賈 方，王彥軍，朱 琳，俞天虹，孫建輝

（常州市第一人民醫(yī)院心內(nèi)科，江蘇常州213003）

冠心病患者血清中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白的表達(dá)及其臨床意義

賈 方，王彥軍，朱 琳，俞天虹，孫建輝

（常州市第一人民醫(yī)院心內(nèi)科，江蘇常州213003）

目的：探討冠心病患者血清中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（neutrophi1 ge1atinase-associated 1ipoca1in，NGAL）的表達(dá)及臨床意義。方法：選取因胸悶、胸痛入住心內(nèi)科患者110例，根據(jù)冠脈造影結(jié)果及臨床表現(xiàn)分為急性冠脈綜合征（ACS）組33例、穩(wěn)定型心絞痛（SAP）組32例和對(duì)照組45例。比較3組間的臨床資料、血清NGAL水平，分析NGAL與冠心病相關(guān)性，并觀察其與冠脈病變支數(shù)及Gensini積分的關(guān)系。結(jié)果：ACS組、SAP組血清NGAL水平均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），ACS組血清NGAL水平明顯高于SAP組（P＜0.05）。隨著冠脈病變支數(shù)增加，冠心病患者血清NGAL水平增高（F=17.468，P＜0.05），且與Gensini積分呈正相關(guān)（r=0.327，P＜0.01）。簡(jiǎn)單及偏相關(guān)分析均顯示，血清NGAL水平與冠心病呈正相關(guān)性；多因素Logistic回歸分析顯示，NGAL是冠心病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（0R=1.059，P＜0.01）。結(jié)論：NGAL不僅能對(duì)粥樣斑塊穩(wěn)定性具有提示性，且與冠脈病變程度呈正相關(guān)，可作為冠心病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白；冠心??；斑塊穩(wěn)定性；Gensini積分

動(dòng)脈粥樣硬化的慢性炎癥過(guò)程是冠心病的病理基礎(chǔ)，而中性粒細(xì)胞參與這一炎癥反應(yīng)。中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（neutrophi1 ge1atinaseassociated 1ipoca1in，NGAL）被認(rèn)為是中性粒細(xì)胞活化和腎功能衰竭的標(biāo)志物，并且與胰島素抵抗和動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)［1］?；A(chǔ)研究表明NGAL能調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，影響基質(zhì)金屬蛋白酶活性，調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞能量代謝，在冠心病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用［2］。本研究擬通過(guò)測(cè)定不同類(lèi)型冠心病患者的血清NGAL水平，探討NGAL水平與冠心病之間的關(guān)系，為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 病例及分組

選取本院2014年2月至11月因胸悶、胸痛住院并行冠脈造影患者110例，根據(jù)臨床表現(xiàn)和冠脈造影結(jié)果分為急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）組33例、穩(wěn)定型心絞痛（stab1e angina pectoris，SAP）組32例和對(duì)照組（冠脈造影正常或冠脈狹窄＜50％）45例。同時(shí)，將65例冠心病患者根據(jù)冠脈造影結(jié)果再進(jìn)一步分為1支病變組（27例）、2支病變組（16例）和3支病變組（22例）。冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)格按照2012年美國(guó)心臟協(xié)會(huì)/美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)（AHA/ACC）關(guān)于冠心病的診斷標(biāo)準(zhǔn)篩選病例，并且冠脈造影證實(shí)至少有1支冠狀動(dòng)脈的狹窄≥50％。SAP和ACS診斷標(biāo)準(zhǔn)：均符合美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)（ACC）和美國(guó)心臟病協(xié)會(huì)（AHA）的標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：感染性疾病、自身免疫性疾病、嚴(yán)重心力衰竭、腫瘤及肝腎疾病患者。

1.2 方法

1.2.1 一般資料的收集 所有入選患者均記錄性別、年齡、吸煙史、高血壓病史、糖尿病史，測(cè)量身高、體質(zhì)量，計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)（BMI）。

1.2.2 血樣采集 入選患者均禁食8～10 h，次日清晨空腹抽取外周靜脈血進(jìn)行三酰甘油、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、纖維蛋白原（Fg）及C-反應(yīng)蛋白等指標(biāo)檢測(cè)；同時(shí)收集2 mL靜脈血，室溫半小時(shí)后4 000 r/min離心3 min，吸取血清置于-80℃冰箱保存直至使用。血清NGAL通過(guò)ELISA（丹麥BioPorto公司產(chǎn)品）測(cè)定，檢出限為0.1 ng/mL。

