劉 園，張華峰，宋 青，戴 博

(空軍總醫(yī)院，北京 100142)

甲癬涂劑是由水楊酸、冰醋酸、碘、碘化鉀等成分混合制成的涂劑，為紅棕色澄明液體，有冰醋酸特臭［1］;具有溶解角質(zhì)、抑制真菌的作用，用于手、足甲癬治療［2］;收載于《中國(guó)人民解放軍醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑規(guī)范》2003版中(下簡(jiǎn)稱(chēng)《軍規(guī)》)。原處方中冰醋酸與乙醇儲(chǔ)存過(guò)程中會(huì)生成乙酸乙酯［3－4］，有效期僅為7 d，不適合商品化。本試驗(yàn)改進(jìn)了制備工藝，修改了原《軍規(guī)》中處方，通過(guò)對(duì)其穩(wěn)定性的測(cè)定，得到滿(mǎn)意的結(jié)果。并且為了更好的控制該制劑的質(zhì)量，在原有的方法基礎(chǔ)上加以修訂，修訂了H+總量、碘和碘化鉀的含量測(cè)定方法，終點(diǎn)顏色反應(yīng)靈敏，方法準(zhǔn)確，結(jié)果穩(wěn)定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 電子分析天平(Sartorius，型號(hào):BS 110S);25 mL、50 mL滴定管;移液管(1 mL);三角瓶(25 mL)(北京玻璃儀器廠(chǎng))。

1.2 試藥 冰醋酸(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)10000218);苯二甲酸氫鉀(基準(zhǔn)試劑);二甲基亞砜為色譜純;甲醇為色譜純;鄰氫氧化鈉為分析純;硫代硫酸鈉為分析純;水為重蒸水，其余試劑均為分析純。甲癬涂劑樣品(批號(hào):20130801、20130802、20130803，空軍總醫(yī)院提供)。其余原料均由空軍總醫(yī)院提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 甲癬涂劑的制備和穩(wěn)定性考察

2.1.1 甲癬涂劑的制備 取水楊酸50 g溶于250 mL二甲基亞砜后，加300 mL冰醋酸混勻;另取27 g碘化鉀溶于適量水中，加碘使其溶解，再與前液混合后，加水使成1 000 mL，攪勻，即得。

2.1.2 甲癬涂劑的穩(wěn)定性考察 將“2.1.1”項(xiàng)處方工藝制備的三批樣品(01、02、03)放置于(25±2)℃，相對(duì)濕度(60±10)%的環(huán)境中保存［5］，并定期于放置1、3、6、10 d后分別取樣檢測(cè)，考察樣品的外觀(guān)及含量變化?！?.1.1”項(xiàng)下的制備的甲癬涂劑短期內(nèi)穩(wěn)定性良好，后續(xù)穩(wěn)定性可做長(zhǎng)期試驗(yàn)驗(yàn)證。穩(wěn)定性結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

2.2 H+總量的含量測(cè)定

2.2.1 測(cè)定方法 精密量取本品2 mL，加新沸過(guò)的冷水20 mL，逐滴滴入5%的硫化鈉溶液，振搖，使溶液的棕紅色逐步退去，直至顯微黃色，加酚酞［6］指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液(0.5 mol·L－1)滴定至粉紅色。每1 mL氫氧化鈉滴定液(0.5 mol·L－1)相當(dāng)于 0.503 95 mg的 H+總量。

2.2.2 精密度試驗(yàn) 取同一批樣品，按照修訂后的方法進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果表明該方法的精密度良好，見(jiàn)表2。

2.2.3 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取本品，3個(gè)不同操作者分別按照修訂后的方法進(jìn)行含量測(cè)定，計(jì)算3個(gè)不同操作者測(cè)定的H+總量的含量變化。3個(gè)不同操作者測(cè)得的H+總量平均含量均小于2%。結(jié)果表明該方法的重現(xiàn)性良好。

