楊冬麗* 張東閣 王春民 王 成

（頸復康藥業(yè)集團有限公司，河北省中藥新輔料工程技術(shù)研究中心，河北 承德 067000）

柴芩軟膠囊中正己醛的含量測定

楊冬麗* 張東閣 王春民 王 成

（頸復康藥業(yè)集團有限公司，河北省中藥新輔料工程技術(shù)研究中心，河北 承德 067000）

目的 建立柴芩軟膠囊中正己醛GC含量測定法。方法 采用GC法，DB-225（15 m×0.25 mm）石英毛細管柱，F(xiàn)ID檢測器，程序升溫系統(tǒng)進行檢測。結(jié)果 正己醛的線性范圍是38.88～388.8 μg/mL（r=0.9998）?；厥章蕿?7.2%。結(jié)論 該方法簡便快速，樣品使用量少，可用于柴芩軟膠囊中正己醛的含量測定。

柴芩軟膠囊；正己醛；氣相色譜

柴芩軟膠囊處方中含有柴胡、黃芩、山豆根、葛根、升麻、薄荷油。具有疏肌解表，清透表里的作用，主要用于感冒風熱證。柴胡揮發(fā)油為其有效成分之一，現(xiàn)行質(zhì)量標準中未對其進行檢測。柴胡揮發(fā)油具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、保肝等作用，研究表明含有揮發(fā)油的柴胡浸膏較不含揮發(fā)油的柴胡浸膏具有明顯的抗炎、鎮(zhèn)痛、解熱作用［1］。且南、北柴胡揮發(fā)油對不同致熱源致熱的家兔均有一定的解熱作用［2］。柴胡揮發(fā)油可能作用于下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞，從而抑制體溫調(diào)定點的上移［3］。其揮發(fā)油中低分子醛酮部分為抗炎的有效成分［4］，回歸分析和相關分析結(jié)果表明正己醛、正庚醛、（E）2-庚烯醛、2-戊基呋喃等與柴胡揮發(fā)油的藥理作用密切相關，各種物質(zhì)共同構(gòu)成柴胡揮發(fā)油藥效的物質(zhì)基礎［5］。因此，本研究以正己醛為指標，建立柴芩軟膠囊中柴胡揮發(fā)性成分進行含量測定方法，進一步完善質(zhì)量標準，控制產(chǎn)品質(zhì)量。

1　儀器與試藥

Agilent 7890A氣相色譜儀，Agilent G4513A自動進樣器，J&W DB-225 15 m×0.25 mm石英毛細管柱，正己醛對照品（天津市光復精細化工研究所，色標級含量≥99%），正己烷（天津市科密歐化學試劑有限公司，分析純）。柴芩軟膠囊（頸復康藥業(yè)集團有限公司，批號398002、398005、398006）。

圖1　柴芩軟膠囊GC圖譜 A.正己醛；B.柴芩軟膠囊樣品；C.陰性

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件：DB-225（15 m×0.25 mm）石英毛細管柱，F(xiàn)ID檢測器，檢測器溫度250 ℃，脈沖分流，分流比10∶1，程序升溫，初始溫度45 ℃，以0.5 ℃/min升溫至48 ℃，然后以6.5 ℃/min升溫至70 ℃，保持3 min；再以25 ℃/min升溫至210 ℃，保持5 min。載氣氮氣，進樣量1 μL。

2.2對照品溶液的制備：取正己醛適量，精密稱定，用正己烷配制成濃度為0.15 mg/mL的溶液。

2.3標準曲線的繪制：精密稱取正己醛對照品適量，用正己烷配成濃度為1.9 mg/mL的溶液，分別精密吸取正己醛對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1 mL置5 mL容量瓶中，用正己烷稀釋至刻度，搖勻，按上述色譜條件進樣檢測。以正己醛對照品的峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標（mg/mL），繪制標準曲線，計算回歸方程為：Y=899.66X-5.689，r=0.9998；線性范圍是38.88～388.8 μg/mL。

2.4提取溶劑的選擇：取柴芩軟膠囊54粒（批號398002），置500 mL圓底燒瓶中，加入水250 mL，于揮發(fā)油提取器中分別加入乙酸乙酯、石油醚、正己烷各1 mL，回流提取2 h。分別將乙酸乙酯、石油醚、正己烷層置于2 mL容量瓶中，用相應的溶劑定容，作為供試品溶液。將供試品溶液用上述GC法進行測定，外標法計算正己醛含量，結(jié)果見表1，結(jié)果表明用正己烷為提取溶劑時，樣品中正己醛含量較高，因此，確定提取溶劑為正己烷。

