宮 蕾　呂響紅　于 斌

（青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院（中心醫(yī)院）小兒科，山東 青島 266042）

探討ADAM33基因多態(tài)性與塵螨過(guò)敏性哮喘易感性的關(guān)系研究

宮 蕾呂響紅于 斌

（青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院（中心醫(yī)院）小兒科，山東 青島 266042）

目的 探討ADAM33單核苷酸多態(tài)性與塵螨過(guò)敏性哮喘間的關(guān)聯(lián)性。方法取哮喘病、健康人各100例，通過(guò)AS-PCR、DNA測(cè)序法等，分別測(cè)定ADAM33基因F+1、S2、T2及V4位點(diǎn)。結(jié)果兩組在S2位點(diǎn)基因型及等位基因頻率上，存在明顯差異（P＜0.05）；與過(guò)敏性哮喘易感性無(wú)顯著關(guān)聯(lián)（P＞0.05）。結(jié)論S2位點(diǎn)基因多態(tài)性與過(guò)敏性哮喘顯著相關(guān)，與病情嚴(yán)重性及肺功能指標(biāo)關(guān)聯(lián)甚微。

ADAM33基因多態(tài)性；哮喘；關(guān)系

本研究將對(duì)哮喘組和正常組患者展開(kāi)研究，通過(guò)分子生物學(xué)法檢測(cè)哮喘發(fā)病相關(guān)聯(lián)的ADAM33基因F+1、T2、S2以及V4位點(diǎn)多態(tài)性，研究ADAM33基因多態(tài)性與塵螨過(guò)敏性哮喘疾病間的關(guān)聯(lián)性。

1　對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象：過(guò)敏性哮喘組共100例，未合并其他疾病或感染，中位年齡（34.5±13.2）歲，患者未經(jīng)脫敏治療。健康對(duì)照組共100例，中位年齡（36.5±11.4）歲，樣本外周血均由我院提供（5 mL）。

1.2方法

1.2.1臨床指標(biāo)檢測(cè)。①過(guò)敏原檢測(cè)：利用皮膚點(diǎn)刺實(shí)驗(yàn)，將塵螨所致過(guò)敏性哮喘篩選出來(lái)；②肺功能檢測(cè)；③胸部正位片；④特異性IgE抗體測(cè)定。

1.2.2基因組DNA提取與序列檢測(cè)：取3 mL外周靜脈血，抗凝后運(yùn)用基因組DNA提取試劑盒進(jìn)行基因組提取。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)分析PCR反應(yīng)及擴(kuò)增產(chǎn)物；取基因型樣本，純化PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，用遺傳分析儀對(duì)PCR產(chǎn)物予以測(cè)序，用BLAST軟件分析測(cè)序結(jié)果的同源性及準(zhǔn)確性。

1.3統(tǒng)計(jì)處理：通過(guò)SPSS13.0軟件來(lái)處理所有數(shù)據(jù)。χ2用以檢驗(yàn)組間基因型頻率以及等位基因頻率等。用OR、95%CI代表哮喘風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，P＜0.05，表明對(duì)比差異顯著。