表2 H+總量精密度測(cè)定結(jié)果

2.2.4 回收率試驗(yàn) 按照甲癬涂劑處方量的要求，分別加入處方量80%、100%、120%的水楊酸和冰醋酸，其他物質(zhì)的加入量不變，最后用水補(bǔ)足至處方量。按上述修訂方法測(cè)定，記錄氫氧化鈉滴定液的用量，平行測(cè)定3次，計(jì)算平均回收率。結(jié)果表明該方法的回收率良好，見(jiàn)表3。

2.2.5 修訂后方法與《軍規(guī)》方法比較 分別使用修訂后方法和《軍規(guī)》方法測(cè)定3批樣品，每個(gè)樣品平均測(cè)定3次。結(jié)果表明，修訂后的方法先采用硫化鈉溶液還原碘單質(zhì)，再以酚酞作指示劑，氫氧化鈉滴定液滴定，不僅使終點(diǎn)判定更靈敏，且測(cè)定結(jié)果與理論含量接近，保證了測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。見(jiàn)表4。

表4 兩種方法三批樣品H+總量的含量測(cè)定結(jié)果的比較

2.3 碘和碘化鉀的含量測(cè)定

2.3.1 測(cè)定方法 精密量取本品5 mL，至碘量瓶中，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1 mol·L－1)滴定至近中點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液1 mL，繼續(xù)滴定至溶液藍(lán)色消失，即得。每1 mL硫代硫酸鈉滴定液(0.1 mol·L－1)相當(dāng)于 12.69 mg的碘。

取上述滴定碘［7－8］含量后的溶液加曙紅鈉指示液3滴，用硝酸銀滴定液滴定，至沉淀由黃色轉(zhuǎn)變?yōu)槊倒寮t色;將消耗的硝酸銀滴定液(0.1 mol·L－1)的毫升數(shù)減去碘消耗的硫代硫酸鈉滴定液(0.1 mol·L－1)的毫升數(shù)。每1 mL的硝酸銀滴定液(0.1 mol·L－1)相當(dāng)于16.60 mg 的碘化鉀。

2.3.2 精密度試驗(yàn) 取同一批樣品，按照修訂后的方法進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果表明該方法的精密度良好，見(jiàn)表 5，6。

表5 碘的精密度測(cè)定結(jié)果

表6 碘化鉀精密度測(cè)定結(jié)果

2.3.3 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取本品，3個(gè)不同操作者分別按照修訂后的方法進(jìn)行含量測(cè)定，計(jì)算3個(gè)不同操作者測(cè)定的碘和碘化鉀的含量變化。3個(gè)不同操作者測(cè)得的碘和碘化鉀平均含量均小于2%。結(jié)果表明該方法的重現(xiàn)性良好。

2.3.4 回收率試驗(yàn) 按照甲癬涂劑處方量的要求，分別加入處方量80%、100%、120%的碘和碘化鉀。按上述修訂方法測(cè)定，平行測(cè)定3次，計(jì)算平均回收率。結(jié)果表明該方法的回收率良好，見(jiàn)表7，8。

2.3.5 樣品含量測(cè)定結(jié)果 取本品三批樣品，用修訂的含量測(cè)定方法與原方法比較，結(jié)果見(jiàn)表9。

表7 碘的回收率結(jié)果

表9 三批樣品中碘和碘化鉀的含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 H+總量 國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)規(guī)范規(guī)定，定量分析［9］在含量測(cè)定中應(yīng)用指導(dǎo)原則要求供試品的取用量應(yīng)滿(mǎn)足精度要求，一般消耗滴定液約20 mL。《軍規(guī)》中供試品的取用量為1 mL，用0.1 mol·L－1氫氧化鈉滴定液滴定理論上應(yīng)消耗在60 mL左右，與國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)要求不一致。本研究根據(jù)樣品取量和滴定劑的濃度計(jì)算，將原標(biāo)準(zhǔn)中取樣由1 mL增加到2 mL，同時(shí)將氫氧化鈉滴定液的濃度由原標(biāo)準(zhǔn)的 0.1 mol·L－1增加到 0.5 mol·L－1，理論上氫氧化鈉滴定液應(yīng)消耗在20 mL，因此甲癬涂劑的取樣量和氫氧化鈉滴定液的消耗量都滿(mǎn)足國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)要求。