1.2.3 冠脈血管病變程度評(píng)定 根據(jù)美國(guó)心臟病協(xié)會(huì)規(guī)定的冠狀動(dòng)脈血管圖像積分分段評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，采用Gensini積分系統(tǒng)［3］對(duì)冠脈血管病變程度進(jìn)行定量評(píng)定：狹窄≤25％為1分，26％～50％為2分，51％～75％為4分，76％～90％為8分，91％～99％為16分，100％為32分；將病變部位乘以相應(yīng)系數(shù)：左主干病變×5；左前降支近段×2.5，中段得分× 1.5，遠(yuǎn)段得分×1；第一對(duì)角支×1；第二對(duì)角支× 0.5；左回旋支近段×2.5，中段得分×1.5，遠(yuǎn)段和后降支均×1，后側(cè)支×0.5；右冠狀動(dòng)脈近、中、遠(yuǎn)段和后降支均×1。將各分支積分相加得出每例患者冠脈病變程度的Gensini積分。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以±s表示，非正態(tài)分布的計(jì)量資料以中位數(shù)M（Q1，Q3）表示，計(jì)數(shù)資料以百分比表示。計(jì)量資料采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，方差不齊性采用Kruska1-Wa11is H檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。兩變量間關(guān)系采用Spearman相關(guān)分析。二分類(lèi)因變量回歸分析采用多因素Logistic回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般臨床資料比較

各組間一般臨床資料比較顯示，對(duì)照組、SAP組和ACS組年齡、性別、BMI、吸煙、高血壓、糖尿病、三酰甘油、總膽固醇、HDL-C和Fg間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；3組間LDL-C、C反應(yīng)蛋白和Gensini積分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

2.2 各組血清NGAL濃度的比較

對(duì)照組、SAP組和ACS組血清NGAL濃度分別為（26.92±10.67）ng/mL、（34.05±15.10）ng/mL和（41.72±15.44）ng/mL，3組間總體差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=11.372，P＜0.05）；ACS組、SAP組血清NGAL濃度均明顯高于對(duì)照組（t值分別為4.759和2.273，P＜0.05），ACS組血清NGAL濃度明顯高于SAP組（t=2.278，P＜0.05）。

2.3 冠脈病變程度與血清NGAL濃度的關(guān)系

按冠脈血管病變支數(shù)分組分析結(jié)果顯示，隨著血管病變支數(shù)增加，血清NGAL濃度增加，1支病變組血清NGAL濃度為（28.01±8.85）ng/mL，2支病變組為（38.74±15.09）ng/mL，3支病變組為（49.55±14.73）ng/mL，3組間總體差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=17.468，P＜0.05）；3支病變組、2支病變組血清NGAL濃度均明顯高于1支病變組（t值分別為5.904和2.677，P＜0.01），3支病變組血清NGAL濃度明顯高于2支病變組（t=2.590，P＜0. 05）。此外，血清NGAL濃度與Gensini積分呈正相關(guān)（r=0.327，P＜0.01）。

表1 各組患者臨床基本資料的比較

2.4 血清NGAL濃度與冠心病發(fā)生的簡(jiǎn)單及偏相關(guān)分析

兩者之間的簡(jiǎn)單相關(guān)分析顯示，血清NGAL濃度與冠心病發(fā)生呈正相關(guān)（r=0.361，P＜0.05）；并且在控制性別、年齡、高血壓、BMI、糖尿病、吸煙、三酰甘油、總膽固醇、LDL-C、HDL-C、Fg、C反應(yīng)蛋白等入選因素后，兩者之間仍具有正相關(guān)性（r=0.293，P＜0.05）。

2.5 多因素Logistic回歸分析

以冠心病是否發(fā)生（1=是，0=否）為因變量，年齡、性別、BMI、吸煙、高血壓、糖尿病、三酰甘油、總膽固醇、HDL-C、LDL-C、Fg、C反應(yīng)蛋白和NGAL為自變量，進(jìn)行Logistic回歸分析。結(jié)果顯示NGAL可能是冠心病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（0R=1.059，P＜0.01）。見(jiàn)表5。

