李云

[摘要] 目的 探討分析液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV（human papillomavirus 人乳頭狀瘤病毒）基因分型檢測(cè)在宮頸癌前病變篩查中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 抽取在2013年1月—2014年8月間該院收治的380例經(jīng)液基細(xì)胞學(xué)檢查有異常的為非典型鱗狀上皮細(xì)胞及以上的患者，對(duì)這些患者進(jìn)行液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV（human papillomavirus 人乳頭狀瘤病毒）基因分型檢測(cè)，對(duì)研究結(jié)果進(jìn)行回顧性對(duì)比分析。結(jié)果 檢查結(jié)果為非典型鱗狀上皮細(xì)胞及以上患者同時(shí)合并HPV 陽(yáng)性患者有130例， 其中ASCUS（非典型鱗狀上皮細(xì)胞）、LSIL（低度鱗狀上皮內(nèi)病變）、HSIL（高度鱗狀上皮內(nèi)病變）、SCC（人鱗狀細(xì)胞癌）的所占百分比分別為78（60%）、40（30.77%）、7（5.38%）、5（3.85%）；130例患者中 HPV高危型患者有48例，AUSCS、LISL、HISL、SCCHPV高危型患者所占百分比分別為22（27.85%）、17（42.5%） 、4（57.14%） 、5（100%），研究結(jié)果顯示SCC和HPV高危型感染有直接的聯(lián)系。HPV高危型患者有48例，平均年齡43.6歲； HPV低危型患者有 82例， 平均年齡32.7歲，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 采用液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV基因分型檢測(cè)能夠有效的診斷出宮頸癌病變，數(shù)據(jù)比較準(zhǔn)確可靠，值得在臨床上推廣應(yīng)用。

[關(guān)鍵詞] 液基細(xì)胞學(xué)；HPV基因分型檢測(cè)；宮頸癌；前篩查；臨床應(yīng)用

[中圖分類(lèi)號(hào)] R737.33 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2015）03（a）-0008-02

Discussion on the Application of Liquid Based Cytology and HPV Genotyping in the Screening of Cervical Precancerous Lesions

LI Yun

Department of Obstetrics and Gynecology， The Second Hospital of Jintan， Jintan， Jiangsu Province， 213200， China

[Abstract] Objective To investigate the clinical application value of liquid based cytology combined with human papilloma virus（HPV） genotyping for the screening cervical precancerous lesions. Methods 380 cases with abnormal atypical squamous cells and more detected by liquid based cytology in our hospital from January 2013 to August 2014 were selected. HPV genotyping was performed in all the patients. And the results were analyzed comparatively and retrospectively. Results The test results showed that 130 cases with atypical squamous cells and more and positive HPV， which included 78 cases with atypical squamous cells of undetermined significance（ASCUS）， 40 cases with low-grade squamous intraepithelial lesion（LSIL）， 7 cases with high-grade squamous intraepithelial lesion（HSIL）， 5 cases with squamous cell carcinoma （SCC）， accounting for 60%， 30.77%， 5.38%， 3.85%， respectively. Of the 130 cases， 48 cases had high risk HPV， and among them， the number of patients with high risk AUSCS， LISL， HISL， SCCHPV was 22 cases， 17 cases， 4 cases， 5 cases， respectively， accounting for 27.85%， 42.5%， 57.14%， 100%， respectively， the results of the study showed that SCC was directly related to high-risk infection of HPV.There were 48 high risk HPV patients with an average age of 43.6， and 82 low risk HPV patients with an average age of 32.7， with statistically significant difference（P<0.05）. Conclusion Liquid based cytology combined with HPV genotyping can effectively diagnose the cervical cancer lesions， and the data are comparatively accurate and reliable， so it is worthy of clinical application and promotion.

