李廷軍 董彥金

（山東省濟(jì)南市第二人民醫(yī)院，山東 濟(jì)南 250001）

淋球菌對三代頭孢菌素類藥物的敏感性檢測

李廷軍 董彥金

（山東省濟(jì)南市第二人民醫(yī)院，山東 濟(jì)南 250001）

目的 探討探討本院眼分泌物培養(yǎng)分離淋球菌對三代頭孢菌素類藥物的敏感性。方法 選擇2012年5月至2014年5月間我院收集的120株淋球菌分離菌株，分別采用藥敏紙片瓊脂擴(kuò)散法（K-B法）和Etest法檢測淋球菌對頭孢克肟、頭孢泊肟的敏感性。結(jié)果 采用K-B法，頭孢克肟敏感菌株的檢出率為93.3%，對頭孢泊肟敏感菌株的檢出率為95.8%；采用Etest法，頭孢克肟敏感菌株的檢出率為97.5%，頭孢泊肟敏感菌株的檢出率為100%，二者差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 采用K-B法與Etest法檢測淋球菌對三代頭孢菌素類藥物的敏感性具有較高的一致性，但相對而言，K-B法較容易將敏感菌株誤判為非敏感菌株，降低淋球菌對三代頭孢菌素的敏感性。

淋球菌；K-B法；Etest法；三代頭孢菌素

淋球菌是一種革蘭陰性雙球菌，對人體黏膜有特殊親和力，臨床往往可見淋球菌污感染眼睛引起淋菌性結(jié)膜炎等眼科感染病例，主要表現(xiàn)是結(jié)膜發(fā)紅、充血、水腫，有大量膿性分泌物，甚至引起角膜炎、角膜混濁、潰瘍穿孔乃至失明。淋病患者用沾有膿性分泌物的手揉眼睛，或淋病產(chǎn)婦經(jīng)陰道分娩等是引起淋球菌眼炎的常見原因［1］，患者需接受規(guī)范有效的抗生素藥物治療。資料表明，淋球菌是一種容易產(chǎn)生耐藥性的細(xì)菌，已對青霉素、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類等抗生素產(chǎn)生耐藥［2］，三代頭孢菌素類治療失敗的病例還不多見。本文探討了本院淋球菌菌株對于三代頭孢菌素類藥物敏感性的檢測，報道如下。

1　材料與方法

1.1菌株來源：選擇2012年5月至2014年5月間我院收集的120株淋球菌分離菌株，標(biāo)本采集及保存方法嚴(yán)格按照2007年中國疾病預(yù)防控制中心《全國性病監(jiān)測方案（試行）》之中的“全國淋球菌耐藥監(jiān)測實(shí)施方案”實(shí)施，保存于-70 ℃冰箱中備用。

1.2所用材料：頭孢克肟（5 μg）藥敏紙片、頭孢泊肟（10 μg）藥敏紙片、瓊脂培養(yǎng)基、頭孢克肟（0.016～256 mg/L）Etest條、頭孢泊肟（0.016～256 mg/L）Etest條、無菌棉拭子。

1.3操作方法：均嚴(yán)格按照美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會（CLSI）的相關(guān)操作步驟進(jìn)行，詳見參考文獻(xiàn)［3］。

1.4判斷標(biāo)準(zhǔn)： 按照CLSI藥敏K-B法的判斷標(biāo)準(zhǔn)，對頭孢克肟敏感是指抑菌直徑≥31 mm，對頭孢泊肟敏感是指抑菌直徑≥29 mm。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法：使用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件，將檢測結(jié)果采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05，以P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)差異。

2　結(jié) 果

采用K-B法對頭孢克肟敏感菌株的檢出率為93.3%（112/120），對頭孢泊肟敏感菌株的檢出率為95.8%（115/120）；采用Etest法對頭孢克肟敏感菌株的檢出率為97.5%（117/120），對頭孢泊肟敏感菌株的檢出率為100%（120/120），二者差異比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

