謝瑤新，吳偉芬，莊建波

（汕尾皮膚醫(yī)院皮膚科，廣東汕尾516600）

汕尾市中學(xué)生淺部真菌病致病性真菌菌種分析

謝瑤新，吳偉芬，莊建波

（汕尾皮膚醫(yī)院皮膚科，廣東汕尾516600）

目的探討汕尾市中學(xué)生皮膚淺部真菌病病種分布及致病真菌菌種的構(gòu)成。方法 對(duì)1 000例臨床診斷為淺部真菌病的中學(xué)生皮損處取樣，分別進(jìn)行真菌鏡檢和培養(yǎng)，對(duì)培養(yǎng)陽性者進(jìn)一步進(jìn)行菌種鑒定。結(jié)果 1 000份標(biāo)本培養(yǎng)出真菌678份，678份陽性標(biāo)本病種分布為股癬195例（28.71%），體癬143例（21.08%），手足癬253例（37.38%），甲真菌病78例（11.56%），頭癬9例（1.27%）；共分離培養(yǎng)出致病菌株12種，其中紅色毛癬菌237株（34.96%），須癬毛癬菌169株（24.93%），絮狀表皮癬菌2株（0.29%），犬小孢子菌9株（1.33%），鐵銹色孢子菌23株（3.39%），白色念珠菌109株（16.08%），其他酵母樣菌28株（4.13%），曲霉菌21株（3.10%），鏈格孢菌24株（3.54%），青霉菌19株（2.80%），混合感染29例（4.28%）。結(jié)論 汕尾地區(qū)中學(xué)生淺部真菌感染以體股癬最多，致病菌仍以皮膚癬菌為主，但其他類真菌感染有明顯上升趨勢(shì)。

淺部真菌；真菌菌種；培養(yǎng)；鑒定

淺部真菌病是臨床常見的皮膚感染性疾病，近些年來，中學(xué)在校學(xué)生淺部真菌病發(fā)病率不斷提高，已經(jīng)直接影響到中學(xué)生日常的學(xué)習(xí)與生活。既往研究表明，其主要致病真菌以皮膚癬菌為主，但近年來國(guó)內(nèi)外有部分研究報(bào)告提出酵母樣真菌在致病菌中的比例逐年增高［1－5］，說明淺部真菌病的致病菌構(gòu)成已在悄然發(fā)生改變。汕尾市仍缺乏關(guān)于淺部真菌病致病菌菌種鑒定的流行病學(xué)研究，為了解本市中學(xué)生淺部真菌病致病菌的構(gòu)成，指導(dǎo)臨床的合理用藥，筆者于2013年4—8月采集了1 000名在校學(xué)生淺部真菌標(biāo)本，對(duì)陽性標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)及菌種鑒別并對(duì)致病真菌菌種進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

本研究在汕尾市城區(qū)選取兩所中學(xué)，隨機(jī)抽取1 000名臨床診斷考慮淺部真菌病的學(xué)生作為研究對(duì)象。其中男489名，女511名，年齡13～16歲，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照趙辨主編《臨床皮膚病學(xué)》；同時(shí)嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中的規(guī)定采集標(biāo)本分別進(jìn)行真菌鏡檢，以及真菌培養(yǎng)和菌種鑒定。菌種鑒定的判斷標(biāo)準(zhǔn)采用王端禮主編《醫(yī)學(xué)真菌學(xué)——實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)指南》的判斷標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

1.2 方法

1）取材：淺部真菌病的取材標(biāo)本有皮屑、甲屑及斷發(fā)等，皮屑取新鮮皮損的活動(dòng)性邊緣；毛發(fā)標(biāo)本取數(shù)根松動(dòng)的病發(fā)連根拔除，甲標(biāo)本則刮取靠近病甲甲床的碎屑。面部嫩薄皮膚鏡檢標(biāo)本采用透明膠帶法采集，皮膚及附屬器的標(biāo)本用手術(shù)刀刮取，毛發(fā)用鑷子夾拔，甲標(biāo)本用手術(shù)刀刮取或剪刀剪取，注意無菌操作。2）真菌直接鏡檢：采用10%KOH，墨汁染色等方法，在光學(xué)顯微鏡下先用低倍鏡查找菌體，然后換高倍鏡觀察菌體結(jié)構(gòu)，以查到菌絲或孢子為陽性結(jié)果。連查3次均陰性即判定結(jié)果為陰性。3）真菌培養(yǎng)：將所有鏡檢陽性的標(biāo)本取樣接種于5%氯霉素沙堡葡萄瓊脂斜面培養(yǎng)基，25℃恒溫培養(yǎng)，1周后（7、14、21、28 d）觀察菌落生長(zhǎng)情況，第4周末未見生長(zhǎng)者視為陰性。4）菌種鑒定：對(duì)生長(zhǎng)的菌落用馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基、尿素瓊脂培養(yǎng)基、米飯培養(yǎng)基或玉米瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)一步分離培養(yǎng)，根據(jù)菌落情況（大小、形態(tài)、生長(zhǎng)快慢及色素）及鏡下形態(tài)進(jìn)行鑒定。

