汪 燕，艾彩霞，祝一鳴，吳奉奇，單體江，王 軍*（. 廣東省肇慶市國有北嶺山林場，廣東 肇慶 5600；. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 林學(xué)院，廣東 廣州 5064）

降香黃檀炭疽病的化學(xué)防治研究

汪 燕1，艾彩霞2，祝一鳴2，吳奉奇2，單體江2，王 軍2*
（1. 廣東省肇慶市國有北嶺山林場，廣東 肇慶 516200；2. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 林學(xué)院，廣東 廣州 510642）

通過室內(nèi)測定15 種殺菌劑對降香黃檀炭疽病菌的毒力，選出 5種效果較好的藥劑，即多菌靈、咪鮮?戊唑醇、惡醚?咪鮮胺、苯醚?甲環(huán)銼和根太陽，5種藥劑在稀釋500倍時(shí)，對菌絲生長抑制效果均是100%，對孢子萌發(fā)抑制率接近或達(dá)到 100%。將此 5 種殺菌劑對降香黃檀進(jìn)行保護(hù)和治療試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)所有殺菌劑的保護(hù)效果均在 50%以上，500 倍的惡醚咪鮮胺和咪鮮戊唑醇對降香黃檀治療效果最好，分別是 87.59%和 83.10%。進(jìn)一步選取惡醚咪鮮胺和咪鮮戊唑醇進(jìn)行田間防治試驗(yàn)，500倍液的咪鮮戊唑醇防治效果較好，達(dá)到79.28%。

降香黃檀；炭疽?。换瘜W(xué)防治

汪燕， 艾彩霞， 祝一鳴， 等. 降香黃檀炭疽病的化學(xué)防治研究［J］. 生物災(zāi)害科學(xué)， 2015， 38（4）:306-311.

降香黃檀（Dalbergia odorifera T.Chen）是一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值極高的紅木樹種，近年來在廣東等地的栽培逐漸增多。但隨著栽培面積的擴(kuò)大，病蟲害的發(fā)生也隨之而來，尤其是炭疽?。?］，已經(jīng)嚴(yán)重影響到幼樹的生長，成為這一珍貴樹種發(fā)展的重要障礙。雖然一些樹木炭疽病的防治已有不少研究，如李春平［2］采用退菌特、甲基托布津等殺菌劑對油茶炭疽病有較好的防治效果；阮宏椿等［3］測定了 5 種殺菌劑對枇杷炭疽病菌的室內(nèi)毒力，結(jié)果表明 25%咪鮮胺及 10%世高可分散粒劑等抑菌效果較好；王蘭英等［4］發(fā)現(xiàn)百菌清、異 菌脲等對橡膠炭疽病菌孢子萌發(fā)起抑制作用；周 小燕［5］在對柑橘炭疽病的田間防治中，證 明 10%苯醚甲環(huán)唑及 25%咪酰胺表現(xiàn)出優(yōu)良的防治效果。然而由于降香黃檀炭疽病是一種新病害，目前還沒有其有關(guān)防治方面的研究報(bào)道。因此，對其進(jìn)行化學(xué)防治試驗(yàn)，篩選有效的控制藥劑及施用方法就顯得很有必要。本 研究選用市場上常用的 10 余種殺菌劑，對 其進(jìn)行針對降香黃檀炭疽病的室內(nèi)毒力測定及室內(nèi)和田間防治試驗(yàn)，以期對炭疽病的化學(xué)防治提供可行的用藥參考。

