曾建濤 李泉 楊丹
(1.重慶市長壽區(qū)人民醫(yī)院;2.重慶市長壽區(qū)中醫(yī)院,重慶 401220)
梅毒螺旋體是一種密螺旋體,感染人體可引起梅毒。檢測梅毒螺旋體的方法很多,血清學(xué)實驗仍然是最主要的方法[1]。其中梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)特異性和敏感性較高[2]。但TPPA試驗也存在一定的假陽性率,筆者于2014年7月收治1例TPPA 試驗假陽性的病例,現(xiàn)報告如下。
1.1 臨床資料 患者,男,44歲,主訴:梅毒復(fù)診?;颊?年前在外院診斷為梅毒。
1.2 儀器與試劑(1)TPPA 試劑由富士瑞比歐株式會社生產(chǎn),自身抗體譜試劑由歐蒙公司提供。(2)IgG、IgA、IgM、補體C3,C4、RF、ASO 和CRP 應(yīng)用羅氏全自動生化分析儀檢測。
1.3 實驗方法 TPPA 試驗和自身抗體譜檢測嚴(yán)格按照試劑說明書操作。吸收試驗方法為:取未致敏粒子0.95mL至小試管中,加入患者血清50μL混勻,室溫放置30min。離心5min后,吸取上清液進行對倍稀釋。最后在第3 孔加入未致敏粒子25μL,第4孔加入致敏粒子25μL,振蕩混勻,室溫靜置2h后觀察結(jié)果。
TPPA 試驗未致敏孔顯示為陽性,致敏孔顯示為弱陽性(圖1),此結(jié)果表明TPPA 試驗受到干擾,結(jié)果為假陽性。吸收試驗結(jié)果顯示未致敏孔和致敏孔均為陰性(圖1),確定該患者TPPA 試驗為陰性。
圖1 TPPA 試驗結(jié)果
為研究TPPA 假陽性的原因,筆者對常見的干擾因素進行了分析?;颊哐錓gG 10.57g/L,IgA 2.08g/L、IgM 3.23g/L、補體C3 1.13g/L和補體C4 0.45g/L;RF 14.00IU/mL,ASO 41IU/mL,CRP 1.00mg/L;其中除IgM 升高外,其他結(jié)果均正常。檢測吸收試驗后的血清,換算后IgM 為3.19g/L,無明顯變化,表明干擾并非由IgM 引起。為排除自身免疫抗體的干擾,應(yīng)用免疫印跡法對患者血清進行自身抗體譜的檢測,結(jié)果均為陰性。
梅毒是由梅毒螺旋體引起的一種性傳播疾病,TPPA 是針對梅毒特異性抗體的試驗,其原理為梅毒特異性抗體與包被在明膠顆粒上純化的梅毒螺旋體Nichols株發(fā)生凝集反應(yīng)。
明膠顆粒是直徑3 μm 左右的球體。相比TPHA 試驗中用紅細(xì)胞做載體,明膠顆粒穩(wěn)定性更好,免疫原性較弱,可減少非特異性反應(yīng)的發(fā)生。
目前對引起明膠顆粒非特異性反應(yīng)的物質(zhì)并不十分清楚[3],文獻[4-5]報道的常見干擾因素有RF、Ds-DNA 和免疫球蛋白制劑等。本文檢測了常見的干擾因素,仍未找到真正原因。未找到干擾因素時可通過未致敏粒子提供的抗原表位對干擾物質(zhì)進行吸收試驗,從而得到準(zhǔn)確的實驗結(jié)果。
在明膠粒子凝集反應(yīng)的其他試驗,包括肺炎支原體抗體、HIV 抗體等的檢測中,也存在類似的干擾。在臨床試驗中必須重視未致敏孔結(jié)果的觀察,才可避免錯誤報告的發(fā)生。
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