葉星辰　陳燕忠*

（廣東藥學(xué)院藥物研究所，廣東 廣州 510006）

基于星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)化鹽酸曲美他嗪緩釋微丸的制備及評價(jià)

葉星辰陳燕忠*

（廣東藥學(xué)院藥物研究所，廣東 廣州 510006）

目的制備鹽酸曲美他嗪緩釋微丸，并篩選最優(yōu)處方。方法以體外釋放度為考察指標(biāo)，采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)優(yōu)化處方并驗(yàn)證。結(jié)果成功制備了鹽酸曲美他嗪緩釋微丸；得到緩釋包衣的最優(yōu)處方為：Eudragit RS100與Eudragit RL100的比例為8.15，包衣增重10.46%；驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)證明最優(yōu)處方工藝的重現(xiàn)性良好。結(jié)論采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法成功得到鹽酸曲美他嗪緩釋微丸的處方優(yōu)化模型，實(shí)現(xiàn)了處方優(yōu)化。

鹽酸曲美他嗪；緩釋；星點(diǎn)設(shè)計(jì)

曲美他嗪可選擇性抑制3-酮?；o酶A硫解酶，在減少游離脂肪酸代謝的同時增加葡萄糖的氧化，從而改善心肌能量，是臨床上心絞痛的一線治療藥物，具有保護(hù)心肌細(xì)胞的作用［1］。目前上市的劑型為法國施維雅公司生產(chǎn)的鹽酸曲美他嗪片-萬爽力［2-4］。

時辰病理學(xué)研究表明，清晨4～8時為心絞痛的發(fā)病高峰［5］，而曲美他嗪的半衰期為6 h左右［6］，因此考慮將其制成緩釋制劑。本文采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)選以Eudragit RS100和Eudragit RL100為緩釋成膜材料的包衣處方工藝，制備鹽酸曲美他嗪緩釋微丸，使藥物在體內(nèi)緩慢釋放，維持血藥濃度在有效的范圍之內(nèi)，有效防止清晨心絞痛的發(fā)生，改善患者的順應(yīng)性。

1　儀器與材料

Aeromatic型流化床（NIRO，德國），ZR-4型智能溶出試驗(yàn)儀（天津大學(xué)無線電廠），高效液相色譜儀（Dionex Corp），BS224S型精密分析天平（Sartorius儀器有限公司），CP225D型精密分析天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司），GZX-9246MBE型干燥箱（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）。

鹽酸曲美他嗪含藥丸芯（自制），曲美他嗪對照品（含量99.8%），Eudragit（RS100、RL100，德固賽），聚乙二醇6000（PEG6000，卡樂康輔料公司），滑石粉（廣州杰輔），其他試劑均為分析純。

2　方法與結(jié)果

2.1分析方法的建立

2.1.1色譜條件。色譜柱：Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：0.012 mmol/L庚烷磺酸鈉溶液（加磷酸調(diào)節(jié)pH至3）∶甲醇∶乙腈=55∶36∶9；流速：1 mL/min；檢測波長：230 nm；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：20 μL。

2.1.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：精密稱取鹽酸曲美他嗪對照品適量，加流動相溶解，配制成105.1 μg/mL的儲備液。精密吸取儲備液0.5，1.0，2.0，4.0，6.0 mL，分別置于10 mL容量瓶中，以流動相定容，用0.45 μm濾膜濾過，取續(xù)濾液。將制得的系列溶液分別進(jìn)樣測定，并以峰面積A對濃度做線性回歸，得回歸方程A=5722.3C-0.3971（r=0.9994），鹽酸曲美他嗪在5.255～63.06 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.1.3精密度實(shí)驗(yàn)：吸取同一對照品溶液（42.04 μg/mL），按2.1.1項(xiàng)下的色譜條件連續(xù)進(jìn)樣5次。結(jié)果峰面積A的RSD為0.58%，表明儀器精密度良好。

2.1.4穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一對照品溶液（42.04 μg/mL），分別于0、2、4、6、8、10、12、24 h各測定峰面積A一次，計(jì)算得峰面積的RSD為0.93%，表明所得樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2體外釋放度方法的建立：采用轉(zhuǎn)籃法進(jìn)行測定。具體方法參考《中國藥典》2010版第二部附錄XD中釋放度測定法第一法中之操作。前2 h的釋放介質(zhì)采用0.1 mol/L HCl溶液，水浴溫度為（37±0.5） ℃，轉(zhuǎn)速100 r/min。2 h后取樣，并棄去HCl溶液；立即轉(zhuǎn)入pH6.8磷酸鹽（pH 6.8 PBS）緩沖溶液，分別于4、6、8、10、12、24 h各取樣5 mL，同時補(bǔ)加等量同溫pH6.8 PBS緩沖溶液；樣品用0.45 μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液稀釋至適宜濃度，測定峰面積A，并計(jì)算累積釋藥率。

2.3曲美他嗪緩釋微丸的制備

2.3.1包衣液的配制：取Eudragit RS100、Eudragit RL100及PEG 6000適量，緩慢加入75%乙醇中，攪拌至溶解，得溶液A。將滑石粉邊攪拌邊加入適量75%乙醇中，勻化5 min，得溶液B。將溶液B緩緩加入溶液A中，攪拌均勻，過80目篩，即得包衣液。

