邵麗麗

【摘要】目的：在研究的過(guò)程中對(duì)注射用氨芐西林鈉雜質(zhì)譜和不同的生產(chǎn)工藝進(jìn)行研究和對(duì)比。方法：采用不同的檢測(cè)氨芐西林鈉相關(guān)的方法進(jìn)行有效的檢測(cè)，同時(shí)還要嚴(yán)格的進(jìn)行破壞性試驗(yàn)，同時(shí)還要對(duì)各種雜質(zhì)進(jìn)行有效的檢測(cè)和辨別。按照190批次注射用氨芐西林鈉的各種檢驗(yàn)結(jié)果為主要的依據(jù)，對(duì)不同的生產(chǎn)工藝所生產(chǎn)出來(lái)的藥品進(jìn)行檢驗(yàn)，從而能夠更好的了解產(chǎn)品當(dāng)中雜質(zhì)的具體成分和含量。結(jié)果：溶媒結(jié)晶樣品中的雜質(zhì)含量是最少的，同時(shí)在雜質(zhì)的數(shù)量上也要明顯少于其他樣品，在所有的樣品中，雜質(zhì)含量最多的就是噴霧干燥樣品。結(jié)論：樣品當(dāng)中的雜質(zhì)含量和原料具體的生產(chǎn)方法存在著一定的聯(lián)系，在所有的影響因素當(dāng)中，產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝是影響其雜質(zhì)數(shù)量和種類(lèi)的最為重要的因素。

【關(guān)鍵詞】注射用氨芐西林鈉；雜質(zhì)譜；生產(chǎn)工藝；相關(guān)性研究

【中圖分類(lèi)號(hào)】R927 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949（2015）02-0653-020

氨芐西林鈉是率先應(yīng)用于臨床治療的光譜半合成青霉素藥品，這種藥物對(duì)很多細(xì)菌的抑制作用機(jī)理和青霉素是非常類(lèi)似的，這種藥物可以治療因?yàn)榧?xì)菌導(dǎo)致的各種感染性疾病，當(dāng)前，生產(chǎn)氨芐西林鈉的工藝主要有三種，一種是溶媒結(jié)晶法，一種冷凍干燥法，最后一種方法是噴霧干燥法，相關(guān)的研究表明溶媒結(jié)晶方法在氨芐西林鈉生產(chǎn)中的優(yōu)勢(shì)更強(qiáng)，本文主要對(duì)氨芐西林鈉生產(chǎn)的相關(guān)工藝進(jìn)行研究。

1、儀器與試劑

高效液相色譜儀，包括LC-10ADvp泵，SPD-10A紫外檢測(cè)器，SIL-10AXL型自動(dòng)進(jìn)樣器，色譜工作站。電子天平。三重四極桿質(zhì)譜儀，配備電噴霧電離源（ESI）以及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。

氨芐西林對(duì)照品（批號(hào)130410-200706，含量85.7%）、氨芐西林系統(tǒng)適用性對(duì)照品（批號(hào)130618-201001）和苯甘氨酸對(duì)照品（批號(hào)130415-200904）由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供。190批次注射用氨芐西林鈉（其中溶媒結(jié)晶樣品46批次，冷凍干燥樣品84批次，噴霧干燥樣品60批次）均為2014年國(guó)家藥品評(píng)價(jià)抽驗(yàn)樣品，分別由國(guó)內(nèi)15家企業(yè)生產(chǎn)。乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2、實(shí)驗(yàn)方法

按照中國(guó)藥典2010年版二部氨芐西林鈉有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定方法，對(duì)190批次樣品的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定，利用氨芐西林系統(tǒng)適用性對(duì)照品、苯甘氨酸對(duì)照品定位雜質(zhì)峰，利用質(zhì)譜技術(shù)推斷未知雜質(zhì)，并歸納總結(jié)得到雜質(zhì)譜；比對(duì)不同工藝樣品中雜質(zhì)的個(gè)數(shù)及含量；同時(shí)經(jīng)酸、堿、光、氧化、高溫破壞試驗(yàn)對(duì)各雜質(zhì)溯源。

