葛京張耀紅++高倩++徐建華++妥志利++趙士超

細(xì)鱗魚，身材纖細(xì)，頭圓、嘴寬、身披豹紋，幾乎看不見有鱗片，是有名的冷水經(jīng)濟(jì)魚類，但在人工繁育期間孵化率卻不高，有的地方甚至達(dá)不到50%。胚胎的發(fā)育過程歷來是極為細(xì)致復(fù)雜的，特別是敏感期階段，稍有動作便會導(dǎo)致受精卵的大量死亡。而在非敏感時(shí)期，適時(shí)做些改變，如消毒、挑揀死卵等，不僅不影響受精卵正常發(fā)育，還能優(yōu)化孵化環(huán)境，提高孵化率。

為了提高其孵化率，我們在淶源縣昌源漁場，設(shè)計(jì)了細(xì)鱗魚受精卵不同發(fā)育階段隨水流攪動、上下翻滾等震動刺激的敏感性試驗(yàn)，以期發(fā)現(xiàn)細(xì)鱗魚受精卵在不同胚胎發(fā)育階段的敏感性差異，對規(guī)模生產(chǎn)產(chǎn)生積極的指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

1.1 材料

孵化用水為地下冷泉水，水溫9～9.5 ℃，DO 6.5～7.5 mg/L。試驗(yàn)魚卵為漁場內(nèi)自培的5齡親魚進(jìn)行人工繁殖獲得。親魚在2015年3月底陸續(xù)開始激素注射誘導(dǎo)，把4月12日采卵擠精后干法受精獲得的受精卵4.5萬粒，作為試驗(yàn)用卵。

1.2 方法

備用受精卵置于設(shè)有流水的大玻璃缸中，并用帶網(wǎng)眼塑料筐和鐵架固定。每2 h進(jìn)行顯微鏡觀察，待50%以上的受精卵進(jìn)入某一發(fā)育階段時(shí)，隨機(jī)撈取受精卵若干，挑選外觀發(fā)育正常魚卵500粒以上，在塑料盆中攪拌刺激后放入帶網(wǎng)眼的塑料筐中，塑料筐置于有微流水的水渠內(nèi)的鐵架子上，水渠水面寬50 cm，水深60 cm，保持卵粒距離水面10 cm。攪拌時(shí)用手沿盆邊順時(shí)針勻速、輕柔地?cái)嚢?0次，逆時(shí)針同樣動作攪拌20次，幅度以魚卵稍微離開盆底做旋渦狀運(yùn)動。隨后用手輕微上下撩動盆邊的水，使魚卵小幅度上下翻轉(zhuǎn)，同樣20次。

試驗(yàn)從4月12日晚8點(diǎn)開始，采樣前先對受精卵進(jìn)行顯微鏡觀察，然后挑選、攪拌，刺激后把受精卵放入水渠中的塑料筐，24 h后計(jì)算死亡量，一直持續(xù)到發(fā)眼卵出現(xiàn)為止，根據(jù)棄卵率[1]（死卵量與總卵數(shù)的百分比）得出不同發(fā)育階段對外界環(huán)境刺激的敏感性差異。

2 結(jié)果

資料表明，虹鱒、大銀魚[2]、七彩鮭[3]等冷水魚，在不同胚胎發(fā)育階段對外界刺激的敏感性不同。從試驗(yàn)來看，細(xì)鱗魚受精卵對外界環(huán)境刺激比較敏感，且在不同發(fā)育階段表現(xiàn)出明顯的差異，棄卵率波動較大，試驗(yàn)結(jié)果見表1。

3 討論

試驗(yàn)表明，細(xì)鱗魚的胚胎發(fā)育對外界刺激存在明顯的敏感期。在不同發(fā)育階段，棄卵率的高低表現(xiàn)為不同程度的敏感性。細(xì)鱗魚卵受精后吸水靜置時(shí)，處于膨脹階段，對于外界刺激較敏感，棄卵率較高；卵裂期、囊胚期敏感性一般，棄卵率較低，狀態(tài)較穩(wěn)定，可以進(jìn)行消毒、挑卵或者短途運(yùn)輸?shù)?；到囊胚后期、原腸階段，棄卵率升高，對外界水流刺激較敏感，直至胚孔封閉、腦部分化階段，棄卵率急速升高，大大超過50%，此階段建議不對魚卵采取任何打擾；隨后，尾牙、胸鰭、眼晶體、尾鰭開始分化，棄卵率大大走低，此階段如果有必要，如長水霉后可以進(jìn)行消毒、挑卵等，從而降低經(jīng)濟(jì)損失；到了發(fā)眼期，對外界刺激基本無反應(yīng)，狀態(tài)穩(wěn)定，受精卵算是到了“安全期”，挑卵、消毒、運(yùn)輸?shù)葲]有問題。

試驗(yàn)期間，由于塑料盆多，每個(gè)裝的魚卵極少，且有微流水不斷沖洗，沒有滋生水霉，沒有使用任何藥物，避免了試驗(yàn)誤差。但由于親魚培育不到位，一開始的受精卵質(zhì)量差些，表現(xiàn)為與往年相比，個(gè)體小，色澤暗淡，吸水靜置后死卵較多，大玻璃缸中的備用試驗(yàn)用卵目測成活率不到50%，等等。這些可能對試驗(yàn)數(shù)據(jù)有些影響，如棄卵率普遍要高些，如發(fā)眼后水流震蕩刺激還有2.39%的棄卵率等。

另外，受精卵震動刺激后靜置24 h計(jì)數(shù)時(shí)，發(fā)現(xiàn)剛計(jì)完數(shù)，數(shù)出的好卵有部分在一分鐘內(nèi)變白，變白數(shù)量與棄卵率有關(guān)，棄卵率越高時(shí)，好卵變白死亡的數(shù)量越多，猜測與卵本身的敏感期相關(guān)，也可能與受精卵的質(zhì)量有關(guān)，有待于進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]

施德亮.秦嶺細(xì)鱗鮭早期發(fā)育觀察[J].中國水產(chǎn)科學(xué)，2012（7）：557-567

[2] 張耀紅.振動對大銀魚胚胎發(fā)育的影響──大銀魚孵化中敏感期試驗(yàn)觀察[J].漁業(yè)現(xiàn)代化，1997（3）：9-11

[3] 張耀紅.七彩鮭受精卵不同發(fā)育階段對外界刺激的敏感性試驗(yàn)[J].河北漁業(yè)，2015（1）：29，53

（收稿日期：2015-09-22）