朱新金

[摘要] 目的 探討JAK2V617F突變在原發(fā)性血小板增多癥（essential thrombocythemia，ET）中的發(fā)生率及其與血栓發(fā)生的相關性。 方法 通過對我院2013年1月～2015年4月診治的24例ET患者的臨床特點及JAK2V617F突變進行回顧性分析。 結果 24例ET患者中JAK2V617F發(fā)生率為62.5%（15/24），JAK2V617F陽性組中血栓風險度為46.7%（7/15），較陰性組22.2%（2/9）高（χ2=8.47，P<0.05）。 結論 JAK2V617F突變在原發(fā)性血小板增多癥的臨床診斷及病情評估中有重要意義，對判斷疾病狀態(tài)、指導治療及預防血栓事件發(fā)生將會有臨床意義。

[關鍵詞] 原發(fā)性血小板增多癥；JAK2V617F；骨髓增殖性疾病；診斷

[中圖分類號] R733.3 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2015）29-0064-02

Clinical analysis for JAK2V617F mutation in 24 patients with essential thrombocythemia

ZHU Xinjin

Department of Hematology， Ju'nan County People's Hospital in Shandong Province， Ju'nan 276600， China

[Abstract] Objective To analyze the occurrence rate of JAK2V617F mutation in ET patients and the correlations of JAK2V617F mutation and thrombotic complication. Methods A retrospective analysis was conducted in clinical characteristics and JAK2V617F mutation of the 24 patients with ET treated in our hospital from January 2013 to April 2015. Results The occurrence rate of JAK2V617F mutation in the 24 patients with ET was 62.5%（15/24）. The patients in positive group displayed higher thrombosis risk degree （7/15，46.7%） than others in the negative group （2/9， 22.2%） （χ2=8.47，P<0.05）. Conclusion JAK2V617F mutation has significance in the clinical diagnosis of ET and disease assessment， for estimating disease states， guiding the treatment and preventing thrombosis events will have clinical significance.

[Key words] Essential thrombocythemia； JAK2V617F； Myeloproliferative disease； Diagnosis

原發(fā)性血小板增多癥（essential thrombocythemia，ET）是以血小板增多為主要特征的慢性骨髓增殖性疾?。╩yeloproliterative disease，MPD），骨髓細胞學檢查顯示骨髓巨核細胞增多。國內診斷標準中血小板計數>1000×109/L，除外繼發(fā)性血小板增多癥和其他骨髓增殖性疾病者，臨床主要表現為出血、血栓癥狀和脾臟腫大體征。ET發(fā)病率0.59/10萬～2.53/10萬，50～60歲為高發(fā)年齡。Baxter等[1]的研究首次發(fā)現MPD患者存在高發(fā)體細胞JAK2V617F突變；自2005年Baxter報道之后不斷有人研究證實了JAK2V617F在ET中的存在，其發(fā)生率為50%～60%[2-4]。本文對我院2013年1月～2015年4月診治的24例ET患者的臨床特點及JAK2V617F檢測結果進行回顧性分析，旨在提高JAK 2V617F對臨床診斷及預后相關問題的認識，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2013年1月～2015年4月診治的24例ET患者，均符合2001年WHO診斷標準[5]，其中男11例（45.8%），女13例（54.2%），中位年齡56（43～81）歲。

1.2 方法

除常規(guī)檢查項目包括血常規(guī)、凝血功能、骨髓細胞學、腹部B超、血管彩超、腦CT等，特別抽取EDTA抗凝骨髓或外周血2～3 mL送檢JAK2V 617F基因突變（濟南艾迪康醫(yī)學檢驗中心熒光PCR法）。

1.3 評價指標

觀察JAK2V617F陽性組和陰性組ET患者中血栓和出血的發(fā)生率。血栓和出血的診斷符合相關指南[6]及中華醫(yī)學會第四屆全國腦血管病會議制定的診斷標準。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學分析，陽性率組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