[Key words] Liquid based cytology； Detection of HPV genotyping； Cervical precancerous screening； Clinical application

宮頸癌是臨床上一種比較常見(jiàn)的惡性腫瘤，在中老年患者中的發(fā)病率比較高，隨著人們生活習(xí)慣的改變，宮頸癌的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，而且發(fā)病人群中青年人數(shù)在逐年增加。宮頸癌患者的臨床癥狀主要表現(xiàn)為陰道接觸性出血、陰道排液、排液增多甚至繼發(fā)感染等[1]。陰道出血量因人而異，主要根據(jù)患者病灶的范圍和病情的程度而決定。導(dǎo)致宮頸癌的因素尚不明確，主要和早婚、早育、性生活紊亂以及包皮垢中的膽固醇經(jīng)細(xì)菌作用后可轉(zhuǎn)變?yōu)橹掳┪镔|(zhì)等因素有關(guān)[2]。在臨床上如何及早的診斷和治療宮頸癌一直備受關(guān)注的課題，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步和發(fā)展，宮頸癌的診斷和檢測(cè)方法也在不斷的更新，HPV是人乳頭瘤病毒，它的持續(xù)感染是造成癌前病變和宮頸癌發(fā)病的主要的致病因子。為探討分析液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV（human papillomavirus 人乳頭狀瘤病毒）基因分型檢測(cè)在宮頸癌前病變篩查中的臨床應(yīng)用價(jià)值，該院2012年1月—2014年8月間就液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV基因分型檢測(cè)在宮頸癌前病變篩查中的臨床應(yīng)用價(jià)值這個(gè)課題展開(kāi)研究，取得了令人滿(mǎn)意的成果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽取該院收治的380例經(jīng)液基細(xì)胞學(xué)檢查有異常的為非典型鱗狀上皮細(xì)胞及以上的患者，患者年齡為20～75歲，平均為（41.8±3.73）歲，這些患者中排除妊娠期、子宮切除、有盆腔放射治療史、急性生殖道炎癥、患有嚴(yán)重的內(nèi)外科疾病以及惡性腫瘤患者，所有患者都為自愿接受研究治療。對(duì)所有患者都進(jìn)行HPV基因分型檢測(cè)。

1.2 方法

儀器和試劑：TCT儀，選自美國(guó)新柏氏公司，HPV分型基因芯片試劑盒選用深圳凱普生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的，電子陰道鏡的類(lèi)型為SLC—2000B型[3]。

液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本的采集：清洗患者外陰，用TCT取樣器在患者的宮頸和頸管部位輕輕抵住，然后按照順時(shí)針的方向旋轉(zhuǎn)8圈后，取出放入到保存液瓶?jī)?nèi)振蕩搖勻后經(jīng)過(guò)一系列的規(guī)范化的處理，制成薄層的圖片，用95%的酒精固定后，HE（hematoxylin-eosin staining 伊紅）染色，中性樹(shù)膠封片[4]。

HPV檢測(cè)方法：患者在月經(jīng)開(kāi)始前的3 d之內(nèi)不能進(jìn)行陰道的沖洗和放藥治療，2 d內(nèi)不能進(jìn)行性生活。用取樣刷在患者的宮頸口部位按照逆時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)動(dòng)3圈，然后停留10 s，將取樣刷在放有細(xì)胞保存液的試管中，由專(zhuān)業(yè)人士進(jìn)行處理和送檢[5]。

1.3 觀(guān)察指標(biāo)

臨床細(xì)胞學(xué)診斷指標(biāo)根據(jù)2001年TBS（宮頸細(xì)胞學(xué)）診斷標(biāo)準(zhǔn)，即在正常范圍內(nèi)的、意義不明的ASCUS、低度鱗狀上皮病變、高度鱗狀上皮病變、鱗狀細(xì)胞癌，除了在正常范圍內(nèi)的，其余均為陽(yáng)性[6]。

HPV基因分型檢測(cè)指標(biāo)：當(dāng)HPV單一性的感染時(shí)，可以在模芯片的對(duì)應(yīng)位置處看到一個(gè)藍(lán)色的斑點(diǎn)，如果存在雙重或者多重的感染，則能看到兩個(gè)或者多個(gè)有顏色的斑點(diǎn)[7]。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

研究中的基本的數(shù)據(jù)都采用SPSS 12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)數(shù)資料進(jìn)行χ2值檢驗(yàn)，以率（%）表示。

2 結(jié)果

檢查結(jié)果為非典型鱗狀上皮細(xì)胞及以上患者同時(shí)合并HPV 陽(yáng)性患者有130例， 其中ASCUS、LSIL、HSIL、SCC的所占百分比分別為79（60.77%） 、40（30.77%）、7（5.38%） 、5（3.85%），見(jiàn)表1。