1　材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試殺菌劑 苯醚甲環(huán)銼，10%水分散粒劑，瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司；菌毒清?三十烷醇，6%可濕性粉劑，山東省泰安市寶豐農(nóng)藥廠；惡醚咪鮮胺，70%可濕性粉劑，南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司；肟菌?戊唑醇，75%水分散粒劑，拜耳作物科學(xué)公司；根太陽（花卉炭疽病專用），微乳劑，珠海真綠色技術(shù)有限公司；霉克，內(nèi)吸性殺菌劑，廣州市金農(nóng)科技開發(fā)有限公司；苯甲嘧菌酯，懸浮劑，瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司；嘧菌酯，懸浮劑，英國先正達(dá)有限公司；多錳鋅，50%可濕性粉劑，北京恒瑞生物科技有限公司；三氯異氰尿酸（克菌凈），42%可濕性粉劑，湖南省海洋生物工程有限公司；多菌靈，80%可濕性粉劑，山東曹達(dá)化工有限公司；代森錳鋅，80%可濕性粉劑，印度印地菲爾化學(xué)公司；根太陽（咪鮮戊唑醇），50%微乳劑，廣東植物龍生物科技有限公司；多抗毒素，1%水劑，陜西綠盾生物制品有限公司。

1.1.2 供試植物 降香黃檀植株，分別栽種于華南農(nóng)業(yè)大學(xué)校園和肇慶北嶺山林場鐵西工區(qū)。

1.1.3 供試病菌 炭疽菌菌株從北嶺山林場鐵西工區(qū)降香黃檀發(fā)病葉片上采集，經(jīng) 分離純化并鑒定保存。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 殺菌劑對菌絲生長抑制的測定 采用含毒平皿生長速率法。將 供試殺菌劑稀釋配成500倍液、1 000倍液和 1 500倍液 3個(gè)濃度，對照組以無菌水代替藥液。用直徑為 6 mm的滅菌打孔器在 PDA平板上打取培養(yǎng) 6 d的炭疽病菌餅，將菌餅接種到含藥的培養(yǎng)基平板中央，置于 28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。9 d后，用十字交叉法測量菌落的直徑，并計(jì)算供試殺菌劑對降香黃檀炭疽病病菌的相對抑制率：

1.2.2 殺菌劑對孢子萌發(fā)抑制的測定 將供試殺菌劑稀釋配成 50倍液、100 倍液和150 倍液3 個(gè)濃度。用無菌水洗脫 PDA培養(yǎng)基上分生孢子，制成濃度為 100 個(gè)/視野（顯微鏡 10×10 倍）的孢子懸浮液備用。取若干個(gè)大培養(yǎng)皿并在培養(yǎng)皿中放入兩張濕濾紙，做好相應(yīng)的標(biāo)記，備用。

用 1 000 μL（1 mL）移液槍將配置好的藥液取 1 mL與其對應(yīng)標(biāo)記的空無菌培養(yǎng)皿中，再取 9 mL已配置好的孢子懸浮液，充分混合后，用移液槍取一滴于凹玻片凹槽中，對照組用無菌水代替藥液，每個(gè)處理重復(fù) 3 次。然后將凹玻片放入大培養(yǎng)皿中，于 25 ℃下恒溫保濕培養(yǎng)。24 h后在顯微鏡下檢查孢子萌發(fā)數(shù)，每個(gè)玻片檢查 100 個(gè)孢子，計(jì)算孢子萌發(fā)率及藥劑對孢子萌發(fā)的抑制率：

1.2.3 殺菌劑保護(hù)作用的測定 用無菌水將以上篩選出的藥劑稀釋配置成500 倍液、1 000 倍液、1 500倍液 3 個(gè)濃度的藥液，然后在已滅菌的每個(gè)培養(yǎng)皿中放入兩張濾紙，并用無菌水浸濕濾紙，每個(gè)培養(yǎng)皿做好標(biāo)記。取若干營養(yǎng)狀態(tài)相同的降香黃檀葉片放入上述準(zhǔn)備好的培養(yǎng)皿中，噴施相對應(yīng)的藥液，噴藥量為以藥液微流為止，對照組以無菌水代替藥液，每個(gè)處理 6 個(gè)重復(fù)。之后放入恒溫培養(yǎng)箱中保濕培養(yǎng)。3 d后針刺處理所有葉片，用直徑為 6 mm的滅菌打孔器在 PDA平板上打取培養(yǎng) 6 d的炭疽病菌餅，在每片葉片的刺傷部位接種菌絲塊，置于恒溫培養(yǎng)箱中保濕培養(yǎng)。9 d后用網(wǎng)格坐標(biāo)紙測量葉片病斑面積，并按以下公式計(jì)算殺菌劑的防治效果：

