陳忠其，陸 玲，馮建洪，童亞群

（佛岡縣人民醫(yī)院病理科，廣東 佛岡 511600）

胃癌的發(fā)病率極高，在我國(guó)惡性腫瘤發(fā)病比例中排在第一位，其早期臨床癥狀不甚明顯，極少患者出現(xiàn)惡心或者是類似潰瘍性疾病癥狀。在進(jìn)展期，此病癥最常見(jiàn)的表現(xiàn)即為疼痛以及體重下降［1－2］?；颊叽蠖鄷?huì)表現(xiàn)出較為明顯的上消化道病癥，例如上腹部出現(xiàn)不適或者是用餐后易出現(xiàn)腹脹。隨著病情不斷發(fā)展，患者腹部疼痛癥狀會(huì)日益嚴(yán)重，食欲逐漸降低并且出現(xiàn)乏力癥狀，對(duì)患者的身心健康造成極大的影響［3－4］。本文通過(guò)對(duì) Bcl－2以及 Bax在胃癌與癌前病變組織中的表達(dá)情況進(jìn)行研究，旨在為臨床更加深入地認(rèn)識(shí)胃癌提供一些理論數(shù)據(jù)支持，報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 臨床資料

選擇2012年2月至2014年2月佛岡縣人民醫(yī)院病理科胃黏膜活檢以及手術(shù)標(biāo)本130例作為研究對(duì)象，50例為胃癌患者標(biāo)本（胃癌組）；10例為表現(xiàn)正常的胃黏膜標(biāo)本（正常組）；50例為表現(xiàn)為慢性萎縮性的胃炎并伴有腸化生癥狀標(biāo)本（腸化生組）；20例表現(xiàn)為異型增生標(biāo)本（異型增生組）。將130例實(shí)驗(yàn)所需標(biāo)本用10%的福爾馬林進(jìn)行固定，用石蠟將其行包埋處理，并作出4μm的切片。實(shí)驗(yàn)所需抗體分別為兔抗人Bcl－2多克隆抗體以及兔抗人Bax多克隆抗體，試劑盒為免疫組化試劑盒，DAB顯色試劑盒以及TUNEL凋亡試劑盒。均購(gòu)自于武漢博士德生物有限公司。

1.2 研究方法

使用免疫化學(xué)SP方式對(duì)Bcl－2以及Bax蛋白質(zhì)表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)。將準(zhǔn)備好的石蠟切片進(jìn)行脫蠟處理，之后將3%的過(guò)氧化氫在室溫下放置10min，將其含有的內(nèi)源性酶進(jìn)行滅活。通過(guò)微波操作使得抗原得到修復(fù)，再向其中加入封閉液在室溫中放置10min。向其中加入一抗以及生物素化的二抗，DAB顯色，使用蘇木精對(duì)其進(jìn)行復(fù)染，行脫水以及封片處理。使用TUNEL方式對(duì)細(xì)胞凋亡情況進(jìn)行檢測(cè)。將石蠟切片給予脫蠟處理，使用蛋白酶K將其消化處理10min，加入封閉液在室溫下放置30min，再加入TUNEL放置1h。DAB顯色以及封色之后，在光學(xué)顯微鏡下觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，棕黃色物質(zhì)為細(xì)胞核。在顯微鏡視野中選擇5個(gè)高倍視野進(jìn)行計(jì)數(shù)，記錄各個(gè)觀察視野下每100個(gè)細(xì)胞中凋亡細(xì)胞的數(shù)目。細(xì)胞凋亡指數(shù)AI值＝（凋亡數(shù)／總數(shù)）×100%。

1.3 觀察指標(biāo)

胃癌以及癌變前病變組織中的Bcl－2以及Bax蛋白質(zhì)的表達(dá)情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 胃癌以及癌變前病變組織中Bcl－2與Bax蛋白質(zhì)的表達(dá)

癌變前的Bcl－2陽(yáng)性率明顯低于胃癌組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。Bax陽(yáng)性率明顯高于胃癌組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 胃癌以及癌變前病變組織中Bcl－2與Bax蛋白質(zhì)的表達(dá)

2.2 胃癌以及癌變前Bcl－2蛋白表達(dá)情況和細(xì)胞凋亡的關(guān)系

Bcl－2蛋白在胃癌以及癌變前陽(yáng)性率明顯低于陰性率，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。經(jīng)過(guò)分析，Bcl－2蛋白陽(yáng)性率和細(xì)胞凋亡情況呈負(fù)相關(guān)（r＝－0.786，P＝0.000）。見(jiàn)表2。

表2 胃癌以及癌變前Bcl－2蛋白表達(dá)情況和細(xì)胞凋亡的關(guān)系

表2 胃癌以及癌變前Bcl－2蛋白表達(dá)情況和細(xì)胞凋亡的關(guān)系

組別 n Bcl－2陽(yáng)性組 Bcl－2陰性組例數(shù) AI例數(shù) AI t P腸化生組50 14 6.34±0.95 36 9.96±1.44 8.672 0.000異型增生組 20 8 4.98±1.02 12 6.85±2.26 2.182 0.043胃癌組50 30 1.08±1.04 20 3.96±2.12 6.397 0.000