液相色譜條件：色譜柱為C18柱（自裝，日本產(chǎn)富士填料）；流動(dòng)相A為12%醋酸溶液-0.2mol檢出的雜質(zhì)與氨芐西林系統(tǒng)適用性對(duì)照品色譜圖比對(duì)，結(jié)構(gòu)已知的雜質(zhì)有氨芐西林噻唑酸（雜質(zhì)5）、二酮哌嗪-2（R）氨芐西林（雜質(zhì)7）、氨芐西林開(kāi)環(huán)二聚體（雜質(zhì)8）、氨芐西林閉環(huán)二聚體（雜質(zhì)10）和氨芐西林開(kāi)環(huán)三聚體（雜質(zhì)13）；通過(guò)與苯甘氨酸對(duì)照品的保留時(shí)間和UV光譜特性的比較，證明噴霧干燥產(chǎn)品中獨(dú)有的2號(hào)雜質(zhì)為苯甘氨酸；但樣品中的另一較大雜質(zhì)（雜質(zhì)12）并非系統(tǒng)適用性對(duì)照品中標(biāo)注的已知雜質(zhì)。鑒于其極性較小、保留時(shí)間大于二聚物等特征，初步推斷為氨芐西林三聚物。收集該色譜峰的流出液、經(jīng)固相萃取小柱濃縮洗脫后注入質(zhì)譜儀進(jìn)行確證，可見(jiàn)[M+H]+為1048的分子離子峰及[M+H]+為350的碎片離子峰。1048為閉環(huán)三聚體的分子離子峰，350為氨芐西林的分子離子峰，一分子閉環(huán)三聚體由一分子氨芐西林和兩分子氨芐西林噻唑酸組成，根據(jù)青霉素類(lèi)抗生素的質(zhì)譜裂解規(guī)律，可以確證該色譜峰為氨芐西林閉環(huán)三聚體峰。

對(duì)3種不同工藝樣品中的各雜質(zhì)的含量進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)批號(hào)相近的溶媒結(jié)晶樣品中的雜質(zhì)量遠(yuǎn)小于其他2種工藝樣品；不同工藝樣品中最大雜質(zhì)均為10號(hào)氨芐西林閉環(huán)二聚體，冷凍干燥樣品的閉環(huán)二聚體最大；國(guó)產(chǎn)氨芐西林鈉中的其他較大雜質(zhì)還有氨芐西林噻唑酸、二酮哌嗪氨芐西林、閉環(huán)三聚體等。通過(guò)對(duì)酸、堿、光、氧化和熱加速試驗(yàn)樣品及放置24h的溶液的檢測(cè)表明，氨芐西林鈉中14個(gè)雜質(zhì)中的10個(gè)可在不同的條件下降解產(chǎn)生：1、3、6和11號(hào)雜質(zhì)在各種加速實(shí)驗(yàn)條件下均無(wú)明顯變化，推測(cè)為工藝雜質(zhì)；2、4、5、7、8、9、10、12、13和14號(hào)雜質(zhì)為降解雜質(zhì)。

3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

將190批次樣品中的氨芐西林二聚物（閉環(huán)二聚體）、其他單個(gè)最大雜質(zhì)（除閉環(huán)二聚體外）、其他總雜質(zhì)（除閉環(huán)二聚體外）的檢驗(yàn)結(jié)果和生產(chǎn)企業(yè)提供的原料藥生產(chǎn)工藝等通過(guò)SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行多因素相關(guān)分析，結(jié)果表明：原料藥生產(chǎn)工藝與樣品中的氨芐西林二聚物、其他單個(gè)最大雜質(zhì)、其他總雜質(zhì)等均顯著相關(guān)（P<0.01），說(shuō)明原料藥生產(chǎn)工藝是影響產(chǎn)品雜質(zhì)的重要因素。

