黃銳

【摘要】目的：探討定量病理技術對腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者治療的療效。方法：隨機選取2012年1月至2013年12月間到我院接受腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌治療的100例病人，采用定量病理技術和Feulgen染色技術，結(jié)合Cox比例風險回歸模型，對影響腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌的因素進行分析。結(jié)果：核面積、核周長、DNA指數(shù)、核最大直徑、核最小直徑是影響乳腺癌預后的主要因素。結(jié)論：定量病理技術結(jié)合有效統(tǒng)計方法，是判斷腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌治療預后效果有效手段之一。

【關鍵詞】定量病理技術；乳腺癌；預后

【中圖分類號】R737.9 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2015）02-0040-01

腋窩淋巴結(jié)狀況是評價乳腺癌患者預后狀況的一個重要因素，大約有30%的腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者在術后十年內(nèi)面臨著復發(fā)和遠處轉(zhuǎn)移的風險。尋找出淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以外的預后判斷指標，盡早篩選出存在潛在轉(zhuǎn)移風險的患者，給予及時控制，是提高腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌治療療效的關鍵。隨機選取2012年1月至2013年12月間到我院接受腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌治療的100例病人，我們采用定量病理技術和Feulgen染色技術，結(jié)合Cox比例風險回歸模型，對影響腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌的因素進行分析。探討其對腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌預后情況判斷的實用價值。

1 資料與方法

1.1 基本資料

隨機選取2012年1月至2013年12月間到我院接受腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌治療的100例病人，手術之前均符合以下條件：手術前沒有出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移，未經(jīng)化療；臨床、病理和隨訪資料完整；保存有完整腫瘤原發(fā)灶蠟塊。全部病例均為女性，年齡在26到75歲之間。絕經(jīng)前20例，絕經(jīng)后80例。原發(fā)腫瘤≤2cm，62例；2cm<原發(fā)腫瘤≤5cm，35例；原發(fā)腫瘤>5cm，3例。100例病例中，術后五年內(nèi)轉(zhuǎn)移復發(fā)的17例，占17%，均以臨床、CT、B超或者全身骨掃描結(jié)果作為依據(jù)。

1.2治療方法

100例的存檔蠟塊，每一例進行4um厚的連續(xù)切片兩張，在嚴格的質(zhì)量控制標準下分別進行Feulgen和HE染色，經(jīng)過Feulgen染色后細胞核DNA呈現(xiàn)出紫紅色。病例醫(yī)師對HE染色切片進行組織學分級，一級15例，二級41例，三級44例。對Feulgen染色切片進行腫瘤細胞核原位定量測定，把切片放大四百倍，每一例隨機測量大于50的淋巴細胞以及沒有重疊的100到200個腫瘤細胞。測量參數(shù)標準：（1）形態(tài)結(jié)構參數(shù)：核面積、核周長、核最大直徑、核最小直徑以及核形狀因子；（2）DNA倍體分析：每一例的分析都以同一切片中淋巴細胞DNA的平均值為兩倍體的對照值；（3）DNA定量指標：DNA指數(shù)=腫瘤細胞核DNA A值/淋巴細胞核DNA A值。

1.3統(tǒng)計學分析

計量資料采用本次研究中的數(shù)據(jù)處理應用統(tǒng)計學軟件SPSS10.0進行處理；計量資料應用單因素方差分析；計數(shù)資料應用秩和檢驗；數(shù)據(jù)表示采用均數(shù)±標準差（X±s）；若p<0.05，表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

（1）100例乳腺癌病理判斷一致性檢驗：p<0.05，診斷一致性程度理想；（2）細胞核形態(tài)參數(shù)比較：全部手術后五年內(nèi)沒有出現(xiàn)復發(fā)或者遠處轉(zhuǎn)移，除了形狀因子外，兩組之間具有顯著差異（見表1）；（3）細胞核DNA含量以及倍體分布比較：復發(fā)轉(zhuǎn)移組和無復發(fā)轉(zhuǎn)移組倍體分布以及細胞核DNA含量分布具有顯著差異；（4）Cox模型對因素分析：最終結(jié)果表明對腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者預后情況有顯著影響的因素是核面積、核周長、DNA指數(shù)、核最大直徑、核最小直徑。

3.討論

我們對到我院接受腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌治療的100例病人預后情況進行了研究，為了對腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌的預后判斷提供一個可靠客觀的指標，為術后患者的康復提供科學的依據(jù)。

腫瘤細胞核的形態(tài)變化代表了細胞的生物學行為、分化程度以及預后。相關研究表明，決定局部復發(fā)的重要因素是核異質(zhì)性。對于形態(tài)的變化，傳統(tǒng)的做法是進行定性描述，運用圖像分析將其量化，并且可以代表核異質(zhì)性這一特點。通過對本組病例的分析，可以發(fā)現(xiàn)無復發(fā)轉(zhuǎn)移組相對于復發(fā)轉(zhuǎn)移組的細胞核面積、核周長、核最大直徑、核最小直徑乳腺癌??；核形狀因子兩組之間的差異不顯著，表明了單純用形狀因子不能反映出腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌細胞核形態(tài)的變化特點，而需要結(jié)合其他的核參數(shù)進行綜合分析。

對于腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌倍體分析和細胞核的DNA含量，相關科學家研究發(fā)現(xiàn)，二倍體患者的五年生存率要明顯高于非整倍體乳腺癌患者；細胞核DNA的含量過高是部分患者預后較差的原因之一。通過本次研究發(fā)現(xiàn)，復發(fā)轉(zhuǎn)移組乳腺癌的DNA指數(shù)要明顯高于無復發(fā)轉(zhuǎn)移組。

定量病理學是利用多種方法和手段，獲得描述生物微觀形態(tài)或者宏觀組織的數(shù)據(jù)圖像，從量化的角度描述發(fā)病原因、病變特征以及發(fā)病機理。包括了形態(tài)結(jié)構定量、DNA含量以及倍體分析。圖像分析可以獲得核面積、核周長等形態(tài)參數(shù)，保留完整的細胞組織形態(tài)，并且操作簡單，可以使形態(tài)觀察和定量測定同步進行，更加適合臨床中腫瘤病理的研究。我們采取DNA特染技術，能夠真實反映細胞核的DNA含量，提高了待測DNA成分的可測性和表達性。同時，還可以利用石蠟切片，對臨床回顧性資料進行研究，簡單快速穩(wěn)定。

參考文獻

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