《軍規(guī)》中測(cè)定H+總量時(shí)對(duì)樣品未加任何處理，采用酚酞作指示劑，氫氧化鈉滴定液直接滴定。因?yàn)榧装_涂劑中含大量的碘單質(zhì)，溶液為紅棕色，溶液中的碘單質(zhì)不僅影響滴定終點(diǎn)的判斷，而且消耗氫氧化鈉滴定液使測(cè)定結(jié)果偏高。因此本研究修訂了H+總量的測(cè)定方法，先用硫化鈉溶液還原碘單質(zhì)，再以酚酞作指示劑，氫氧化鈉滴定液滴定。

每1 mL氫氧化鈉滴定液(0.1 mol·L－1)應(yīng)該相當(dāng)于 0.100 79 mg 的 H+總量［10］，而不是 1.007 9 mg的H+總量，原標(biāo)準(zhǔn)中書(shū)寫(xiě)錯(cuò)誤。因此，每1 mL氫氧化鈉滴定液(0.5 mol·L－1)應(yīng)相當(dāng)于 0.503 95 mg H+總量。

3.2 碘和碘化鉀 測(cè)定碘和碘化鉀量時(shí)，將原標(biāo)準(zhǔn)中取樣量2 mL增加到5 mL，增加了滴定液的消耗量，滿(mǎn)足精度要求。

3.3 制備工藝 冰醋酸為甲癬涂劑中有效成分之一，原《軍規(guī)》中的家甲癬涂劑中溶解水楊酸的是乙醇和丙酮，有文獻(xiàn)報(bào)道［11］甲癬涂劑中的冰醋酸與乙醇在儲(chǔ)存過(guò)程中形成乙酸乙酯，導(dǎo)致藥效降低，有效期僅為4 d;且碘和丙酮［12－13］這兩種成分能使H+總量下降速度加快，并且碘是一種氧化劑，在甲癬涂劑中可能對(duì)酯化反應(yīng)有一定的催化作用，丙酮具有羰基，可與水分子的氫形成氫鍵，同時(shí)又可與水發(fā)生加成反應(yīng)而減少環(huán)境中的水量，從而能促使反應(yīng)向酯化反應(yīng)方向進(jìn)行。本研究通過(guò)工藝改進(jìn)，將乙醇和丙酮去掉，用二甲基亞砜［14－16］作為溶劑，保證了制劑的穩(wěn)定性。冰醋酸的測(cè)定方法一般為酸堿滴定法，乙酸乙酯的測(cè)定方法為氣相色譜法，后續(xù)實(shí)驗(yàn)中考慮用氣相色譜法對(duì)甲癬涂劑在儲(chǔ)存過(guò)程中冰醋酸及乙酸乙酯的含量同時(shí)進(jìn)行測(cè)定，進(jìn)而分析其穩(wěn)定性。由于處方中含有乙醇和丙酮，有機(jī)溶劑不能單獨(dú)將其萃取出來(lái)，因此不能利用酸堿滴定法測(cè)定冰醋酸的含量;此外，也不能測(cè)定乙酸乙酯的含量。因此根據(jù)冰醋酸和乙酸乙酯本身的性質(zhì)，建議用GC法測(cè)定甲癬涂劑中冰醋酸及儲(chǔ)存過(guò)程中可能產(chǎn)生的乙酸乙酯的含量。進(jìn)行甲癬涂劑的穩(wěn)定性試驗(yàn)條件:考察在室溫(25±2)℃，相對(duì)濕度(60±10)%放置10 d內(nèi)冰醋酸和乙酸乙酯的含量情況。

3.4 甲癬涂劑 性狀為為紅棕色澄明液體，有冰醋酸特臭;作用與用途:具有溶解角質(zhì)、抑制真菌的作用，用于手、足甲癬治療;用法與用量:外用，刮薄病甲板后，涂于患處;貯藏:置于非金屬容器內(nèi)，密封，在陰暗處保存。水楊酸與碘能結(jié)合成不溶物，故配制時(shí)不宜用碘溶液直接溶解水楊酸。本品忌與金屬器皿接觸，以免變色。本品腐蝕性強(qiáng)，應(yīng)用時(shí)只涂病甲，注意不要涂在周?chē)】灯つw組織上。

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