2.3.2緩釋微丸的制備：將鹽酸曲美他嗪含藥丸芯置于流化床中，以底噴方式進(jìn)行包衣。調(diào)整出風(fēng)溫度為25～35 ℃，噴霧壓力為4 bar，噴液速率為1.5～2. 0 mL/min。包衣完成后繼續(xù)流化干燥10 min，結(jié)束后置于烘箱中40 ℃熟化24 h。

2.4星點(diǎn)設(shè)計(jì)優(yōu)化處方

圖1　2 h累積釋放率三維效應(yīng)面圖

圖2　12 h累積釋放率三維效應(yīng)面圖

圖3　24 h累積釋放率三維效應(yīng)面

2.4.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：由單因素實(shí)驗(yàn)可知Eudragit RS100與Eudragit RL100的比例（X1）、包衣增重（X2）對曲美他嗪緩釋微丸累積釋放率的影響較為顯著。因此選擇以上2個條件作為考察因素，規(guī)定其取值范圍分別為：X1：0.5～10，X2：5%～15%。選擇曲美他嗪緩釋微丸在2、12、24 h的累積釋放率為考察指標(biāo)（分別記為Q2h，Q12h，Q24h）。因素及水平表見表1，具體實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表2。

表1　因素水平表

表2　試驗(yàn)設(shè)計(jì)及各指標(biāo)測定結(jié)果

2.4.2模型的擬合：采用Design-Expert軟件分析表2中的數(shù)據(jù)，以考察指標(biāo)Q2h、Q12h及Q24h為因變量分別對兩因素進(jìn)行多元線性（Linear）、二次多項(xiàng)式（Quadratic）和三次多項(xiàng)式（Cubic）模型擬合，考察指標(biāo)和兩個因素之間的關(guān)系，以置信度（P）和擬合優(yōu)度（R2）作為模型的判定標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明：Q2h、Q12h及Q24h的最優(yōu)擬合模型均為Cubic模型，擬合方程如下：

Q2h=24-11.86X1-10.02X2+1.15X1X2-1.87X12+2.01X22-1.65X12X2+6.88X1X22（R2=0.9997，P=0.0376）

Q12h=77.29-16.63X1-13.12X2-0.68X1X2-4.38X12-1.125*10-3X22-1.05X12X2+12.96X1X22（R2=0.9954，P=0.0028）

Q24h=89.82-7.89X1-8.45X2-0.60X1X2-0.78X12-0.68X22+1.83X12X2+6.51X1X22（R2=0.9579，P=0.0090）

根據(jù)擬合方程，采用Design-Expert軟件分別繪制各指標(biāo)與因素的三維響應(yīng)面圖，見圖1～3。

2.4.3處方優(yōu)化及預(yù)測：一般要求緩釋制劑可在釋放初期達(dá)到一定的藥物濃度，而后緩慢釋放，以維持體內(nèi)血藥濃度的穩(wěn)定。規(guī)定微丸2 h的釋放率為10%～30%，12 h的釋放率為40%～60%，24 h的釋放率為80%～100%。按以上要求，采用Design-Expert軟件對響應(yīng)面進(jìn)行優(yōu)化，并預(yù)測最優(yōu)處方，結(jié)果如表3所示。

表3　優(yōu)化結(jié)果

2.4.4工藝驗(yàn)證：按2.4.3中所得的最優(yōu)處方制備曲美他嗪緩釋微丸3批，以2、12、24 h的累積釋放率為考察指標(biāo)進(jìn)行工藝驗(yàn)證，并計(jì)算預(yù)測值和實(shí)測值之間的偏差率，偏差率越小，說明該數(shù)學(xué)模型預(yù)測效果越好［7］，結(jié)果見表4。

表4　預(yù)測值與實(shí)測值的偏差

由表4可知，各實(shí)測值與預(yù)測值間的偏差率均＜5%，表明所建立的數(shù)學(xué)模型具有良好的預(yù)測性。

3　討　論

本實(shí)驗(yàn)采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法對鹽酸曲美他嗪緩釋微丸的包衣處方進(jìn)行了優(yōu)化，并按照最佳處方進(jìn)行工藝驗(yàn)證，比較了實(shí)測值與預(yù)測值之間的差異。結(jié)果表明，實(shí)測值與預(yù)測值的趨勢基本一致，所建立的模型有良好的預(yù)測性，所選條件重現(xiàn)性良好。

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Preparation and Evaluation of Trimetazidine Dihydrochioride Sustained-release Pellets by Central Composite Design and Response Surface Methodology

YE Xing-chen，CHEN Yan-zhong
（Institute of Medicine，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China）

Objective To prepare the sustained-release pellets of trimetazidine dihydrochioride and screen the optimal preparation. Methods The preparation factors of in vitro drug release behavior were studied through single-factor experiments. Central composition design was used to optimize the experiment design. The optimal preparation was verified by experiment. Results The trimetazidine dihydrochioride sustained-release pellets was successfully prepared. The optimal preparation was as follows: Eudragit RS100 and Eudragit RL100 are at the ratio of 4∶1；the coating level is 10.46%. The preparation technology was reproducible. Conclusion A reliable model is established using response surface methodology and implements the prescription optimization.

Trimetazidine dihydrochioride；Sustained-release；Central composite design

R9

B

1671-8194（2015）22-0004-02

E-mail：doctor.c@163.com