胡桂梅　葉國良　秦麗君

Stathmin1蛋白在胃癌演變過程中的表達意義及與幽門螺桿菌感染關(guān)系

胡桂梅葉國良秦麗君

目的 探討Stathmin1蛋白在胃癌演變過程中的表達變化，了解其與幽門螺桿桿菌的關(guān)系。方法 應(yīng)用免疫組化法檢測進展期胃癌、早期胃癌、上皮內(nèi)瘤變、慢性胃炎黏膜組織中Stathmin1蛋白的表達水平。用14C呼氣試驗和組織學(xué)改良Giemsa染色方法聯(lián)合檢測胃癌中幽門螺桿菌（Hp）感染情況，分析Stathmin1蛋白與幽門螺桿菌感染的關(guān)系。結(jié)果 Stathmin1在胃癌中表達與胃炎組、上皮內(nèi)瘤變組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），與早期胃癌組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0. 05）。胃癌中stathmin1的表達與年齡、性別無明顯關(guān)系，與分化類型、浸潤深度、淋巴轉(zhuǎn)移、TNM分期差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），Hp感染者stathmin1蛋白表達量明顯增多（P＜0.05）。結(jié)論 Stathmin1蛋白表達與腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移惡性生物學(xué)行為的指標呈正相關(guān)，可作為反映胃癌惡性表型及預(yù)后重要指標，亦可作為早期胃癌的篩查指標。

胃癌 上皮內(nèi)瘤變 Stathmin1 幽門螺桿菌

Stathmin1蛋白是一種高度保守的胞質(zhì)磷酸蛋白，通過微管解聚活性，控制細胞周期，改變細胞的增殖、分化，活性等生物學(xué)行為［1］。近年來國內(nèi)外研究證實在白血病、淋巴瘤、前列腺癌、卵巢癌、肺癌、宮頸癌、肝癌、成骨肉瘤等多種腫瘤中，Stathmin1均有高水平表達，抑制其表達可以干擾惡性細胞的增殖［2］。本資料主要通過檢測進展期胃癌、早期胃癌、上皮內(nèi)瘤變、慢性胃炎黏膜組織中Stathmin1蛋白的表達水平和分布情況，探討是stathmin1蛋白在胃癌演變過程中的表達變化和幽門螺桿菌（Hp）的關(guān)系。

1　臨床資料

1.1一般資料 收集本院2011年6月至2013年12月胃癌手術(shù)切標本80例，其中男52例，女28例；年齡39～78歲，平均（59.3±8.9）歲。胃癌分期采用1997年國際抗癌聯(lián)盟（UICC） 制定的TNM 分期法。所有胃癌病例均經(jīng)病理證實，并附有完整的臨床病理資料。患者術(shù)前均未接受化療或放療。收集同年胃鏡活檢標本共120例，其中慢性胃炎60例，上皮內(nèi)瘤變60例。同年在本院行內(nèi)鏡下黏膜剝離（ESD）術(shù)后病理證實為早期胃癌標本40例。

1.2Hp檢查 采用14C呼氣試驗和組織學(xué)改良Giemsa染色方法聯(lián)合檢測Hp，兩項檢查結(jié)果均為陽性者判定為陽性，全部為陰性者判定為Hp陰性，兩種檢測方法結(jié)果不一致的病例被除外。

1.3試劑與方法 stathmin1 單克隆抗體購自 ABD Serotec公司，S P 試劑盒和DAB 染色劑均購自北京中山生物技術(shù)有限公司。常規(guī)免疫組織化學(xué)SP 法（ 具體步驟按試劑盒說明書進行），DAB 顯色，用已知的陽性片作陽性對照，用PBS 代替一抗作陰性對照。

1.4結(jié)果判斷 Stathmin1蛋白染色主要定位于細胞漿上，隨機選擇10個高倍（×400）視野，根據(jù)染色程度及染色細胞百分率進行分析評分，陽性細胞百分率：≤10%：1分；10%～50%：2分；≥50%：3分。腫瘤顯色深淺：基本不著色，0分；色淡，1分；色中，2分；色深，3分。計算兩者乘積，得0分或1分為陰性（-），得2、3或4分為陽性（+），≥6分為強陽性（++）。所有切片均由2位有經(jīng)驗的病理醫(yī)師，經(jīng)仔細閱片2次，保證了結(jié)果的可重復(fù)性。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 采用 SPSS 17.0 統(tǒng)計軟件。計量資料以（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1Stathmin1 在胃炎、癌前病變及癌組織中的表達情況 見表1。