1.2.4 殺菌劑治療作用的測定 先將培養(yǎng)皿，濾紙，載玻片高壓滅菌，然后在已滅菌的每個(gè)培養(yǎng)皿中放入兩張濾紙，并用無菌水浸濕濾紙，每個(gè)培養(yǎng)皿做好標(biāo)記。取若干營養(yǎng)狀態(tài)相同的降香黃檀葉片針刺接種，置于恒溫培養(yǎng)箱中保濕培養(yǎng)。3 d后，用無菌水將以上篩選出的藥劑稀釋配置成 500 倍液、1 000倍液、1 500 倍液 3個(gè)濃度，對供試葉片進(jìn)行相對應(yīng)的藥劑噴施，對照組以無菌水代替藥液，每個(gè)處理重復(fù)6 次。將所有培養(yǎng)皿放入恒溫培養(yǎng)箱中，接種 9 d后測量葉斑面積，并且計(jì)算防治效果。

1.2.5 殺菌劑的田間防治試驗(yàn) 田間防治設(shè) 7 個(gè)處理：（ 1）70%惡醚咪鮮胺WP 500 倍；（2）70%惡醚咪鮮胺 WP 1 000倍；（3）70%惡醚咪鮮胺 WP 1 500倍；（4）50%咪鮮戊唑醇 SC 500 倍；（5）50%咪鮮戊唑醇 SC 1 000 倍；（6）50%咪鮮戊唑醇 SC 1 500 倍；（7）清水對照。每處理 2 株降香黃檀樹，任選5個(gè)枝梢掛牌，重復(fù) 5次，隨機(jī)排列。選擇在無降雨日噴藥，連噴3 次，每次間隔 7 d。分別在噴藥前、第3 次噴藥后 7 d按分級法分別調(diào)查植株的病害發(fā)生情況，計(jì)算病情指數(shù)（DI）［6］。

1.2.6 數(shù)據(jù)處理 用DPS 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并用 Duncan’最小顯著差異法比較差異顯著性。

2　結(jié)果與分析

2.1 殺菌劑對菌絲的抑制效果

當(dāng)殺菌劑濃度稀釋為 500 倍時(shí)，多菌靈、咪鮮戊唑醇、惡醚咪鮮胺、苯醚甲環(huán)銼、根太陽 5種殺菌劑對菌絲的生長抑制效果均為100%，抑制效果最好。而嘧菌酯、苯甲?嘧菌酯等 10 種殺菌劑對菌絲的抑制效果在 30%～90%，其中多錳鋅抑制效果最差，抑制率僅為 33.10%。

當(dāng)殺菌劑濃度稀釋為 1 000 倍時(shí)，多菌靈、咪鮮戊唑醇等 5 種殺菌劑對降香黃檀炭疽菌菌絲的生長抑制效果差異不顯著，抑制效果最好，其中多菌靈、咪鮮戊唑醇、惡醚咪鮮胺抑制效果為 100%，苯醚甲環(huán)銼、根太陽（花卉炭疽病專用）抑制效果為98.29%和 97.53%，嘧菌酯抑制效果為 77.29%，顯著高于苯甲?嘧菌酯、菌毒清?三十烷醇等 9 種殺菌劑，霉克和多錳鋅的抑制效果最差，僅為 32.22%和 21.48%。