2.3 胃癌以及癌變前Bax蛋白表達(dá)情況和細(xì)胞凋亡的關(guān)系

Bax蛋白在胃癌以及癌變前陽(yáng)性率明顯高于陰性率，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。經(jīng)過(guò)分析，Bax蛋白陽(yáng)性率和細(xì)胞凋亡情況呈正相關(guān)（r＝0.835，P＝0.000）。見(jiàn)表3。

表3 胃癌以及癌變前Bax蛋白表達(dá)情況和細(xì)胞凋亡的關(guān)系

表3 胃癌以及癌變前Bax蛋白表達(dá)情況和細(xì)胞凋亡的關(guān)系

組別 n Bax陽(yáng)性組 Bax 陰性組例數(shù) AI例數(shù) AI t P腸化生組50 28 10.76±1.18 22 7.17±2.25 7.277 0.000異型增生組 20 4 7.75±1.76 16 3.84±0.71 7.228 0.000胃癌組50 7 4.63±2.17 43 1.52±1.23 5.518 0.000

3 討論

Bcl－2因子作為在細(xì)胞發(fā)生凋亡過(guò)程中具有重要意義的因子，具有對(duì)細(xì)胞凋亡過(guò)程進(jìn)行抑制的作用。Bax和Bcl－2因子在人體細(xì)胞中聯(lián)合成為二聚體，Bax過(guò)表達(dá)能夠?qū)cl－2的保護(hù)機(jī)制產(chǎn)生拮抗作用，進(jìn)而使細(xì)胞發(fā)生凋亡，因此，Bax對(duì)細(xì)胞凋亡具有一定的誘導(dǎo)作用。胃黏膜發(fā)生癌變之前，常有較為活躍的細(xì)胞增殖以及凋亡現(xiàn)象共同發(fā)生的情況，在推進(jìn)過(guò)程中，胃黏膜內(nèi)是以細(xì)胞增生為主要反應(yīng)，細(xì)胞凋亡反應(yīng)較少［5－6］。這一現(xiàn)象成為胃癌病癥產(chǎn)生的重要基礎(chǔ)。而在胃黏膜由正常轉(zhuǎn)為癌前病變直至胃癌的過(guò)程中，Bcl－2對(duì)于細(xì)胞的凋亡過(guò)程具有負(fù)調(diào)節(jié)功能，Bax與Bcl－2因子使得細(xì)胞產(chǎn)生凋亡的作用受到抑制。這兩種因子的含量決定了細(xì)胞是否發(fā)生凋亡。本文研究結(jié)果顯示:癌變前的Bcl－2陽(yáng)性率明顯低于胃癌組情況。Bax陽(yáng)性率明顯高于胃癌組。同時(shí)，Bcl－2蛋白在胃癌以及癌變前陽(yáng)性率明顯低于陰性率，經(jīng)過(guò)分析，Bcl－2蛋白陽(yáng)性率和細(xì)胞凋亡情況呈負(fù)相關(guān)。Bax蛋白在胃癌以及癌變前陽(yáng)性率明顯高于陰性率，經(jīng)過(guò)分析，Bax蛋白陽(yáng)性率和細(xì)胞凋亡情況呈正相關(guān)。這說(shuō)明Bcl－2蛋白具有對(duì)細(xì)胞凋亡過(guò)程進(jìn)行抑制的功能，其含量的增加以及Bax蛋白含量的下降可能和胃癌病癥中細(xì)胞凋亡過(guò)程受到阻礙有關(guān)，而胃癌發(fā)病機(jī)制可能是細(xì)胞的正常凋亡過(guò)程受到阻礙。另外，Bax蛋白表達(dá)的陽(yáng)性率和細(xì)胞凋亡數(shù)值有正相關(guān)關(guān)系，說(shuō)明Bax蛋白對(duì)細(xì)胞凋亡的過(guò)程有促進(jìn)功能，胃黏膜的上皮細(xì)胞正常的數(shù)值比例失調(diào)，極大可能是最后只是胃癌病癥產(chǎn)生的分子性基礎(chǔ)。

綜上所述，Bcl－2蛋白具有對(duì)細(xì)胞凋亡過(guò)程進(jìn)行抑制的功能，Bax蛋白對(duì)細(xì)胞凋亡的過(guò)程有促進(jìn)功能。兩者含量的比例決定細(xì)胞凋亡是否產(chǎn)生，進(jìn)而決定胃癌的發(fā)展程度。這兩者對(duì)于胃癌的產(chǎn)生具有重要意義，對(duì)于胃癌病癥的預(yù)防以及診治價(jià)值較高。

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