王清華

（遼寧省朝陽市第二醫(yī)院，遼寧 朝陽 122000）

芻議病毒感染免疫檢驗(yàn)的研究分析

王清華

（遼寧省朝陽市第二醫(yī)院，遼寧 朝陽 122000）

目的 集中探討采用免疫檢驗(yàn)的方式對病毒感染研究的進(jìn)展情況，從而對病毒所致的疾病更好的進(jìn)行鑒別診斷及其臨床治療。方法 將研究發(fā)展早期與現(xiàn)階段的主流免疫檢驗(yàn)的方式進(jìn)行對比分析，客觀的研究各自優(yōu)勢和不足。結(jié)果 較早期的免疫檢驗(yàn)方法，現(xiàn)階段對病毒研究采用的免疫檢驗(yàn)技術(shù)操作更為簡單、時程更短、靈敏度和特異性均具有明顯優(yōu)勢，同時全程操作危險度低。結(jié)論 目前使用的新技術(shù)較早期相比更加的簡單快捷，同時操作更加的安全，可在臨床中廣泛應(yīng)用。

病毒感染；免疫檢驗(yàn)；研究

1　病毒感染的作用機(jī)制

作為一類寄生類生物，病毒主要利用宿主細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)進(jìn)行自身的復(fù)制，嚴(yán)重的影響了宿主細(xì)胞的正常功能，同時可通過感染體內(nèi)具有免疫功能的細(xì)胞，減少免疫活性物質(zhì)的表達(dá)，降低了在體內(nèi)的正常濃度；也可以通過作用與非免疫應(yīng)答的組織及其器官的途徑對免疫功能造成損傷，是機(jī)體的免疫系統(tǒng)處于一種亞健康狀態(tài)。而病毒對機(jī)體的免疫損傷的機(jī)制很多[1]，①通過激活寄主細(xì)胞抹上的補(bǔ)體及其通過毒作用使病毒編碼的蛋白質(zhì)進(jìn)行表達(dá)，過程中對感染的細(xì)胞進(jìn)行損傷；②特異性的CTL通過對膜抗原的識別，增強(qiáng)自身的損傷性；③通過自身的抗原與抗體發(fā)生符合反應(yīng)對具有路過功能的基膜及其血液流速緩慢的部位造成損傷；④在免疫應(yīng)答的過程中，通過對補(bǔ)體的激活引發(fā)一系列炎性反應(yīng)[2]。

2　早期病毒感染免疫檢驗(yàn)

2.1免疫熒光實(shí)驗(yàn)：采用免疫標(biāo)記，將具有熒光效應(yīng)的元素與已知抗體進(jìn)行結(jié)合，抗原在于抗體結(jié)合的過程中，也具有熒光效應(yīng)，通過在顯微鏡下對熒光物質(zhì)的觀察來鑒別抗原的種屬。因?yàn)椋哂袩晒庑?yīng)的元素也具有與蛋白質(zhì)類抗體結(jié)合的功能，同樣的方法可對抗體進(jìn)行檢測。

2.2血細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn)：血細(xì)胞具有凝聚現(xiàn)象，而病毒感染的紅細(xì)胞的凝集反應(yīng)實(shí)則是病毒表面的抗原與紅細(xì)胞表面抗體結(jié)合的反應(yīng)，結(jié)果是血沉加快。可用于病毒的定量測定。若在抗體存在的情況下，則血沉則減慢，對于病毒的檢出有著一定的靈敏度。而對于其抑制實(shí)驗(yàn)的原理則是因抗體的出現(xiàn)抑制了病毒與紅細(xì)胞的結(jié)合，但是本實(shí)驗(yàn)具有一定的局限性，只針對梅毒病毒感染。

2.3酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：通過對免疫反應(yīng)的特異性和催化作用結(jié)合，利用已知的抗原或者抗體的吸附能力將酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在平板上進(jìn)行，通常采用雙抗夾心法和間接吸附實(shí)驗(yàn)兩種方法。前者應(yīng)用于病毒的早期階段，后者主要應(yīng)用于動物方面的檢測。

2.4中和實(shí)驗(yàn)抗原：分別固定血清-稀釋病毒和固定病毒-稀釋血清的方式對病毒的感染能力進(jìn)行檢測。因病毒在遇到血清后感染能力會降低，可通過對其感染能力的測定來衡量免疫血清的功能。主要用于病毒的種屬及其抗原性的鑒別。

2.5免疫電泳實(shí)驗(yàn)：因?yàn)榭乖c抗體均為帶電體，可通過外界的電場，對不同物質(zhì)速度及其運(yùn)動粒子數(shù)量的統(tǒng)計，來鑒別病毒的種屬。

3　近期病毒感染免疫檢驗(yàn)

