黃金洲　王利榮　譚晶

【摘要】：近年來，由于食品安全問題頻頻發(fā)生，所以人們更加關(guān)注農(nóng)藥殘留對于人體的身心健康和環(huán)境的危害。本文綜述了目前國內(nèi)的測試農(nóng)藥殘留色譜分析方法，如氣相色譜法（GC）、液相色譜法（LC）、氣相色譜-質(zhì)譜連用（GC-MS）以及部分新興的色譜分析方法，如毛細(xì)血管電色譜法凝、膠滲透色譜法、免疫親和色譜法等等，對其進行研究和展開介紹。

【關(guān)鍵詞】：農(nóng)藥殘留；色譜分析方法；新興色譜分析法

1 引言

農(nóng)藥殘留是指某一種農(nóng)藥由于具有強烈的化學(xué)穩(wěn)定性，當(dāng)使用一段時間以后很難自我分解，仍有部分殘余摻雜在土壤、作物及環(huán)境中。這些殘留在農(nóng)作物中的農(nóng)藥在食物鏈中具有極為強烈的富集作用，可以在人類和動物機體內(nèi)積存下來從而致使他們慢性中毒，嚴(yán)重威脅著人類的食品安全，這個問題已成為全世界關(guān)注的核心。為了打擊和限制農(nóng)藥的大量使用，維護人民的財產(chǎn)，全世界的政府制定了許多相關(guān)規(guī)定。因此，研究農(nóng)藥殘留分析檢測，對于保障人民生活利益具有很大的幫助。

目前，農(nóng)藥殘留測試方法有很多種，色譜技術(shù)尤為的重要。因為色譜技術(shù)擁有相當(dāng)高的分離效率、應(yīng)用范圍較為廣泛、分析農(nóng)殘速度較快、使用添加樣品用量較少，這個優(yōu)點使其在多種基體中的樣品獲得了較為廣泛的應(yīng)用。

2 氣相色譜法（GC）

在2O世紀(jì)中氣相色譜被用來做分析，60年代開始，此方法被用來測試農(nóng)藥的殘留量。因為色譜技術(shù)擁有相當(dāng)高的分離效率、應(yīng)用范圍廣、分析農(nóng)殘速度較快、使用樣品用量少。因此其在檢測分離氣體與易揮發(fā)或易轉(zhuǎn)化為易揮發(fā)的液體及固體樣品起到了很大的作用。目前該方法現(xiàn)在已經(jīng)成了農(nóng)藥殘留分析中最普遍也是最重要的方法。與此同時，目前用于農(nóng)藥殘留檢測的檢測器有捕獲電子的檢測器、捕獲檢微池電子的檢測器、通過檢驗火焰光度的檢測器（FPD）、檢測脈沖火焰的光度檢測器、檢測氮磷元素的檢測器等等。

謝文（2005）在測定茶葉中的有機磷酸的實驗中，分別對樣品的凈化方法進行相應(yīng)的研究，將農(nóng)藥的殘留利用乙氰提純，將活性炭與硅膠混合成小柱進行凈化，利用擁有火焰光度檢測器的氣相色譜儀將樣品進行測定，分析結(jié)果的特性，發(fā)現(xiàn)具有重現(xiàn)性、良好的精密度，較少的干擾雜質(zhì)。蒜苗、大蒜、姜等含硫蔬菜在進行切碎的同時其內(nèi)的活性酶會釋放出硫化物，這些所釋放出來的硫化物不容易分解，與此同時在氣相色譜電子捕獲檢測器（GC-ECD）上能夠產(chǎn)生很強烈的反應(yīng)，會出現(xiàn)假陽性，造成誤判。

3 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MC）

氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC—MS）不僅擁有氣相色譜和質(zhì)譜的各種優(yōu)點，同時還完善了它們各自的缺點，因此擁有著很高的靈敏度、分析樣品速度快、鑒別樣品能力強等優(yōu)點，他可以同步的進行待測樣品的分離與鑒定，因此在當(dāng)前的農(nóng)藥檢測中運用廣泛。鄭孝華（2004）利用微波輔助萃取和液液微萃取技術(shù)讓二者相結(jié)合，充分利用氣相色譜一質(zhì)譜分析技術(shù)，開創(chuàng)了了一種便捷、應(yīng)用方便、回收率較高的蔬菜中多種擬除蟲菊酯殘留的檢測技術(shù)。通過基體標(biāo)準(zhǔn)加入回收實驗，并加入其他9種菊酯的l5ng/g的加樣能夠看出其回收率均在80% 以上，并且在國際標(biāo)準(zhǔn)要求的最大殘留限量中可以看出良好的線性關(guān)系，這樣能夠使蔬菜、水果中的農(nóng)殘達到達標(biāo)水準(zhǔn)。陳長弓等（2006）利用GCMS測定方法測定了麝香保心丸中的異龍腦、龍腦苯甲酸芐酯。將正己烷作為相應(yīng)的溶劑，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法選擇性離子檢測（SIM）方式對其中的麝香保心丸中異龍腦、龍腦、苯甲酸芐酯進行含量的測定。DB5（0.1μm*0.25mm*30m）石英毛細(xì)管柱；85-265℃的程序升溫；同時選擇m/z95為龍腦、異龍腦作為相應(yīng)的檢測離子，m/z212為苯甲酸芐酯作為相應(yīng)的檢測離子。結(jié)果顯示龍腦、異龍腦、苯甲酸芐酯的線性范圍分別為0.02-20.00μm/ml（r=0.99993）、0.024-24.00μm/ml（r=0.9990）、0.050-50.00μm/ml（r=0.9992）。平均回收率為97.00；異龍腦96.30；苯甲酸芐酯98.20。說明該方法快速、準(zhǔn)確、有效，可用于麝香保心丸的質(zhì)量控制。

