張 忠，楊百萬，祝艷華

（1.甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，武威 733006；2.甘肅省武威市古浪縣定寧鎮(zhèn)人民政府）

天祝白牦牛腸道有益菌對小白鼠生長性能的影響

張 忠1，楊百萬2，祝艷華1

（1.甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，武威 733006；2.甘肅省武威市古浪縣定寧鎮(zhèn)人民政府）

將180只小白鼠隨機分為6組：對照組Ⅰ、對照組Ⅱ、枯草芽孢桿菌灌服組（Ⅲ組）、嗜酸乳桿菌灌服組（Ⅳ組）、枯草芽孢桿菌腹腔注射組（Ⅴ組）及嗜酸乳桿菌腹腔注射組（Ⅵ組），試驗期28 d，比較各處理方法對小白鼠體重、采食量及臟器指數(shù)的影響。結(jié)果表明：嗜酸乳桿菌及枯草芽孢桿菌以灌服的方式給藥均能顯著提高小鼠的日增重、料重比及臟器指數(shù)（P＜0.05），其中枯草芽孢桿菌較嗜酸乳桿菌對小鼠的日增重及料重比的提高更為明顯。

白牦牛；腸道有益菌；小白鼠；平均日增重；料重比；臟器系數(shù)

隨著生活水平的提高，人們對健康愈加重視，而微生態(tài)制劑是源于動物體內(nèi)的正常菌群成員，由于其對宿主無害，將其制成活菌制劑再應(yīng)用于人或動物體內(nèi)，具有調(diào)整菌群平衡，增強機體生理功能的作用［1］。近年來，用益生菌替代抗生素的“綠色養(yǎng)殖”模式在動物養(yǎng)殖界引起廣泛關(guān)注，已成為中國養(yǎng)殖界的重要需求。益生菌能夠分泌多種消化酶，并與動物體內(nèi)的消化酶類一同在消化道中發(fā)揮消化吸收作用，參與動物代謝過程，促進(jìn)動物對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，提高飼料轉(zhuǎn)化率，對動物的生長發(fā)育有促進(jìn)作用［2］。本文研究了嗜酸乳桿菌和枯草芽孢桿菌（從外表健康的待宰白牦牛直腸糞便中無菌采集并分離純化后得到活菌）對小白鼠生長性能的影響，以期為益生菌制劑的研制及其在臨床上的應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

枯草芽孢桿菌及嗜酸乳桿菌均系從天祝健康白牦牛腸道內(nèi)提取并進(jìn)行分離純化，由甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院動物微生物實驗室保存。

1.2 實驗動物

12～13g清潔級昆明系小白鼠，購自蘭州生物制品所實驗動物中心。

1.3 實驗動物分組與處理

12～13g清潔級昆明系小白鼠180只，雌雄各半，隨機分為6組，分別為對照組Ⅰ組、對照組Ⅱ組、枯草芽孢桿菌灌服組（Ⅲ組）、嗜酸乳桿菌灌服組（Ⅳ組）、枯草芽孢桿菌腹腔注射組（Ⅴ組）及嗜酸乳桿菌腹腔注射組（Ⅵ組），每組30只，分別飼養(yǎng)于6個大鼠籠中，對照組Ⅰ組每天給小白鼠灌服0.3 mL的生理鹽水，對照組Ⅱ組每天給小白鼠腹腔注射0.3 mL的生理鹽水，Ⅲ組、Ⅳ組每天分別給小白鼠灌服0.3 mL的枯草芽孢桿菌和嗜酸乳桿菌活菌液（其中枯草芽孢桿菌活菌含量≥3×109CFU/g；嗜酸乳桿菌活菌含量≥3×109CFU/g），Ⅴ組、Ⅵ組每天分別給小白鼠腹腔注射0.3 mL的枯草芽孢桿菌和嗜酸乳桿菌活菌液（其中枯草芽孢桿菌活菌含量≥3×109CFU/g；嗜酸乳桿菌活菌含量≥3×109CFU/g），1次/d，試驗期28d。

1.4 生長指標(biāo)的測定

1.4.1 體重測定 分別于試驗初及試驗第7、14、21、28天對小鼠稱重。試驗期間同時注意觀察小白鼠的日常行為和精神狀態(tài)。

1.4.2 采食量測定 試驗期間每天測量每組小白鼠的采食量。

1.4.3 計算平均日增重、日采食量及料重比 試驗結(jié)束后，對記載的小鼠體重數(shù)、采食量進(jìn)行統(tǒng)計分析，計算出平均日增重、日采食量及料重比。