24例ET患者中，JAK2V617F陽性15例（62.5%），其中男7例（46.7%），女8例（53.3%）。15例JAK2V617F陽性患者中，7例并發(fā)血栓性疾病，2例發(fā)生出血癥狀；JAK2V617F陽性組中血栓風險度（46.7%，7/15）較陰性組（22.2%，2/9）高，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=8.47，P<0.05）。陽性組出血風險度（6.7%，1/15）與陰性組（11.1%，1/9）比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

3 討論

自2005年以來大量文獻報道了bcr/abl陰性MPD包括原發(fā)性血小板增多癥、真性紅細胞增多癥、特發(fā)性骨髓纖維化等3類疾病中的JAK2基因點突變，為ET的診斷提供了新的標準，也為未來的靶向治療提供了分子生物學依據，是繼bcr/abl之后MPD發(fā)病機制的重要研究進展。本組24例ET患者中JAK2V617F發(fā)生率62.5%，性別之間差異不大（男46.7% vs 女53.3%），結果與Kittur等[7]報道基本一致。

ET臨床上主要表現為出血和血栓癥狀，出血癥狀大多較輕，血栓是本病患者的主要死亡原因，ET患者生活質量主要與血栓相關。血栓及出血的發(fā)生率各家報道不一，尤其是血栓的發(fā)生率差異較大。國外報道，在初診ET患者中血栓事件的發(fā)生率為9.7%～29.4%，藍海峰等[8]研究顯示血栓者19.6%，出血者23.1%。本組患者中血栓發(fā)生率37.5%（9/24），出血8.3%（2/24）。Finazzi等[9]的研究結果顯示，血栓事件的發(fā)生率在JAK2V617F突變的ET患者中為33%，比野生型ET患者的17%高。晁紅穎等[10]研究結果顯示，JAK2V617F陽性組中血栓發(fā)生風險度高于陰性組，進一步的分析發(fā)現，發(fā)生血栓的患者具有更高的JAK2V617F突變轉錄本水平，JAK2V617F轉錄本水平在60%～100%之間的患者組和在40%～60%之間的患者組相比較，發(fā)生血栓的風險更高。鄒麗芳等[11]研究結果顯示，bcr/abl陰性的MPN患者中存在較高的JAK2V617F突變率，MPN患者中不僅存在著血常規(guī)的改變，也存在著血小板活化、凝血亢進、抗凝抑制及纖溶激活等凝血功能方面的改變，而且這些改變在JAK2V617F陽性患者中更明顯。其他研究結果顯示，JAK2V617F點突變在MPN患者中存在較高表達，陽性患者更易罹患血栓栓塞[12-14]。De Stefano等[15]的研究結果更是認為JAK2V617F突變是反復發(fā)生血栓栓塞的獨立危險因素。我們的結果同樣顯示，JAK2V617F陽性組中血栓風險度（46.7%，7/15）較陰性組（22.2%，2/9）高。陽性組出血風險度（8.3%，1/15）比陰性組（11.1%，1/9）低，兩組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

WHO在2008年重新修訂了MPN的診斷標準，其修改的主要依據是多數患者都具有JAK2突變，有無JAK2突變（主要是JAK2V617F）成為診斷MPD的重要指標[16]。近幾年來新的測序技術在臨床上不斷推廣應用，更多和MPN相關的基因被發(fā)現，為疾病的臨床診斷提供了新的分子生物學標志。如果JAK2突變陽性，骨髓巨核細胞增生，血小板持續(xù)>450×109/L，也可以診斷ET。ET的傳統(tǒng)治療藥物有羥基脲、干擾素、馬利蘭、阿司匹林等，干擾素、羥基脲等藥物減少血小板數目，阿司匹林等藥物干預血小板功能，可使ET患者長期維持無癥狀生存，但存在副作用及耐藥風險[8]，如羥基脲耐藥，阿司匹林敏感性降低等。近年來通過抑制JAK2基因來治療MPN的藥物正在積極的研制和試驗中，抑制JAK2基因表達的藥物Ruxolitinib（即INCB18424）已被美國FDA批準用于骨髓纖維化的治療[17]，TG101209，TG101348，Erlotinib等均有可能進入臨床，最終有可能使ET患者獲得治愈，因此ET的診斷和治療已經進入了分子生物學時代。