4、討論

相關(guān)研究人員對(duì)雜質(zhì)譜進(jìn)行了詳細(xì)的分析之后發(fā)現(xiàn)，在三個(gè)樣品當(dāng)中，噴霧干燥樣品中的雜質(zhì)含量是最高的，同時(shí)雜質(zhì)的種類(lèi)也是最多的，產(chǎn)生這種現(xiàn)象的主要原因是在氨芐西林生產(chǎn)的過(guò)程中，氨芐西林在堿性較強(qiáng)的環(huán)境下發(fā)生了化學(xué)變化，而在冷凍干燥樣品當(dāng)中，閉環(huán)二聚體的數(shù)量是最多的，產(chǎn)生這種現(xiàn)象的主要原因可能是氨芐西林在實(shí)驗(yàn)中冷凍的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，這樣也就會(huì)使得氨芐西林在堿性水溶液中會(huì)出現(xiàn)聚合反應(yīng)，溶媒結(jié)晶的樣品當(dāng)中，雜質(zhì)的含量和其他樣品相比是最少的，雜質(zhì)的種類(lèi)相對(duì)也比較少，而且在結(jié)晶的過(guò)程中也可以將已經(jīng)出現(xiàn)的雜質(zhì)順利的清除，所以綜合各項(xiàng)因素來(lái)看，溶媒結(jié)晶樣品的質(zhì)量要明顯好于其他的樣品質(zhì)量。

在經(jīng)過(guò)了加速試驗(yàn)和雜質(zhì)結(jié)構(gòu)分析之后，研究人員發(fā)現(xiàn)氨芐西林在堿性條件下聚合的效果更佳，所以樣品中最大含量也最多的雜質(zhì)就是閉環(huán)二聚體，想要完成開(kāi)環(huán)水解就必須要加入氨芐西林噻唑酸，這種物質(zhì)在水分條件下能夠更好的發(fā)揮作用，同時(shí)也能加速其生成，所以它也是雜質(zhì)中數(shù)量最多的一種，除此之外，樣品中二聚物含量要比三聚物的含量高很多，這種現(xiàn)象也充分的證明聚合物的形成也是分級(jí)別的。

當(dāng)前，生產(chǎn)氨芐西林藥物的方法和工藝越來(lái)越多，而不同的生產(chǎn)工藝也會(huì)使得藥品本身的質(zhì)量存在非常大的差異，綜合各項(xiàng)因素考慮，在企業(yè)生產(chǎn)藥物的過(guò)程中應(yīng)該采取溶媒結(jié)晶方法，這樣不僅能降低生產(chǎn)的成本，同時(shí)也能提高藥品自身的質(zhì)量和有效性。

注射用氨芐西林鈉的內(nèi)部分布是比較有規(guī)律的，細(xì)菌性腦膜炎的患者如果按照用藥的規(guī)定注射此藥，前三天腦脊液的濃度就會(huì)有明顯的降低，而正常情況下，人的腦脊液當(dāng)中只含有少量的氨芐西林鈉，注射用氨芐西林鈉可以在胎盤(pán)的保護(hù)作用下到達(dá)羊水。如果肺部感染的病人肺部分泌液的濃度應(yīng)該達(dá)到同期血糖水平的2%，所以在很多病癥中都可以使用氨芐西林鈉，同時(shí)還能夠體現(xiàn)出非常好的效果，對(duì)腎功能或者是肝功能不全的患者而言效果更加的明顯。

氨芐西林鈉溶液濃度愈高，穩(wěn)定性愈差。在5℃時(shí)1%氨芐西林鈉溶液能保持其生物效價(jià)7天，但5%的溶液則為24小時(shí)。濃度為30mg/ml的氨芐西林鈉靜脈滴注液在室溫放置2～8小時(shí)仍能至少保持其90%的效價(jià)，放置冰箱內(nèi)則可保持其90%的效價(jià)至72小時(shí)。穩(wěn)定性可因葡萄糖、果糖和乳酸的存在而降低，亦隨溫度升高而降低。

供肌內(nèi)注射可分別溶解125mg、500mg和1g氨芐西林鈉地0.9～1.2ml、1.2～1.8ml和2.4～7.4ml滅菌注射用水中。氨芐西林鈉靜脈滴注液的濃度不宜超過(guò)30mg/ml。

注射用氨芐西林在生產(chǎn)的過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生一定數(shù)量的雜質(zhì)，這也會(huì)使得藥品的質(zhì)量受到不利的影響，而當(dāng)前我國(guó)藥品生產(chǎn)的工藝也有了很大的發(fā)展，種類(lèi)也越來(lái)越多，在這樣的情況下，需要選擇最好的工藝來(lái)組織生產(chǎn)，這樣才能保證生產(chǎn)質(zhì)量。

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