易潯飛　張靜蘭　劉飛　江裕

抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體在麩質(zhì)敏感性腸病診斷中的應(yīng)用

易潯飛張靜蘭劉飛江裕

作者單位：350025福州市，南京軍區(qū)福州總醫(yī)院全軍臨床檢驗醫(yī)學(xué)研究所（易潯飛張靜蘭劉飛）350007福州市，福州市第二醫(yī)院檢驗科（江裕）

目的評價抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA檢測在診斷麩質(zhì)敏感性腸病（gluten sensitive enterpathy，GSE）中的應(yīng)用價值。方法選擇2012年8月至2014年9月我院門診及住院的GSE患者35例作為GSE組；同時期健康體檢者50例作為健康對照組。采用ELISA法和間接免疫熒光法檢測所有受試者的抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體，并對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果GSE組中抗麥膠蛋白抗體IgG、抗麥膠蛋白抗體IgA、抗肌內(nèi)膜抗體IgG和抗肌內(nèi)膜抗體IgA的陽性率分別為25.7%（9/35）、25.7%（9/35）、14.3%（5/35）和28.6%（10/35），均顯著高于健康對照組，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）?？果溎z蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體聯(lián)合檢測的陽性率分別為45.7%（抗麥膠蛋白抗體IgG+抗麥膠蛋白抗體IgA）、37.1%（抗肌內(nèi)膜抗體IgG+抗肌內(nèi)膜抗體IgA）和48.6%（抗麥膠蛋白抗體IgG、IgA+抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA），均顯著高于健康對照組，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）?？果溎z蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體單獨診斷GSE的特異性和陽性預(yù)測值較高，可達100.0%（抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA），而敏感性均較低?？果溎z蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體聯(lián)合檢測診斷GSE的敏感性有所提高，其中最高的為48.6%（抗麥膠蛋白抗體IgG、IgA+抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA）。結(jié)論抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體聯(lián)合檢測可提高診斷GSE的敏感性，減少漏診。對GSE高危人群應(yīng)檢測抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體進行篩查和診斷。

麩質(zhì)敏感性腸??；谷膠病；抗麥膠蛋白抗體；抗肌內(nèi)膜抗體；免疫球蛋白

doi：10.3969/j.issn.1674-7151.2015.01.006

麩質(zhì)敏感性腸病 （gluten sensitive enterpathy，GSE）又稱谷膠病，是一類因食用含有麩質(zhì)的谷類物質(zhì)引起的具有個體傾向的自身免疫性疾病。GSE在西方人群中的發(fā)病率為0.5%～1.0%［1，2］，而國內(nèi)對此病的認(rèn)識、相關(guān)病理機理的研究還剛起步，中國人群中的發(fā)病率還未見報道，相關(guān)自身抗體的研究報道也很少。GSE可發(fā)生在任何年齡段，以成人相對多見，最常見的臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉和便秘等。GSE傳統(tǒng)的診斷方法主要涉及診斷小腸吸收不良綜合征的各種檢查方法，如糞便蘇丹Ⅲ染色、72 h糞脂定量檢查、脂肪吸收試驗、小腸黏膜活檢等，但特異性和敏感性均較低，而小腸黏膜活檢為有創(chuàng)檢查，操作困難，且不能檢測到所有GSE的腸道表現(xiàn)。目前，診斷GSE的金標(biāo)準(zhǔn)為腸道活檢結(jié)合血清學(xué)檢測陽性結(jié)果；另外對于兒童相關(guān)自身抗體陽性，且具有GSE臨床癥狀、接受無麩質(zhì)飲食后癥狀改善、抗體滴度下降或接受無麩質(zhì)飲食后生長發(fā)育改善，也可確診［3］。因此，血清學(xué)檢測GSE相關(guān)自身抗體是一種簡單、準(zhǔn)確性較高的非侵入性方法。目前國外采用抗麥膠蛋白抗體及抗肌內(nèi)膜抗體血清學(xué)檢測作為篩查GSE的指標(biāo)，國內(nèi)還未見類似研究報道。本文通過檢測GSE患者血清中抗麥膠蛋白抗體IgG、IgA和抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA，評價這四種抗體在GSE臨床診斷中的應(yīng)用價值。

表1　GSE組和健康對照組四種自身抗體檢測的陽性率［n（%）］

1　資料與方法

1．1臨床資料選擇2012年8月至2014年9月就診于我院門診和住院的35例GSE患者作為GSE組，其中男性18例，女性17例，年齡1～80歲，中位年齡38歲，所有患者均符合2012年歐洲兒科胃腸肝臟營養(yǎng)學(xué)協(xié)會乳糜瀉診斷指南［4］的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并結(jié)合臨床表現(xiàn)和治療有效或腸鏡報告確診。健康對照組選擇50例同時期體檢健康者，其中男性27例，女性23例，年齡0～73歲，中位年齡32歲。

