廖黨金，謝 晶，趙興元，李江凌，葉勇剛，王秋實(shí)，于吉鋒，劉火史鐵，王建元

（1.四川省畜牧科學(xué)研究院，成都 610066；2.涼山半細(xì)毛羊原種場(chǎng)）

奶牛源壞死梭桿菌制劑預(yù)防綿羊腐蹄病試驗(yàn)

廖黨金1，謝 晶1，趙興元2，李江凌1，葉勇剛1，王秋實(shí)1，于吉鋒1，劉火史鐵2，王建元2

（1.四川省畜牧科學(xué)研究院，成都 610066；2.涼山半細(xì)毛羊原種場(chǎng)）

為預(yù)防綿羊腐蹄病，從荷斯坦牛腐蹄病病例中分離壞死梭桿菌并制成制劑。將480只1～5歲的綿羊隨機(jī)分為2組，試驗(yàn)組和對(duì)照組各280只，試驗(yàn)組每只羊頸部側(cè)面皮下注射壞死梭桿菌制劑5 mL，對(duì)照組不注射，試驗(yàn)組綿羊12個(gè)月后再注射1次，觀察并記錄第1次和第2次注射后兩組羊腐蹄病發(fā)病情況。結(jié)果表明：試驗(yàn)前兩組羊腐蹄病發(fā)病率分別為44.58%和40.42%，第1次注射壞死梭桿菌制劑后1年內(nèi)兩組羊的發(fā)病率分別為1.25%和42.92%，第2次注射后1年內(nèi)兩組羊的發(fā)病率分別為0.08%和46.25%。結(jié)果提示奶牛源壞死梭桿菌制劑預(yù)防綿羊腐蹄病效果顯著。

壞死梭桿菌；綿羊；腐蹄?。活A(yù)防

腐蹄病是牛和羊最常見(jiàn)的疾病之一，在奶牛場(chǎng)肢蹄病的發(fā)病率僅次于乳房炎［1］，我國(guó)每年因腐蹄病被迫淘汰的奶牛占淘汰總數(shù)的15%～30%，給奶牛業(yè)造成經(jīng)濟(jì)損失達(dá)2 250萬(wàn)元［2-5］。羊腐蹄病主要發(fā)生于飼養(yǎng)密度較大的羊場(chǎng)。據(jù)報(bào)道［6-7］，該病在云南的發(fā)病率5%～10%，沈陽(yáng)發(fā)病率40.6%，甘肅發(fā)病率46.5%。羊腐蹄病的預(yù)防和治療常采用1%～2%濃度的硫酸銅溶液浸泡奶?；蜓蛱悴浚瑢?duì)預(yù)防羊腐蹄病有較好效果。羊發(fā)生腐蹄病后，根據(jù)病變部位是否化膿而確定治療方法，對(duì)未化膿且僅出現(xiàn)紅、腫、熱痛癥狀的病例采用局部涂魚(yú)石脂軟膏及注射抗生素等；對(duì)化膿病例采用外科方法開(kāi)放性排膿，然后沖洗，或用高錳酸鉀溶液清洗，再用抗生素治療，但一般需要多次治療，費(fèi)時(shí)費(fèi)力且成本較高。

引起奶牛和羊腐蹄病的因素較多，如遺傳、營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境衛(wèi)生、飼養(yǎng)管理等，如不按時(shí)修蹄或修蹄不正確、牧場(chǎng)或圈舍地面有尖銳物或帶刺植物等，導(dǎo)致奶?；蜓虻奶悴繐p傷而感染病原菌，一般為同時(shí)感染多種病原菌，如在黑龍江奶牛腐蹄病病例中分離到壞死梭桿菌、鏈球菌、大腸埃希氏桿菌、沙門氏菌、糞彎曲桿菌、化膿棒狀桿菌、梭菌、酵母菌和不同的球菌等［8］，在遼寧某奶牛場(chǎng)分離到壞死梭桿菌［9］，在四川分離到大腸桿菌、壞死梭桿菌、普通變形桿菌、奇異變形桿菌等［10］。筆者等嘗試將壞死梭桿菌制成制劑來(lái)預(yù)防綿羊腐蹄病，現(xiàn)將試驗(yàn)情況報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 壞死梭桿菌制劑的制備

采集奶牛場(chǎng)荷斯坦牛腐蹄病病料，厭氧條件保存并帶回實(shí)驗(yàn)室。壞死梭桿菌的培養(yǎng)、分離、鑒定等參照文獻(xiàn)方法［10-11］。將分離的壞死梭桿菌在腦心浸液培養(yǎng)基中厭氧培養(yǎng)，然后在培養(yǎng)液中加入適量甲醛等制成制劑，經(jīng)測(cè)定其溶液內(nèi)的壞死梭桿菌被滅活。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

在某綿羊場(chǎng)選擇480只1～5歲羊，隨機(jī)分為2組，試驗(yàn)組和對(duì)照組各240只，在試驗(yàn)期內(nèi)按常規(guī)方法飼養(yǎng)。