2　結(jié)　果

2.1ADAM33多位點(diǎn)基因型與等位基因頻率分析，見(jiàn)表1。

2.2過(guò)敏性哮喘組S2位點(diǎn)多態(tài)性與哮喘易感性的關(guān)系，見(jiàn)表2。

3　討　論

表1　ADAM33多位點(diǎn)基因型與等位基因頻率分析

表2　過(guò)敏性哮喘組S2位點(diǎn)多態(tài)性與哮喘易感性的關(guān)系

哮喘，屬于臨床頻發(fā)的變應(yīng)性疾病，其發(fā)病機(jī)制及病因仍有待明確。Raby等通過(guò)對(duì)北美哮喘兒童ADAM33基因的17個(gè)SNP進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)單個(gè)SNP與哮喘不相關(guān)聯(lián)；而Werner等人在德國(guó)群體ADAM33基因中的15個(gè)SNP檢測(cè)中，得出F+1、ST+4、ST+5等多態(tài)性與哮喘存在顯著性差異（P＜0.01）。本研究通過(guò)測(cè)定F+1、T2、S2及V4四個(gè)位點(diǎn)的基因型及等位基因，結(jié)果表明：ADAM33基因F+1、T2與V4位點(diǎn)基因型對(duì)比無(wú)顯著差異（P＞0.05）；哮喘組與健康組在S2位點(diǎn)基因型及等位基因頻率存在明顯差異（P＜0.05）；S2位點(diǎn)基因型構(gòu)成差別對(duì)哮喘嚴(yán)重性無(wú)顯著差異（P＞0.05）；提示在漢族群體中，ADAM33基因F+1、S2、T2以及V4位點(diǎn)具有多態(tài)性，S2位點(diǎn)多態(tài)性和哮喘具有一定關(guān)聯(lián)，但與其嚴(yán)重性無(wú)顯著相關(guān)。盡管ADAM33基因會(huì)否參與哮喘發(fā)病的研究結(jié)果各不相同，但其對(duì)了解哮喘形成及發(fā)展極有利。

哮喘患者肺功能會(huì)有所降低，這已是不爭(zhēng)事實(shí)。有研究［2］表明，ADAM33基因中有2種SNP（S2與Q21）的FEV，年降低斜率顯著上升，提示ADAM33基因會(huì)使肺功能下降。魏龍等［3］通過(guò)對(duì)1350例新疆人8種SNP展開(kāi)對(duì)比研究，結(jié)果表明：ADAM33基因的多態(tài)性位點(diǎn)對(duì)慢性阻塞性肺疾病的肺功能降低有顯著影響。本研究通過(guò)計(jì)算S2位點(diǎn)基因型及其和肺功能指標(biāo)FEV實(shí)/預(yù)以及FEV1/FVC之間關(guān)聯(lián)性，得出S2位點(diǎn)SNP與哮喘患者的肺功能無(wú)關(guān)聯(lián)。研究結(jié)果之所以存在差異，主要是受遺傳、種族因素影響。為探討ADAM33與哮喘相關(guān)的遺傳多態(tài)性及表達(dá)影響機(jī)制，未來(lái)還需展開(kāi)深入研究。

［1］遲翔宇.ADAM33基因在支氣管哮喘發(fā)病中的研究［D］.濟(jì)南:山東大學(xué)，2011.

［2］邱玉明，羅雅玲.ADAM33基因Met764Thr位點(diǎn)多態(tài)性與支氣管哮喘發(fā)病及患者肺功能的相關(guān)性［J］.中華結(jié)核和呼吸雜志，2007，30（7）:517-521.

［3］魏龍.ADAM33基因多態(tài)性與新疆維吾爾族人群支氣管哮喘的相關(guān)性研究［D］.烏魯木齊:新疆醫(yī)科大學(xué)，2012.

To Investigate the Relationship between ADAM33 Gene Polymorphism and Dust Mite Allergic Asthma Susceptibility

GONG Lei，LU Xiang-hong，YU Bin
（Department of Pediatrics，the Second Affiliated Hospital of Medical College of Qiingdao University （Central Hospital），Qingdao 266042，China）

Objective To investigate the relationship between ADAM33 single nucleotide polymorphism and dust mites allergic asthma among. Methods The asthma and 100 healthy people were selected，by means of AS-PCR，DNA sequencing，ADAM33 genes F+1，S2，T2 and V4 loci were determined respectively. Results The two groups in the S2 genotype and allele frequencies，there is obvious difference （P＜0.05）；no significant association with susceptibility to allergic asthma （P＞0.05）. Conclusion Significant correlation of S2 polymorphism with allergic asthma，with severity of pulmonary function indices and little.

ADAM33 gene polymorphism；Asthma；Relationship

R562.2+5

B

1671-8194（2015）22-0020-02