1.5 臟器系數(shù)測定

試驗結(jié)束后，處死各組小鼠，分別取肝臟、脾臟和腎臟，測量其臟器系數(shù)。

臟器系數(shù)=臟器濕重×小鼠活重×100%

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

實驗數(shù)據(jù)用EXCEL軟件整理，SPSS 2.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析，并用LSD法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果

2.1 不同處理對小白鼠生長性能的影響

由表1可知，Ⅴ、Ⅵ組與Ⅰ、Ⅱ兩對照組幼鼠的平均日增重及料重比差異均不顯著（P＞0.05）；Ⅲ、Ⅳ組與兩對照組均差異極顯著（P＜0.01），其中Ⅲ組幼鼠的日增重及料重比與Ⅴ組比較差異顯著（P＜0.05）。

表1 不同處理組對幼鼠生長性能的影響g

2.2 不同處理對小白鼠各臟器系數(shù)的影響

由表2可知，Ⅴ、Ⅵ組與Ⅰ、Ⅱ兩對照組幼鼠的肝臟系數(shù)、脾臟系數(shù)和腎臟系數(shù)比較均差異不顯著（P＞0.05）；Ⅲ、Ⅳ組與兩對照組比較均差異極顯著（P＜0.01），但Ⅲ組與Ⅳ組比較差異不顯著（P＞0.05）。說明枯草芽胞桿菌及嗜酸乳桿菌對小鼠的臟器系數(shù)有顯著促進(jìn)作用。

表2 不同處理對幼鼠各臟器系數(shù)的影響

3 討論

本實驗通過對小鼠日增重、料重比、臟器指數(shù)的比較，發(fā)現(xiàn)從健康白牦牛腸道內(nèi)分離純化得到的枯草芽胞桿菌及嗜酸乳桿菌均不同程度地提高了幼鼠的生長性能和機體免疫力，且兩種有益菌以灌服的方式均較腹腔注射的方式給藥對體重、臟器指數(shù)及料重比的提高更為明顯，這主要是因為益生菌代謝產(chǎn)生的菌體蛋白和益生素能提高飼料中蛋白含量、促進(jìn)吸收。益生素能定植在小鼠的腸道內(nèi)，改善腸道菌群和腸絨毛、增加小腸隱窩，進(jìn)一步促進(jìn)機體對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，提高飼料轉(zhuǎn)化率［3］；益生菌（嗜酸乳桿菌等）在其代謝過程中產(chǎn)生某些大分子蛋白和小分子物質(zhì)［4］，具有刺激機體提高免疫的功能。另外選擇幼齡小鼠作為研究對象，因其腸道菌群尚未穩(wěn)定，灌服有益菌能顯著提高腸道中的優(yōu)勢菌群數(shù)量，改善菌群結(jié)構(gòu)［5］。

［1］ 江科，李和剛，戴正浩，等.益生菌在動物養(yǎng)殖業(yè)中應(yīng)用的研究進(jìn)展［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2013，40（12）：90-93.

［2］ 貢筱.飼糧中添加枯草芽孢桿菌和糞腸球菌對藍(lán)狐生產(chǎn)性能、消化代謝及免疫功能的影響［D］.北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2014.

［3］ Johnson K C，S C B，Mitchell D J，et al.Probiotics reduce bacterial colonization and gastric inflammation in H.pylori-Infected mice［J］. Digest Dis Sci,2004，49（7）：1095-1102.

［4］ Aryanaa KJ，GrewP.Qualityattributes ofyogurt with Lactobacillus case and various prebiotics［J］.Lwt-food Sci Technol,2007，40（1）：1808-1814.

［5］ 楊家軍，黃克和，趙治平，等.富硒益生菌對小鼠生長、抗氧化力和腸道菌群的影響［J］.食品科學(xué)，2009，30（1）：242-245.

綜述與專論

S823.8+5

A

2095-3887（2015）06-0047-02

10.3969/j.issn.2095-3887.2015.06.015

2015-10-17

甘肅省青年科技基金計劃（1308RJYH084）；甘肅省教育廳2013年甘肅省高等學(xué)校第二批科研項目（2013B-120）；甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院院列專項基金項目（2013GMGY008）

張忠（1979-），男，碩士。

祝艷華（1977-），女，講師，執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師，碩士，主要從事畜牧獸醫(yī)教學(xué)及研究工作。