1．2儀器與試劑抗麥膠蛋白抗體IgG、IgA檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附法）、抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA檢測試劑盒（間接免疫熒光法）均由北京歐蒙生物技術(shù)有限公司提供。

1．3方法采集入選者的空腹靜脈血，分別檢測血清中抗麥膠蛋白抗體IgG、IgA及抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA的水平?？果溎z蛋白抗體IgG、IgA測定采用ELISA法，抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA測定采用間接免疫熒光法。檢測過程嚴(yán)格參照試劑盒說明書操作。

1．4結(jié)果判定抗麥膠蛋白抗體IgG、IgA以樣本吸光度與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度比值＞1.1為陽性，抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA以抗體滴度≥1∶10為陽性。檢測方案分為單項目檢測和聯(lián)合檢測（平行試驗），聯(lián)合檢測中一個指標(biāo)出現(xiàn)陽性即診斷為GSE陽性。

1．5統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析。計數(shù)資料的比較采用χ2檢驗（樣本例數(shù)＜40時采用Fisher確切概率法）；采用四格表χ2檢驗計算四種抗體單獨檢測及聯(lián)合檢測對GSE診斷的靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2．1GSE組和健康對照組抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體檢測的陽性率比較35例GSE患者中，抗麥膠蛋白抗體IgG、IgA和抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA的陽性率均顯著高于健康對照組，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05），見表1。

2．2GSE組和健康對照組抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體聯(lián)合檢測的陽性率比較GSE患者中，抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體聯(lián)合檢測的陽性率均顯著高于健康對照組，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05），見表2。

2．3抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體對GSE的診斷效能評價抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體各亞型單項檢測對GSE診斷的特異性和陽性預(yù)測值較高，最高均可達100.0%，但敏感性較低，均在28.6%以下。其中，各指標(biāo)診斷效能最高的是抗肌內(nèi)膜抗體IgA，分別為敏感性28.6%、特異性100.0%、陽性預(yù)測值100.0%、陰性預(yù)測值66.7%，見表3。

表2　GSE組和健康對照組四種自身抗體聯(lián)合檢測的結(jié)果分析［n（%）］

表3　抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體各亞型單項抗體對GSE的診斷效能評價（%）

2．4抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體聯(lián)合檢測GSE的診斷效能評價抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體聯(lián)合檢測對GSE的診斷效能均較高，特異性和陽性預(yù)測值最高均可達100.0%，敏感性最高可達48.6%，陰性預(yù)測值最高可達72.3%。其中特異性和陽性預(yù)測值最高的為抗肌內(nèi)膜抗體IgG和抗肌內(nèi)膜抗體IgA聯(lián)合檢測，敏感性和陰性預(yù)測值最高的為抗麥膠蛋白抗體IgG、IgA和抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA聯(lián)合檢測，見表4。

表4　抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體聯(lián)合檢測對GSE的診斷效能評價（%）

3　討論

GSE是患者對麩質(zhì)不耐受引起的以小腸黏膜病變?yōu)樘卣鞯囊环N原發(fā)性吸收不良綜合征。該病起病大多緩慢，其臨床表現(xiàn)以腹痛、腹瀉和便秘為主，是慢性腹瀉不可忽視的病因之一，進食麥類食物癥狀加重，忌食麥類食物癥狀緩解［5］。國外研究［6，7］發(fā)現(xiàn)GSE患者常伴發(fā)1型糖尿病、自身免疫性甲狀腺炎等自身免疫性疾病，認(rèn)為GSE與這些自身免疫性疾病具有共同的免疫異?；A(chǔ)，并與腫瘤、骨質(zhì)疏松、貧血有一定的相關(guān)性，且男女均可發(fā)病，可發(fā)生于任何年齡段，具有家族傾向，直系親屬中有5%～10%會發(fā)展成GSE。兒童患病癥狀包括生長發(fā)育停止、面色蒼白、喜歡抱怨、易怒、學(xué)習(xí)困難、肌張力減低、消瘦、腹脹、痢疾、注意力不集中和多動等［8-11］。此外，唐氏綜合征、過敏性疾病患兒也是GSE的高發(fā)人群［12，13］。