表1　Stathmin1在胃炎、癌前病變及胃癌中的表達情況（n）

2.2Stathmin1表達與胃癌臨床病理特征的關(guān)系 胃癌中stathmin1的表達與年齡、性別無明顯關(guān)系（P＞0.05），與分化類型、浸潤深度、淋巴轉(zhuǎn)移、TNM分期差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），Hp感染者stathmin1蛋白表達量明顯增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

3　討論

胃癌是世界上最常見的消化道惡性腫瘤之一，胃癌的發(fā)生是多種因素共同作用的結(jié)果。Stathmin1蛋白是一種主要的微管不穩(wěn)定蛋白，通過調(diào)節(jié)微管系統(tǒng)的動力學(xué)平衡，控制細胞周期，并以此改變細胞的增殖、分化、活性等生物學(xué)行為，其表達情況與腫瘤細胞增殖及轉(zhuǎn)移有關(guān)［3］。本資料結(jié)果顯示，Stathmin1在慢性胃炎中表現(xiàn)為表達減少或缺失，在胃癌中表達水平高，多呈陽性或強陽性表達，與上皮內(nèi)瘤變組比較存在明顯差異。統(tǒng)計分析結(jié)果顯示，Stathmin1胃癌中的表達水平與腫瘤分化類型、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期等臨床病理參數(shù)均高度相關(guān)（ P＜0. 05），在低分化、有漿膜侵犯、淋巴結(jié)、TNM 分期晚的胃癌中Stathmin1表達強明顯升高，提示Stathmin1 表達水平上升參與胃癌的發(fā)展過程，Stathmin1蛋白水平越高，腫瘤的侵襲力越強，越易發(fā)生轉(zhuǎn)移。Jeon TY等［4］認為Stathmin1的表達可作為評估胃癌預(yù)后的指標和胃癌治療靶向基因。因此，Stathmin1的高表達在胃癌的預(yù)后及發(fā)生發(fā)展中均發(fā)揮了重要作用，

1994 年世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機構(gòu)將Hp列為人類I 類（即肯定的）致癌因子，相關(guān)研究證實Hp感染是胃癌發(fā)生的最重要危險因素之一，70%的胃癌發(fā)生與Hp感染有關(guān)［5］。本資料發(fā)現(xiàn)在Hp陽性的胃癌中stathmin1表達明顯增多，作者推測是否Hp感染可促使stathmin1的表達。由于Stathmin1蛋白可以與多種抑癌基因如p53或p27等相互作用，引起細胞生物學(xué)改變，從而改變細胞的增殖、分化、活性等生物學(xué)行為。因此作者推測，Hp感染可能通過影響p53、p27等蛋白表達從而促使stathmin1蛋白的表達增加。

Stathmin1在胃上皮內(nèi)瘤變中表達量開始出現(xiàn)異常，但在胃癌中其表達量明顯升高，其蛋白表達與腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移惡性生物學(xué)行為的指標呈正相關(guān)，提示Stathminl可作為反映胃癌惡性表型及預(yù)后重要指標，也可作為早期胃癌的篩查指標。

1 Rubin CI， Arweh GF. The role of Stathmin in the regulation of the cell cycle.J Cell Biochem，2004，93（2）：242.

2 Ghosh R， Gu G， Tillman E， et al. Increased expression and differential phosphorylation of Stathmin may promote prostate cancer progression. Prostate， 2007，67（10）：1038～1052.

3 Singer S， Ehemann V， Brauckhoff A， et al. Protumorigenic overexpression of stathmin/Op18 by gain-of-function mutation in p53 in human hepatocarcinogenesis. Hepatology，2007， 46（3）： 759～768.

4 Jeon TY， Han ME， Lee YW，et al. Overexpression of stathmin1 in the diffuse type of gastric cancer and its roles in proliferation and migration of gastric cancer cells. Br J Cancer，2010，102（4）：710～718.

5 Peek RM Jr， Blaser MJ. Helicobacter pylori and gastrointestinal tract adenocarcinomas. Nat Rev Cancer，2002，2（1）：28～37.

315020寧波大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院消化科