1.3 注射方法

第1年5月份，試驗(yàn)組每只羊頸部側(cè)面皮下一次注射壞死梭桿菌制劑5 mL，第2年5月份按相同方法注射第2次。對(duì)照組均不注射該制劑。

1.4 腐蹄病發(fā)病率統(tǒng)計(jì)及臨床觀察

查閱480只綿羊試驗(yàn)前1年內(nèi)腐蹄病的發(fā)病記錄，確定其發(fā)病率。注射后觀察并記錄各組羊只的臨床反應(yīng)和注射部位變化情況，1年內(nèi)患2次或2次以上腐蹄病者，即計(jì)為1只患病羊。

2 結(jié)果與分析

2.1 試驗(yàn)前羊腐蹄病發(fā)病率

根據(jù)試驗(yàn)前1年的病例記錄，480只參試綿羊中有204只患腐蹄病，發(fā)病率42.5%，且有47只在1年內(nèi)重復(fù)發(fā)病2～3次。其中，試驗(yàn)組共有患病羊107只，發(fā)病率44.58%；對(duì)照組共有患病羊97只，發(fā)病率40.42%，見(jiàn)表1。

表1 壞死梭桿菌制劑預(yù)防羊腐蹄病效果

2.2 注射壞死梭桿菌制劑后羊腐蹄病發(fā)病率

試驗(yàn)組第1次注射壞死梭桿菌制劑后有3只羊患腐蹄病，且均發(fā)病1次，發(fā)病率1.25%；對(duì)照組有103只患腐蹄病，發(fā)病率42.92%，其中17只羊重復(fù)發(fā)病2次，5只羊重復(fù)發(fā)病3次。試驗(yàn)組第2次注射該制劑后有2只羊患腐蹄病，且均發(fā)病1次，發(fā)病率0.08%；對(duì)照組有111只患腐蹄病，發(fā)病率46.25%，其中14只羊重復(fù)發(fā)病2次，6只羊重復(fù)發(fā)病3次，見(jiàn)表1。

2.3 臨床觀察

試驗(yàn)組第1次注射壞死梭桿菌制劑后，240只試驗(yàn)羊注射部位皮下均出現(xiàn)小拇指至雞蛋大小包塊，注射后1個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月內(nèi)分別有10.41%、36.67%、82.08%的注射羊包塊消失，6個(gè)月后，未消失的包塊在羊注射部位皮下形成小拇指大小的硬結(jié)節(jié)，未觀察到其對(duì)羊采食、活動(dòng)等行為有明顯影響。除此之外，該制劑對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物無(wú)不良影響。

3 討論

首次注射壞死梭桿菌制劑后1年內(nèi)，試驗(yàn)組羊腐蹄病發(fā)病率比試驗(yàn)前降低43.33個(gè)百分點(diǎn)，對(duì)照組則比試驗(yàn)前一年增加2.5個(gè)百分點(diǎn)。第2次注射該制劑后1年內(nèi)，試驗(yàn)組羊腐蹄病發(fā)病率比試驗(yàn)前降低44.50個(gè)百分點(diǎn)，比首次注射后降低1.17個(gè)百分點(diǎn)，對(duì)照組則比試驗(yàn)前增加5.83個(gè)百分點(diǎn)，比首次注射后增加3.33個(gè)百分點(diǎn)。表明注射該制劑后試驗(yàn)組預(yù)防腐蹄病效果顯著，但該制劑預(yù)防綿羊腐蹄病的具體病原及其預(yù)防機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

奶牛腐蹄病一般為多種病原感染［9，12］，羊腐蹄病也是多種病原［13-15］。本試驗(yàn)采用奶牛源壞死梭桿菌制劑預(yù)防綿羊腐蹄病的效果顯著，這與采用奶牛源主要病原的大白兔高免血清治療綿羊腐蹄病的效果一致。表明壞死梭桿菌可能也是綿羊腐蹄病的主要致病菌，當(dāng)預(yù)防感染壞死梭桿菌后，綿羊可通過(guò)自身抵抗力來(lái)抑制其他腐蹄病的病原感染；也有可能綿羊壞死梭桿菌與其他病原有交叉保護(hù)或其他作用等，有待進(jìn)一步研究。

在本試驗(yàn)之前，該羊場(chǎng)預(yù)防綿羊腐蹄病一般在高發(fā)季節(jié)用硫酸銅溶液浴蹄來(lái)降低發(fā)病率，但在一些養(yǎng)羊場(chǎng)發(fā)病率仍然較高。多數(shù)羊腐蹄病病例一次治療很難治愈，一般需要多次治療且易重復(fù)患?。?6-17］，本方法經(jīng)一次注射即取得了較好預(yù)防效果，值得大面積推廣應(yīng)用。

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A

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2015-07-21

四川省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（2013NZ0035，2014NZ0032）；國(guó)家農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項(xiàng)目（2014A06）；四川省畜牧科學(xué)研究院基本科研專項(xiàng)資金（SASA2013A01）；國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（2012BAD12B03）；現(xiàn)代農(nóng)業(yè)奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金資助（CARS-37）

廖黨金（1956-），男，研究員。研究方向：生物技術(shù)與獸醫(yī)寄生蟲(chóng)病防控。