3　討 論

淋球菌結(jié)膜炎是指由淋球菌感染所致的結(jié)膜炎癥，常見癥狀為結(jié)膜紅、水腫、充血，產(chǎn)生膿性分泌物等，治療不及時不得當(dāng)，還可能引起角膜炎、角膜潰瘍穿孔，甚至失明，因此應(yīng)高度警惕，認(rèn)真處理［1］。淋病患者用沾有膿性分泌物的手揉眼睛，或淋病產(chǎn)婦經(jīng)陰道分娩等是引起淋球菌眼炎的常見原因，除了嚴(yán)格的隔離消毒等措施之外，患者需接受規(guī)范有效的抗生素治療，并防止復(fù)發(fā)和交叉感染。有效治療的前提是淋球菌對所選用的抗生素必須有高度的敏感性。藥敏試驗(yàn)，即細(xì)菌對抗菌藥物的敏感性試驗(yàn)（antimicrobial susceptibility tests），是測定某細(xì)菌菌株對某種抗菌藥物是敏感還是耐藥的一種體外試驗(yàn)，其主要目的之一是判斷細(xì)菌對藥物的敏感性，幫助指導(dǎo)臨床用藥，避免用藥不當(dāng)。因文獻(xiàn)報道淋球菌已對青霉素、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類等多種抗生素產(chǎn)生耐藥［2］，但對三代頭孢菌素類耐藥的報道還不多見［4］，因此本研究通過兩種方法對淋球菌對于三代頭孢菌素類藥物的敏感性進(jìn)行檢測，旨在探討合理的淋球菌藥敏試驗(yàn)檢測方法，并為臨床用藥提供可靠的參考資料。

用于淋球菌對抗生素藥物的敏感性檢測方法主要包括Etest法、K-B法、MIC法（最低抑菌濃度瓊脂稀釋法）等。MIC法檢測淋球菌對抗生素敏感性雖結(jié)果可靠，但方法較為繁瑣，耗費(fèi)時間精力較多，不利于實(shí)驗(yàn)室常規(guī)工作開展。Etest法為新型的檢測淋球菌對抗生素敏感性的試驗(yàn)方法，具有操作簡便、節(jié)約時間等優(yōu)勢，但商品化試劑相對而言不易獲取，訂貨周期較長且價格較貴，在一定程度上對其廣泛應(yīng)用造成了局限性［5］。而K-B法試劑材料容易獲取，價格低廉，操作也很簡便，特別適用于淋球菌對于抗生素敏感性的快速檢測［6］。本文通過試驗(yàn)比較Etest法、K-B法對頭孢克肟、頭孢泊肟的敏感性檢測的結(jié)果表明，采用K-B法對頭孢克肟敏感菌株的檢出率為93.3%（112/120），對頭孢泊肟敏感菌株的檢出率為95.8%（115/120）；采用Etest法對頭孢克肟敏感菌株的檢出率為97.5%（117/120），對頭孢泊肟敏感菌株的檢出率為100%（120/120），二者之間的差異并無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），表明采用K-B法與Etest法檢測淋球菌對三代頭孢菌素類藥物均具有較高的敏感性，兩種方法檢測結(jié)果具有高度一致性。相對而言，K-B法有一定的將敏感菌株誤判為非敏感菌株的可能，從而可能會降低淋球菌對三代頭孢菌素的敏感性檢測結(jié)果，但尚不足以對臨床用藥的選擇產(chǎn)生大的影響。

表1　K-B法和Etest法對頭孢克肟、頭孢泊肟的敏感性檢測結(jié)果（n，%）

［1］龍文莉.新生兒結(jié)膜炎臨床特點(diǎn)與治療［J］.航空航天醫(yī)藥，2010，21（2）：146-147.

［2］Barry PM，Klausner JD.The use of cephalosporins for gonorrhea：the impending problem of resistance［J］.Expert Opin Pharmacother，2009，10（4）：555-577.

［3］Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibilitv Testing：Twenty-Fourth Informational Supplement［S］CLSI document M100-S24.Wayne，PA：CLSI，2014.

［4］蔣法興，其木格.2003～2006年南京地區(qū)淋球菌分離株抗菌藥物敏感性監(jiān)測［J］.中國麻風(fēng)皮膚病雜志，2008，24（1）：23-25.

［5］M?ynarczyk-Bonikowska B，Kujawa M，M?ynarczyk G，et al.Susceptibility of Neisseria gonorrhoeae strains isolated in Poland in 2012-2013 to spectinomycin［J］.Med Dosw Mikrobiol，2015，67（1）：23-28.

［6］Rolskov AS，Bjorn-Mortensen K，Mulvad G，et al.Rapid change in the ciprofloxacin resistance pattern mong Neisseria gonorrhoeae strains in Nuuk，Greenland： time to reconsider preventive and treatment strategies［J］.Int J Circumpolar Health，2015，74：26916.

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