。準確吸取該溶液3.0 mL于10 mL棕色容量瓶中,用流動相定容至刻度,搖勻。該標準溶液濃度為 15 μg/mL,過 0.45 μm 濾膜,上機測定。
3.1 試樣提取 稱取試樣0.25~3 g(視維生素B2標示值稱量,精確至0.0001 g)于100 mL棕色容量瓶,加入80 mL左右的提取液,置于50℃超聲波清洗器中超聲30 min溶解,期間搖動若干次,冷卻至室溫加入14 mL甲醇,用提取液定容至刻度,搖勻,維生素預混合飼料可用提取液適當進行稀釋。過0.45 μm濾膜,上機測定。
3.2 色譜條件 NoVa-pak色譜柱:150mm×3.9mm,粒度4 μm的C18柱或相當者;流速:1.0 mL/min;進樣體積:10 μL;柱溫:30 ℃;檢測波長 280 nm。
4.1 各試樣中維生素B2含量計算公式
式中:X為試樣中維生素B2的含量,mg/kg;m為試樣質量,g;Vi為試樣溶液進樣體積,μL;Pi為試樣溶液峰面積值;V為試樣定容體積,mL;ci為標準溶液濃度,μg/mL;Vst為標準溶液進樣體積,μL;Psti為標準溶液峰面積值。
4.2 混合均勻度變異系數(shù)計算 通過10個維生素B2試樣含量的平均值(X-)和標準差(S)計算得到混合均勻度變異系數(shù),結果見表1。
維生素B2含量的平均值按下式計算:
隨機抽取5個不同預混合飼料產品,用上述方法測定了混合均勻度變異系數(shù),結果見表1。結果顯示這5種預混合飼料產品的混合均勻度均小于5%,符合《飼料生產企業(yè)許可條件》中規(guī)定的設備混合均勻度變異系數(shù)的要求。
表1 5種不同預混合飼料產品混合均勻度變異系數(shù)測定結果
該方法可以為預混合飼料生產企業(yè)提供混合機的混合性能驗證、最佳混合時間確定的方法依據(jù)。對于配合飼料生產企業(yè),也可以用該方法考察、驗證小料混合機的混合性能、確定最佳混合時間.