3.1發(fā)光免疫實(shí)驗(yàn)：通過將發(fā)光化學(xué)物質(zhì)與機(jī)體免疫相結(jié)合，是一種通過光反應(yīng)來檢測待測物的組分和反應(yīng)濃度的一種微量化，無放射性的新興的檢測方法，且日漸成熟，能夠取代2.1和2.3這兩項(xiàng)相關(guān)免疫檢查。同時，本方法具有無毒無害的特點(diǎn)，并且耗時短可在安全的環(huán)境下進(jìn)行操作。

3.2重組免疫實(shí)驗(yàn)：對于HCV和HIV的檢測有很高的臨床價值，前者因有非結(jié)構(gòu)性、結(jié)構(gòu)性和核心成分的三種抗原，較其他相對復(fù)雜。此法較較2.3可將不同抗原以橫線式的方式于硝酸和纖維素膜的橫條相結(jié)合，置于反應(yīng)盤后，若出現(xiàn)底物顯色反應(yīng)則說明待測血清中有針對性的抗原成分。

3.3膠體金技術(shù)：該技術(shù)是將膠體金標(biāo)記在抗原抗體反應(yīng)的一種新興的技術(shù)。標(biāo)志物是在氯金酸在還原劑的作用下聚集而成，若于蛋白質(zhì)結(jié)合則會影響其藥物活性。將其與其他物質(zhì)將誒和則會發(fā)生其特有的生理反應(yīng)，目前廣泛的應(yīng)用于很多領(lǐng)域，臨床上多用于HIV和AFP的探查。

4　結(jié) 果

將兩個不同時期的檢驗(yàn)過程中的涉及到的操作、耗時，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的靈敏度及其特異度兼并全程操作的危險系數(shù)進(jìn)行對比，結(jié)果顯示，現(xiàn)階段采用的免疫檢驗(yàn)技術(shù)較早期方法具有操作更加簡單、時程短、靈敏度和特異性高，同時危險性低，見表1。

表1　不同時期檢驗(yàn)操作比較

5　討 論

對于病毒感染的檢查，目前臨床上多采用免疫檢驗(yàn)的方式進(jìn)行鑒別診斷。而隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，免疫檢驗(yàn)的技術(shù)也在不斷地更新，本次實(shí)驗(yàn)將早期應(yīng)用于病毒檢驗(yàn)的免疫學(xué)方法與目前新興的方法進(jìn)行優(yōu)勢對比[3]。

10年的一項(xiàng)病毒檢驗(yàn)的研究表明，目前使用的病毒的免疫檢驗(yàn)方法較早期方法更加的簡便快捷，同時易于操作。本次研究表明，采用發(fā)光、重組和膠體金等免疫實(shí)驗(yàn)相對早期方法操作，摒棄了繁瑣的操作步驟，耗時更短，驗(yàn)證了之前的理論[4]。同時本次實(shí)驗(yàn)將靈敏度和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的特異性納入觀察，結(jié)果顯示新興的方法更加的靈敏且結(jié)果的特異性更高，同時評估全程操作的安全性，危險系數(shù)更低。

盡管技術(shù)得到了提高，但是我們?nèi)詰?yīng)看到臨床工作中仍存在因個體原因?qū)е碌牟僮髡`差造成底物污染等情況，同時對標(biāo)本的選取方面也存在著一定的誤差，需要在日后的工作中注意改善[5]。

[1] 董波,郭家香.芻議病毒感染免疫檢驗(yàn)的研究進(jìn)展[J].中外醫(yī)療, 2012,31(27):326-328.

[2] 彭陸衡.病毒感染免疫檢驗(yàn)的研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用, 2012,6(5):121-122.

[3] 畢秀欣.酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測HIV抗體影響因素探討[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2012,50(2):76-77.

[4] 賀天輝.免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)的研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2011, 49(6):14-15.

[5] 楊曉萍.芻議病毒感染免疫檢驗(yàn)的研究進(jìn)展[J].中國醫(yī)藥指南, 2013,11(27):538-539.

Evaluate the Research and Analysis of the Virus Infection Immune Inspection

WANG Qing-hua
(Second Hospital of Chaoyang, Chaoyang 122000, China)

Objective Focus on the progress of research on virus infection with immune test, thus differential diagnosis and clinic treat diseases caused by viral better. Methods Compared and analysis early development and the present stage, objective research their respective advantages and disadvantages. Results When compared with the early, immune testing method Immune inspection technology operation at this stage to virus research adopted is Simpler and shorter, sensitivity and specificity of time all have obvious advantages, at the same time, the whole operation risk is low. Conclusion The new technology using now is more simple and quick than the early, and more security in operation, could be widely used in clinical.

Virus infection; Immune inspection; Research

R446.1

A

1671-8194（2015）32-0290-02