130例患者中 HPV高危型患者有48例，AUSCS、LISL、HISL、SCCHPV高危型患者所占百分比分別為22（27.85%）、17（42.5%） 、4（57.14%） 、5（100%），而在非典型鱗狀上皮細(xì)胞及以上患者同時(shí)合并HPV 陽(yáng)性130例患者中，SCC患者5例，全部為高危型患者，即顯示SCC和HPV高危型感染有直接的聯(lián)系。HPV高危型患者有48例，平均年齡43.6歲； HPV低危型患者有 82例， 平均年齡32.7歲，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

表1 液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)結(jié)果情況分析

3 討論

該院對(duì)液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV基因分型檢測(cè)在宮頸癌前篩查中的應(yīng)用展開(kāi)研究，研究結(jié)果顯示SCC和HPV高危型感染有直接的聯(lián)系，而且患者年齡在很大程度上和HPV感染的程度有很大的聯(lián)系。高危型HPV病毒可以從感染到癌變的全過(guò)程中被檢測(cè)出，同時(shí)能夠確定已經(jīng)發(fā)生細(xì)胞形態(tài)改變者的病因；液基細(xì)胞學(xué)能檢測(cè)已經(jīng)發(fā)生的細(xì)胞學(xué)改變， 可判斷是否進(jìn)入臨床期，兩者協(xié)同作用，效果顯著。

宮頸癌是臨床上一種比較常見(jiàn)的惡性腫瘤，目前宮頸癌的發(fā)病率呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，而且年輕患者的人數(shù)也在不斷的增加，所以，對(duì)宮頸癌進(jìn)行及早的篩查、診斷和治療則顯得至關(guān)重要。采用液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV基因分型檢測(cè)對(duì)宮頸癌進(jìn)行篩查的應(yīng)用前景比較廣闊，HPV在目前的臨床應(yīng)用中具有較高的假陰性率，作為導(dǎo)致宮頸癌發(fā)病的重要因素，HPV基因分型檢測(cè)的結(jié)果在一定程度上顯得至關(guān)重要，但是部分的假陰性率會(huì)對(duì)結(jié)果造成干擾，所以逐漸的在臨床中被液基細(xì)胞學(xué)檢查所代替[8]。

液基細(xì)胞學(xué)檢查是采用液基薄層細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)宮頸細(xì)胞并進(jìn)行細(xì)胞學(xué)分類(lèi)診斷，它是目前臨床上使用較為廣泛的一種技術(shù)，宮頸防癌細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)宮頸癌細(xì)胞的檢出率為100%，同時(shí)還能發(fā)現(xiàn)部分癌前病變，微生物感染如霉菌、滴蟲(chóng)、病毒和衣原體等，液基測(cè)試子宮頸細(xì)胞樣本的數(shù)量，可以明顯提高癌變細(xì)胞的檢測(cè)率，減輕患者由于擔(dān)心被二次檢測(cè)而引起的擔(dān)心。人乳頭狀瘤病毒（HPV）與宮頸癌關(guān)系密切，宮頸癌是婦女第二大致死癌病，臨床證明95%～99.7%的宮頸癌病例和高危型HPV病毒感染有關(guān)，高危型HPV導(dǎo)致癌病的機(jī)會(huì)較高，科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)至少有20種高危型HPV與95%的早期浸潤(rùn)和浸潤(rùn)性子宮頸癌有關(guān)。HPV感染，特別是高危型HPV感染，與宮頸癌的發(fā)生存在明確關(guān)系。對(duì)HPV病毒感染進(jìn)行準(zhǔn)確的檢測(cè)可提高宮頸癌前病變篩查的敏感性，同時(shí)改善婦女宮頸癌的防治。宮頸癌早期癥狀不明顯，篩查預(yù)警對(duì)早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌，降低死亡率極為重要。

[參考文獻(xiàn)]

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[2] 宗曉亮，申艷霞，賈志霞.液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV基因分型檢測(cè)在宮頸癌前病變篩查中的應(yīng)用分析[J].現(xiàn)代診斷與治療，2013，24（12）：2743-2745.

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（收稿日期：2014-11-25）