2 結(jié)果

2.1 直接鏡檢

1 000份臨床送驗(yàn)標(biāo)本進(jìn)行真菌鏡檢，426份檢出真菌菌絲及孢子，陽性檢出率為42.6%。

2.2 真菌培養(yǎng)

1 000份臨床送檢標(biāo)本進(jìn)行真菌培養(yǎng)，共678份標(biāo)本分離培養(yǎng)出真菌，培養(yǎng)陽性率67.8%；其中直接鏡檢陽性的426份標(biāo)本中，335份同時(shí)亦培養(yǎng)出真菌生長(zhǎng)，鏡檢陽性者真菌培養(yǎng)的陽性率為78.6%。

2.3 菌種鑒定

在培養(yǎng)出真菌的678份標(biāo)本中，共分離12種致病真菌。其中皮膚癬菌種包括紅色毛癬菌237株（34.96%），須癬毛癬菌169株（24.93%），絮狀表皮癬菌2株（0.29%），犬小孢子菌9株（1.33%），鐵銹色孢子菌23株（3.39%）；酵母菌兩類，分別為白色念珠菌109株（16.08%），其他酵母樣菌28株（4.13%）；此外還有曲霉菌21株（3.10%），鏈格孢菌24株（3.54%），青霉菌19株（2.80%）；混合感染29例（4.28%），其中紅色毛癬菌和白色念珠菌混合感染19株、紅色毛癬菌和酵母樣菌混合感染10株。見表1。

表1 淺部真菌病病種及病原菌分布情況

2.4 淺部真菌病病種分布

在培養(yǎng)出真菌的678份標(biāo)本所對(duì)應(yīng)的研究對(duì)象中，病種分布情況如下：股癬195例，占28.71%；體癬143例，占21.08%；手足癬253例，占37.38%；甲真菌病78例，占11.56%；頭癬9例，占1.27%。見表1。

3 討論

淺部真菌病是指皮膚、指甲、趾甲和毛發(fā)發(fā)生的真菌感染，是臨床最常見的真菌病，不同的菌種可引起不同的臨床表現(xiàn)［1］。世界范圍內(nèi)淺部真菌病患病率為20%～25%，居高不下［2］。近年來，隨著環(huán)境污染的日益加重，中學(xué)生生活習(xí)慣的改變等因素，中學(xué)生淺部真菌病的發(fā)病率逐漸增高。近年來研究發(fā)現(xiàn)，一些地區(qū)除皮膚癬菌以外的其他致病真菌如念珠菌感染有明顯上升趨勢(shì)，這提示淺部真菌病的病原學(xué)菌種分布不斷在發(fā)生變化。既往研究表明淺部真菌病的發(fā)生與病原菌類別、個(gè)體對(duì)真菌抵抗力及環(huán)境有關(guān)，其病原菌的構(gòu)成與分布往往存在地區(qū)差異［3－5］。因此了解本地區(qū)近年淺部真菌病菌種的構(gòu)成情況對(duì)臨床合理治療具有十分重要的指導(dǎo)意義。

本研究發(fā)現(xiàn)分離出的致病真菌中位居前3位的是：紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、白色念珠菌，這與張雅潔等［3］研究的結(jié)果類似。其他依次是其他酵母樣菌、鏈格孢菌、鐵銹色孢子菌、曲霉菌、青霉菌等。

從病種的分布來看手足癬最多，其次是股癬、體癬、甲真菌病，頭癬相對(duì)較少，這與張偉錚等［4］的研究不太一致，可能與本研究主要對(duì)象為中學(xué)生有關(guān)，中學(xué)生群體由于處于青春期，愛運(yùn)動(dòng)、多汗容易導(dǎo)致手足癬、體股癬多發(fā)，而甲真菌病的發(fā)病率相對(duì)會(huì)低一些。

從表1來看，手足癬主要分離出紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、白色念珠菌及其他酵母樣菌；體股癬主要分離出紅色毛癬菌、須癬毛癬菌及白色念珠菌；頭癬主要分離出犬小孢子菌；甲真菌病主要分離出須癬毛癬菌、白色念珠菌、鏈格孢菌及酵母樣菌。