總之，基因檢測在疾病診斷中愈來愈重要，JAK2 V617F陽性與陰性ET患者有著不同的臨床特征，JAK2V617F點突變在原發(fā)性血小板增多癥的臨床診斷及病情評估中有重要意義，仍需增加樣本量進一步觀察分析。進一步分析其突變類型、檢測其轉錄水平對判斷疾病狀態(tài)、指導治療及預防血栓事件發(fā)生將會有重要的臨床意義。

[參考文獻]

[1] Baxter EJ，Scott LM，Campbell PJ，et al. Acquired mutation of the tyrosine kinase JAK2 in human myeloproliferative disorders[J]. Lancet，2005，365（9464）：1054-1061.

[2] Lippert E，Boissinot M，Kralovics R，et al. The JAK2V617F mutation is frequently present at diagnosis in patients with essential thrombocythemia and polycythemia vera[J]. Blood，2006，108（6）：1865-1867.

[3] 朱俊芳，劉媛，劉蓓，等. 骨髓增殖性疾病中JAK2V617F基因突變及與臨床特征的關系[J]. 中國實驗血液學雜志，2011，19（4）：916-920.

[4] 劉玉泉，劉傳芳，何娜，等. MGB Taqman探針法定量檢測415例骨髓增殖性腫瘤患者JAK2V617F突變負荷及其臨床相關性研究[J]. 中華血液學雜志，2015，36（3）：191-195.

[5] Jaffe ES，Harris NL，Stein H，et al. Pathology and genetics of tumors of haematopoietic and lymphoid tissues[J]. IARC Press，2001：39-42.

[6] 中華醫(yī)學會外科學分會血管外科學組. 深靜脈血栓形成的診斷和治療指南[J]. 中華外科雜志，2012，50（7）：611-614.

[7] Kittur J，Knudson RA，Lasho TL，et al. Clinical correlates of JAK2V617F allele burden in essential thrombocythemia[J].Cancer，2007，109（11）：2279-2284.

[8] 藍海峰，方志鴻，張悅，等. 438例原發(fā)性血小板增多癥的臨床分析[J]. 中華血液學雜志，2008，29（9）：587-591.

[9] Finazzi G，Rambaldi A，Guerini V，et al. Risk of thrombosis in patients with essential thrombocythemia and polycythemia vera cording to JAK2V617F mutation[J]. Haematologica，2007，92（1）：135-136.

[10] 晁紅穎，沈益民，張日，等. 98例原發(fā)性血小板增多癥JAK2基因突變的定量分析及其臨床意義[J]. 中國實驗血液學雜志，2009，17（3）：665-669.

[11] 鄒麗芳，姚一蕓，朱琦，等. 骨髓增殖性腫瘤患者止凝血功能的改變[J]. 血栓與止血學，2014，20（4）：178-181.

[12] Tefferi A. Polycythemia vera and essential thrombocythemia：2012 update on diagnosis，risk stratification，and management[J]. Am J Hemato1，2012，87（3）：285-293.

[13] 薛育新，李明利，段靜靜. JAK2V617F基因突變在骨髓增殖性腫瘤中的表達及臨床意義[J]. 中國醫(yī)師雜志，2013，15（3）：398-400.

[14] 楊慧華. 真性紅細胞增多癥27例臨床分析[J]. 白血病、淋巴瘤，2014，23（2）：116-117.

[15] De Stefano V，Za T，Rossi E，et al. Increased risk of recurent thrombosis in patients with essential thrombocythemia carrying the homozygous JAK2V617F mutation[J].Ann Hematol，2010，89（2）：141-146.

[16] Tefferi A，Vardiman JW. Classification and diagnosis of myeloproliferative neoplasms：The 2008 World Health Organization criteria and point-of-care diagnostic algorithms[J]. Leukemia，2008，22（1）：14-22.

[17] Mascarenhas J，Hoffman R. Ruxolitinib：The first FDA approved therapy for the treatment of myelofibrosis[J].Clin Cancer Res，2012，18（11）：3008-3014.

（收稿日期：2015-06-30）