表1　不同提取溶劑的測定結(jié)果

2.5提取時間的選擇：取柴芩軟膠囊54粒（批號398002），置500 mL圓底燒瓶中，加入水250 mL，于揮發(fā)油提取器中加入正己烷1 mL，共三份，分別回流提取2、3、4 h。將正己烷層置于2 mL容量瓶中，用正己烷定容，作為供試品溶液。將供試品溶液用上述GC法進行測定，外標法計算正己醛含量，結(jié)果見表2，結(jié)果表明用正己烷為提取溶劑時，提取3 h樣品中正己醛含量較高，因此，確定提取時間為3 h。

表2　不同提取時間的測定結(jié)果

通過上述試驗研究結(jié)果，最終確定供試品溶液的制備方法為：取柴芩軟膠囊54粒，置500 mL圓底燒瓶中，加入水250 mL，于揮發(fā)油提取器中加入正己烷1 mL，水蒸氣蒸餾法提取3 h。將正己烷層置于2 mL容量瓶中，用正己烷定容，作為供試品溶液。將供試品溶液用上述GC法進行測定，外標法計算正己醛含量。

2.8陰性對照液的制備：按柴芩軟膠囊處方比例取除柴胡外的其他藥材，按柴芩軟膠囊的制備方法制備模擬陰性樣品，再按供試品溶液的制備方法制備，即得。結(jié)果表明陰性無干擾。色譜圖見圖1。

2.9儀器精密度：取正己醛對照品溶液，重復進樣6次，測定峰面積，計算RSD為：0.69%（n=6），精密度符合要求。

2.10重復性試驗：取同一批次的柴芩軟膠囊（批號398002），按供試品溶液的制備方法，重復處理6份，測定，計算含量，RSD為0.68%（n=6），重復性良好。

2.11穩(wěn)定性試驗：取同一批次的柴芩軟膠囊，按供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，分別于0、1、2、4、6、8 h測定峰面積，計算峰面積的RSD為0.91%。試驗結(jié)果表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.12回收率試驗：取已知含量的柴芩軟膠囊（批號398002）27粒，精密加入濃度為0.1555 mg/mL正己醛對照品溶液1 mL，按供試品溶液的制備方法制備，在上述色譜條件下，進樣測定，計算平均回收率為97.2%（n=5），RSD為1.09%。

2.13樣品測定：取3批柴芩軟膠囊（批號398002、398005、398006），按供試品溶液制備方法項下操作，按上述色譜條件進行測定，色譜圖見圖1，結(jié)果見表3。

表3　柴芩軟膠囊含量測定結(jié)果（n=3）

3批含量測定結(jié)果表明該方法準確可靠，方法學研究符合要求，可用于柴芩軟膠囊中正己醛的含量測定，并為進一步控制柴芩軟膠囊質(zhì)量，完善質(zhì)量標準提供依據(jù)。

3　討 論

試驗過程中通過對比柴胡揮發(fā)油和柴芩軟膠囊揮發(fā)油的GC色譜圖，最終將共有成分正己醛確定為柴芩軟膠囊的指標成分。正己醛為柴胡揮發(fā)油的有效成分之一，在色譜圖中該峰與其他峰分離較好，陰性無干擾。

在進行供試品溶液的制備時，發(fā)現(xiàn)采用柴芩軟膠囊內(nèi)容物進行供試品溶液的制備與直接用柴芩軟膠囊進行供試品溶液的制備所得含量測定結(jié)果一致，故在供試品溶液的制備中采用柴芩軟膠囊直接進行供試品溶液的制備，避免將內(nèi)容物擠出時有效成分的損失。

正己醛為柴胡揮發(fā)油中的主要有效成分，對于發(fā)揮柴芩軟膠囊治療感冒的療效起著重要作用。通過檢測發(fā)現(xiàn)柴芩軟膠囊中正己醛含量差異較大，因此有必要建立該制劑中正己醛的含量測定方法，從而更加有效的保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。

［1］周王誼，李欣欣，莫紅梅，等.兩種不同揮發(fā)油含量柴胡制劑藥效作用研究［J］.中藥藥理與臨床，2012，28（1）：104-106.

［2］李秀琴，賈英，陳曉輝，等.南北柴胡揮發(fā)油解熱作用研究［J］.中草藥，2005，36（增刊）：162-164.

［3］孫秀萍，張寧.柴胡解熱的物質(zhì)基礎、機制及影響因素探討［J］.山東中醫(yī)藥大學學報，2009，33（4）：345-346.

［4］湖北省醫(yī)藥工業(yè)研究所.北柴胡揮發(fā)油解熱抗炎化學成分的研究［J］.藥學通報，1982，17（4）：10-13.

［5］李秀琴.柴胡質(zhì)量評價方法與其相關成分的藥動學研究［D］.沈陽：沈陽藥科大學，2006.

R282.710.3

B

1671-8194（2015）27-0046-02

河北省自主創(chuàng)新重大成果轉(zhuǎn)化項目（11276409Z）