從本組資料中觀察到，皮膚癬菌仍占主導(dǎo)地位，紅色毛癬菌占首位，須癬毛癬菌次之，酵母菌感染有明顯增加。朱慧蘭等［5］也發(fā)現(xiàn)在淺部真菌病中酵母菌的感染有上升趨勢(shì)。這提示酵母菌感染在某些淺部真菌病致病菌中占優(yōu)勢(shì)，其地位應(yīng)引起重視。這與廣東其他地區(qū)的報(bào)道基本類似。其原因可能與廣東地區(qū)天氣炎熱潮濕，有利于念珠菌及其他酵母樣菌的生長(zhǎng)繁殖有關(guān)。本研究中頭癬致病真菌主要由親動(dòng)物性犬小孢子菌引起，這與近來城鄉(xiāng)生活水平的提高，飼養(yǎng)寵物開始流行，中學(xué)生密切接觸動(dòng)物的概率增高有關(guān)。另外筆者發(fā)現(xiàn)，一些少見真菌如鏈格孢菌的所占比例不小，說明對(duì)于這類少見真菌亦不能忽視。

直接真菌鏡檢不能明確感染真菌的菌種，而不同類型致病真菌所引起的淺部真菌病在臨床治療藥物的選擇時(shí)是有所差異的。如果屬于皮膚癬菌感染則首選伊曲康唑或特比萘芬，而對(duì)于念珠菌及其他酵母樣菌則氟康唑一類的抗真菌藥療效更佳。因而對(duì)于淺部真菌病進(jìn)行真菌培養(yǎng)及菌種鑒定也是十分必要和重要的。根據(jù)菌種選用敏感的抗真菌藥，對(duì)提高療效有十分重要的臨床指導(dǎo)意義。

［1］ 米拉，帕麗達(dá)·阿布利孜，劉旭，等.260例淺部真菌病及致病菌種分析［J］.中國(guó)微生態(tài)雜志，2011，23（7）：637－640.

［2］ 陳春燕，王鵬.宜昌地區(qū)淺部真菌病及真菌分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（8）：1702－1703.

［3］ 張雅潔，張桂梅，熊峰，等.深圳地區(qū)五年皮膚真菌病及致病真菌種類的分布［J］.中華皮膚科雜志，2002，35（10）：401.

［4］ 張偉錚，陳力，趙瑾，等.297例淺部真菌病臨床及病原菌菌種分析［J］.中國(guó)真菌學(xué)雜志，2014，9（1）：28－30.

［5］ 朱慧蘭，肖常青，李振潔，等.201例淺部真菌病及其病原菌分析［J］.中國(guó)真菌學(xué)雜志，2007，2（3）：841－842.

（責(zé)任編輯：劉大仁）

Superficial Pathogenic Fungi in Shanwei High School Students

XIE Yao－xin，WU Wei－fen，ZHUANG Jian－bo
（Department of Dermatology，Shanwei Skin Hospital，Shanwei 516600，China）

ObjectiveTo investigate the distribution and composition of superficial pathogenic fungi in Shanwei high school students.MethodsThe samples were obtained from skin lesions and fungal microscopy and culture were performed in 1 000 high school students with superficial mycoses.The strains were identified and cultured in culture－positive students.ResultsAmong the 1 000 cases，tinea cruris was found in 195（28.71%），tinea corporis in 143（21.08%），tinea manuum and tinea pedis in 253（37.38%），onychomycosis in 78（11.56%），and tinea capitis in 9（1.27%）.A total of 12 pathogenic strains were isolated，including 237 strains of Trichophyton rubrum（34.96%），169 strains of Trichophyton mentagrophyte（24.93%），2 strains of Epidermophyton floccosum（0.29%），9 strains of Microsporum canis（1.33%），23 strains of Rust spore fungus（3.39%），109 strains of Candida albicans（16.08%），28 strains of other yeast－like fungi（4.13%），21 strains of Aspergillus（3.10%），24 strains of Alternaria tenuis（3.54%），and 19 strains of Penicillium（2.80%）.Twenty－nine cases（4.28%）had mixed infection.ConclusionTinea corporis is the commonest type and dermatophytes are the predominant pathogens in Shanwei high school students.However，other fungal infections show an obvious rising trend.

superficial fungi；fungal strains；culture；identification

R195.1

A

1009－8194（2015）11－0024－02

10.13764／j.cnki.lcsy.2015.11.011

2015－02－09

汕尾市醫(yī)藥科技計(jì)劃項(xiàng)目（2013C009）

謝瑤新（1971—），男，本科，主治醫(yī)師，主要從事皮膚病的臨床研究。