目前認(rèn)為，GSE發(fā)病機制是腸黏膜的固有層吸收麩質(zhì)中的麥膠蛋白后，組織谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶脫去麥膠蛋白的酰胺基。在這個過程中谷氨酰胺殘基被谷氨酸殘基取代，在有遺傳易感性的人群中，通過這種方式被修飾改造的麥膠蛋白會與抗原提呈細胞HLA-DQ2/8等分子結(jié)合，提呈給輔助T細胞，由此促發(fā)廣泛的免疫反應(yīng)，引起病理性組織變化，特別是對小腸的損害，產(chǎn)生GSE癥狀［14］。而參與這一免疫反應(yīng)的成分包括了抗肌內(nèi)膜抗體以及抗組織谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶脫酰胺的麥膠蛋白抗體［15］。本文研究結(jié)果顯示，35例GSE患者中分別檢測出9例抗麥膠蛋白抗體IgG陽性，9例抗麥膠蛋白抗體IgA陽性，5例抗肌內(nèi)膜抗體IgG陽性以及10例抗肌內(nèi)膜抗體I-gA陽性，陽性率分別為 25.7%、25.7%、14.3%和28.6%，均顯著高于健康對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。而抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體各亞型聯(lián)合檢測的陽性率也均顯著高于健康對照組 （P均＜0.05），同時也高于各抗體單項檢測的陽性率。說明抗麥膠蛋白抗體及抗肌內(nèi)膜抗體與GSE的發(fā)病具有一定的相關(guān)性。

本文研究對抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體診斷GSE的效能評價結(jié)果顯示，單獨檢測抗麥膠蛋白抗體IgG、IgA，或者抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA，雖然其診斷的特異性可高達100.0%，但是敏感性極低，僅有14.3%～28.6%。因此，單獨檢測雖然有利于GSE的篩查，但檢出率極低。聯(lián)合檢測這兩種自身抗體及其亞型可有效提高診斷的敏感性，達到37.1%～48.6%，其中以抗麥膠蛋白抗體IgG、IgA和抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA聯(lián)合檢測的敏感性最高（48.6%）。并且聯(lián)合檢測IgG和IgA，還可避免一些選擇性IgA缺乏癥的GSE患者的漏診，提高檢出率。因此，進行抗麥膠蛋白抗體IgG、IgA和抗肌內(nèi)膜抗體IgG、IgA的聯(lián)合檢測有利于GSE的篩查和診斷。

總之，對于GSE高危人群，如GSE患者親屬、有疑似GSE相關(guān)臨床表現(xiàn)（腹瀉、腹痛和便秘）的患者，以及GSE相關(guān)疾?。?型糖尿病、唐氏綜合征、貧血、關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松、不育和身材矮小等）的患者，有必要進行抗麥膠蛋白抗體和抗肌內(nèi)膜抗體的血清學(xué)檢測。

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（本文編輯：楊軍）

The application of anti-gliadin antibody and anti-endomysial antibody immunoglobulin A，immunoglobulin G levels detection in diagnosis of gluten sensitive enterpathy

YI Xun-fei，ZHANG Jing-lan，LIU Fei，et al.
Institute of Laboratory Medicine，F(xiàn)uzhou General Hospital of Nanjing Military Command，F(xiàn)uzhou 350025，China

ObjectiveTo evaluate the clinical value of anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA in the diagnosis of gluten sensitive enterpathy（GSE）.Methods35 cases GSE patients（GSE group）and 50 cases healthy people（healthy control group）were selected from August 2012 to September 2014 in our hospital.The levels of anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA were measured by ELISA method and indirect immunofluorescence method，respectively.All data were analyzed statistically.ResultsThe positive rates of anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA in GSE group were 25.7%（9/35），25.7%（9/35），14.3%（5/35）and 28.6%（10/35），respectively，which were all higher than that of healthy control group.And the differences all had statistical significance（Pall＜0.05）.The positive rates of anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA combined detection were 45.7%（anti-gliadin antibody IgG，IgA），37.1%（anti-endomysial antibody IgG，IgA）and 48.6%（anti-gliadin antibody IgG，IgA+anti-endomysial antibody IgG，IgA），which were all higher than that of healthy control group.And the differences all had statistical significance（Pall＜0.05）.Anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA had high specificity and positive predictive value in the diagnosis of GSE，but had low sensitivity.The highest specificity and positive predictive value were all 100.0%（anti-endomysial antibody IgG，IgA）.The sensitivity increased in combined detection of anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA，the highest was 48.6%（anti-gliadin antibody IgG，IgA+anti-endomysial antibody IgG，IgA）.ConclusionAnti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA combined detection can improve the sensitivity in the diagnosis of GSE，and reduce misdiagnosis.The GSE high risk group should detect anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA to screening and diagnosis.

Gluten sensitive enterpathy；Celiac Disease；Anti-gliadin antibody；Anti-endomysial antibody；Immunoglobulin

（2014-12-25）