4 高效液相色譜法（HPLC）及液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法（LC—MS）

當(dāng)前，在農(nóng)藥殘留的檢測與分析中，高效液相色譜法已經(jīng)慢慢成為一種主要的分析手段，它擁有較高的分離效率、分析速度快、測試的靈敏度高與應(yīng)用范圍廣的優(yōu)點，尤其適合于非揮發(fā)性、大分子、強極性和熱穩(wěn)定性差的農(nóng)藥的分離分析。楊容（2004）等為了測定食物中的異丙威和溴氰菊酯其利用基質(zhì)固相分散技術(shù)和高效液相色譜法進行分析表征，測得異丙威檢測限為1.2ng/g，回收率大約為89.11% ，溴氰菊酯檢測限約為2.5ng/g，回收率大約為83.92% 。陳珠靈（2005）等為了對水果中甲基對硫磷、乙基對硫磷、甲拌磷的有效測定其采用了高效液相色譜法，利用shim—pack和VP—ODS作為分離柱，流動相為甲醇：V水，=85：15，其紫外檢測波長通常為250nm，利用此方法所測得的多種有機磷在0.02～2.Oμg/L范圍內(nèi)具有著很好的線性關(guān)系，并且檢出限達（1.0—5.0）μg/L，回收率在97.44%～ 101.22% 。利用SPE與HPLC來分析農(nóng)藥殘留在當(dāng)前的形勢下已經(jīng)成為了一中趨勢，SPE具有著單一萃取方法所不能替代的優(yōu)點。

因為HPLC具有一定的選擇性，液相色譜儀就會在測試樣品中有著一定的局限性?？紤]到HPLC高靈敏度的眾多優(yōu)點，當(dāng)前最熱門的檢測方法是使用液質(zhì)聯(lián)用方法，此方法中質(zhì)譜檢測器起到了關(guān)鍵作用。

5 新興起的色譜方法

近年，色譜技術(shù)的發(fā)展尤為迅猛，大量新起興的色譜技術(shù)在生物、醫(yī)藥、化工等領(lǐng)域中已有較多應(yīng)用變性高效液相色譜、高速逆流色譜、全二維氣相色譜質(zhì)譜等：國內(nèi)農(nóng)藥殘留的色譜分析法研究進展把物相色譜和質(zhì)譜以及其串聯(lián)質(zhì)譜并用、超流體色譜等。

毛細(xì)管電色譜（CEC）是一種當(dāng)代新發(fā)展的微柱電分離技術(shù)，它是石英毛細(xì)管中填充高效的液相色譜，利用高壓電源。這種分離模式包含了毛細(xì)管電泳和HPLC的各自的優(yōu)點，使其擁有了良好的選擇性和分離柱效高等優(yōu)點，常用于手性化合物的拆分，近幾年開始用于農(nóng)藥分離。

免疫親和色譜是指利用抗體或者與抗體相關(guān)的材料作為固定相的色譜?？贵w對抗原性物質(zhì)的選擇結(jié)合，使該技術(shù)越來越多地應(yīng)用于生物物質(zhì)以及非生物物質(zhì)的分離、純化和分析。與HPLC結(jié)合的免疫親和和色譜稱為高效免疫親和色譜。將待測樣品通過色譜柱，其中待測抗原以及類似物與固定的抗體結(jié)合，其他樣品基質(zhì)由于不與固定相結(jié)合而被除去。這樣，結(jié)合的待測物質(zhì)被洗脫以后利用在線或非在線的方法直接測定。測定方法一般采用紫外-可見吸收光譜法和熒光光譜法等。與傳統(tǒng)的免疫分析相比，該技術(shù)具有操作簡單、分析快速、精密度高且可以實現(xiàn)自動分析等的優(yōu)點。但是，采用該方法時需要選擇合適的抗體固定方式，也就是說在洗脫待測抗原時應(yīng)保證固定的抗體不被解離下來。一般來講，如果用蛋白A或蛋白G作為抗體支持擔(dān)體，由于抗體與它們之間是通過弱的吸附作用相結(jié)合，因此這種固定方式的抗體在待測物洗脫或柱子再生時容易流失。比較好的抗體固定方法是通過共價結(jié)合的方式將抗體與支持擔(dān)體連接，或首先將蛋白A或蛋白G固定化，然后通過交聯(lián)的方法將抗體共價結(jié)合到蛋白A或蛋白G上，另外一種常用方法是將生物素化的抗體與固定的親和素結(jié)合。

6 展望

近些年來，在農(nóng)藥的使用已經(jīng)變成了復(fù)合農(nóng)藥的利用，因此，在農(nóng)藥殘留的檢測當(dāng)中也變得更加嚴(yán)格。從而導(dǎo)致色譜技術(shù)與其他高效的技術(shù)進行聯(lián)合應(yīng)用。這對我國的農(nóng)藥殘留檢測提出了更高的要求，所以我國色譜技術(shù)必將向著靈活、可靠、多用型、環(huán)保等許多性能上發(fā)展。

【參考文獻】

[1] 金維平，曹志林.國內(nèi)農(nóng)藥殘留的色譜分析法研究進展[J].計量與測試技術(shù)，2007，1：15-18.

[2]沈強.等.農(nóng)藥殘留分析研究[J].農(nóng)業(yè)科技與信息，2007，06：40～42.

[3]周爽.用GC—MS法測定食品中11種有機磷農(nóng)藥的殘留[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志.2008，18（3）：442～443.