表5 冠心病多重危險(xiǎn)因素Logistic回歸分析

3 討論

炎癥參與介導(dǎo)了動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。急性冠脈綜合征的發(fā)生與斑塊的不穩(wěn)定性和血栓形成密切相關(guān)，而炎癥反應(yīng)在不穩(wěn)定斑塊的形成、演變過(guò)程中具有至關(guān)重要的作用。研究表明NGAL可能在炎癥方面起調(diào)節(jié)作用［4］。NGAL正常表達(dá)于中性粒細(xì)胞、肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等。血清NGAL水平增加與動(dòng)脈粥樣硬化、腦卒中、腎衰竭等系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)相關(guān)。Hemdah1等［5］通過(guò)低氧誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化模型，發(fā)現(xiàn)NGAL在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊尤其是高蛋白水解活性區(qū)域表達(dá)升高，表明NGAL可能對(duì)斑塊的發(fā)生、發(fā)展和斑塊的不穩(wěn)定性具有重要作用。Soy1u等［6］對(duì)47例非ST段抬高型急性冠脈綜合征（NSTE-ACS）患者入院時(shí)的血清NGAL以及冠脈造影結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)與造影結(jié)果正常的對(duì)照組相比，NSTEACS患者血清NGAL水平與Gensini積分以及危險(xiǎn)分層評(píng)估（Grace評(píng)分）呈正相關(guān)。在本研究中，我們對(duì)比了冠心病不同亞組（ACS組和SAP組）和對(duì)照組患者血清中NGAL濃度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ACS組血清NGAL水平較SAP組和對(duì)照組明顯升高，表明NGAL對(duì)粥樣斑塊不穩(wěn)定性有一定的提示性。

NGAL對(duì)粥樣斑塊穩(wěn)定性的影響主要與其對(duì)MMP-9活性的調(diào)節(jié)有關(guān)。粥樣斑塊結(jié)構(gòu)的突然改變?nèi)绨邏K內(nèi)出血、低氧狀態(tài)等可誘導(dǎo)MMP-9表達(dá)的上調(diào)，現(xiàn)已證實(shí)，MMP-9是造成斑塊不穩(wěn)定的主要酶，是影響斑塊穩(wěn)定性的主要因素［7］。NGAL能以二硫鍵與MMP-9結(jié)合，降低金屬蛋白酶抑制劑1（TIMP-1）的抑制作用，防止MMP-9被降解，延長(zhǎng)其蛋白水解時(shí)間，使斑塊內(nèi)膠原分解過(guò)多［8］。NGAL、MMP-9的表達(dá)和形成復(fù)合物的調(diào)節(jié)影響細(xì)胞外基質(zhì)的降解，繼而影響纖維帽的穩(wěn)定性。持續(xù)的血管損傷、炎性刺激以及應(yīng)激導(dǎo)致NGAL的大量表達(dá)［1］，使MMP-9的活性增強(qiáng)，造成斑塊不穩(wěn)定性增加，從而導(dǎo)致不穩(wěn)定心絞痛或心肌梗死等急性心血管事件的發(fā)生。

本研究中，我們還將冠心病患者按冠脈病變受累支數(shù)分組，發(fā)現(xiàn)隨著病變支數(shù)增加，血清NGAL濃度也相應(yīng)增加，并且NGAL與評(píng)價(jià)冠脈病變程度的指標(biāo)Gensini積分呈正相關(guān)。由此，我們可以認(rèn)為NGAL不僅能對(duì)冠心病患者粥樣斑塊穩(wěn)定性具有提示性，且與冠脈病變的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。Cheng等［9］對(duì)768例因急性冠脈綜合征或穩(wěn)定型心絞痛行冠脈介入診療患者的一項(xiàng)隨訪研究發(fā)現(xiàn)，血漿NGAL/MMP-9水平與主要心血管不良事件呈正相關(guān)。Danie1s等［10］對(duì)1 393名無(wú)心血管疾病病史的社區(qū)居民進(jìn)行平均11年的隨訪，結(jié)果表明NGAL水平與高致死率和高風(fēng)險(xiǎn)的心血管事件明顯相關(guān)，并且獨(dú)立于其他傳統(tǒng)的心血管疾病危險(xiǎn)因素以及患者腎功能狀態(tài)。我們的研究對(duì)NGAL與冠心病的簡(jiǎn)單和偏相關(guān)分析，均發(fā)現(xiàn)NGAL與冠心病發(fā)生密切相關(guān)；以冠心病發(fā)生為因變量，年齡、性別、吸煙、高血壓、糖尿病、BMI、三酰甘油、總膽固醇、HDL-C、LDLC、Fg、C反應(yīng)蛋白和NGAL為自變量，行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示血清NGAL水平是冠心病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。NGAL在心血管疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著復(fù)雜的調(diào)節(jié)作用?，F(xiàn)有實(shí)驗(yàn)研究趨于支持NGAL具有負(fù)性調(diào)節(jié)炎癥細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)、穩(wěn)定細(xì)胞能量代謝的功能［11-12］；而由于炎癥持續(xù)存在，NGAL和MMP-9復(fù)合物形成，可使膠原分解過(guò)多，引起斑塊的不穩(wěn)定［8］。然而現(xiàn)有NGAL在心血管疾病發(fā)生發(fā)展中作用機(jī)制的研究仍較少，NGAL的功能與活性尚有待進(jìn)一步證實(shí)。

綜上所述，血清NGAL水平與冠脈粥樣斑塊穩(wěn)定性以及冠脈病變程度密切相關(guān)，且獨(dú)立于其他傳統(tǒng)的心血管疾病危險(xiǎn)因素與冠心病發(fā)生呈正相關(guān)，可作為臨床冠心病以及高?；颊卟∏樵u(píng)估和預(yù)測(cè)斑塊不穩(wěn)定性的一個(gè)重要指標(biāo)。

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Expression of serum NGAL in coronary heart disease patients and its clinical significance

JIA Fang，WANG Yan-jun，ZHU Lin，YU Tian-hong，SUN Jian-hui
（Department of Cardio1ogy，the First Peop1e′s Hospita1 of Changzhou，Changzhou Jiangsu 213003，China）

Objective：To investigate the expression of serum neutrophi1 ge1atinase-associated 1ipoca1in（NGAL）in patients with coronary heart disease（CHD），and to eva1uate its c1inica1 va1ue.Methods：A tota1 of 110 enro11ed patients were divided into acute coronary syndrome（ACS）group（33 cases），stab1e angina pectoris（SAP）group（32 cases）and contro1 group（45 cases）according to the c1inica1 manifestation and angiographic resu1ts.Serum NGAL 1eve1s measured by enzyme 1inked immunosorbent assay（ELISA）were compared among the groups.The corre1ation between serum NGAL 1eve1 and CHD was ana-1yzed.The association of NGAL with the number of diseased vesse1s and Gensini score were studied.Results：The serum NGAL 1eve1s in ACS group and SAP group were higher than that in contro1 group（P＜0.05）.And serum NGAL 1eve1 was significant1y higher in ACS group compared to SAP group（P＜0.05）. Statistica11y significant corre1ations were observed between NGAL 1eve1 and the number of diseased vesse1s（F=17.468，P＜0.05）and Gensini score（r=0.327，P＜0.01）. Simp1e and partia1 corre1ation ana1ysis showed that serum NGAL 1eve1 was positive1y corre1ated with CHD.In addition，mu1tivariate 1ogistic regression ana1ysis revea1ed that NGAL was an independent risk factor of CHD（0R=1.059，P＜0.01）. Conclusion：Serum NGAL 1eve1 was positive1y corre1ated with atherosc1erotic p1aque stabi1ity and coronary 1esions severity in patients with CHD.NGAL may serve as an independent risk factor of CHD.

neutrophi1 ge1atinase-associated 1ipoca1in；coronary heart disease；p1aque stabi1ity；Gensini score

R541.4

A

1671-7783（2015）06-0508-04

10.13312/j.issn.1671-7783.y150181

2015-08-14 ［編輯］ 何承志

賈方（1984—），女，河南平頂山人，主治醫(yī)師，博士，主要從事動(dòng)脈粥樣硬化性疾病病理生理學(xué)機(jī)制及干預(yù)治療研究。