當(dāng)殺菌劑濃度稀釋為 1 500 倍時(shí)，多菌靈、咪鮮戊唑醇等 5 種殺菌劑對降香黃檀炭疽菌菌絲的生長抑制效果均在 91%以上，嘧菌酯、苯甲?嘧菌酯、肟菌?戊唑醇的抑制效果在45%～66%，菌毒清?三十烷醇、代森錳鋅、多抗霉素的抑制效果為 41.78%、39.02%和 38.14%，松脂酸銅等 4 種殺菌劑對菌絲的抑制效果在 14%～33%，其中多錳鋅抑制效果最差，為 14.79% （表1）。

表1　15種殺菌劑對降香黃檀炭疽菌菌絲生長的抑制

上述結(jié)果顯示多菌靈、咪鮮戊唑醇、苯醚甲環(huán)銼、惡醚咪鮮胺、根太陽對降香黃檀炭疽菌菌絲的生長抑制效果較好。

2.2 殺菌劑對孢子萌發(fā)的抑制效果

當(dāng)殺菌劑濃度稀釋為 500 倍時(shí)，多菌靈、咪鮮戊唑醇、苯醚甲環(huán)銼對分生孢子萌發(fā)的抑制效果均為100%，惡醚咪鮮胺、根太陽、代森錳鋅 3 種殺菌劑對分生孢子萌發(fā)的抑制效果分別是 99.61%、99.22% 和 90.23%，肟菌?戊唑醇、松脂酸銅等 9 種殺菌劑對分生孢子萌發(fā)的抑制效果在 33%～78%，其中多錳鋅的抑制效果最差，為33.20%。

當(dāng)殺菌劑濃度稀釋為 1 000 倍時(shí)，多菌靈、咪鮮戊唑醇等 5 種殺菌劑對分生孢子萌發(fā)的抑制效果均在 90%以上，代森錳鋅等 10 種殺菌劑的抑制效果是 19%～83%。

當(dāng)殺菌劑濃度稀釋為 1 500 倍時(shí)，多菌靈、咪鮮戊唑醇、惡醚咪鮮胺對分生孢子萌發(fā)的抑制效果分別是 91.79%、91.4%和92.57%，苯醚甲環(huán)銼、根太陽的抑制效果是 80.86%和 85.15%，代森錳鋅、肟菌?戊唑醇等 9 種殺菌劑的抑制效果在 24%～72%，多錳鋅的抑制效果最差，是12.89%（表 2）。

表2　15種殺菌劑對降香黃檀炭疽菌孢子萌發(fā)的抑制效果

上述結(jié)果顯示多菌靈、咪鮮戊唑醇、苯醚甲環(huán)銼、惡醚咪鮮胺的抑制效果最好，根太陽抑制效果次之，抑制效果最差的是多錳鋅。結(jié)合之前測試的對菌絲生長抑制效果的試驗(yàn)，篩選出多菌靈、咪鮮戊唑醇、苯醚甲環(huán)銼、惡醚咪鮮胺、根太陽5 種殺菌劑進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

2.3 殺菌劑的保護(hù)作用

表 3 顯示，施藥 9 d以后，各殺菌劑不同濃度之間的保護(hù)效果差異顯著，不同殺菌劑之間的保護(hù)效果有所不同，其中 500 倍液不同殺菌劑之間的保護(hù)效果差異不顯著，1 000倍液、1 500 倍液不同殺菌劑之間的保護(hù)效果差異顯著。惡醚咪鮮胺效果最好，咪鮮戊唑醇、苯醚甲環(huán)銼次之，根太陽效果最差。

表3　施用5種殺菌劑處理9d后對將香黃檀葉片的保護(hù)效果

2.4 殺菌劑的治療作用

由表 4 可知，不同殺菌劑之間和不同濃度之間的治療效果都達(dá)到極顯著差異，其中治療效果最好的為惡醚咪鮮胺和咪鮮戊唑醇，苯醚甲環(huán)銼、多菌靈次之，根太陽效果最差，與保護(hù)作用試驗(yàn)所得的結(jié)果相似，但治療效果顯著低于保護(hù)作用 9 d時(shí)的結(jié)果

表4　接種葉片施用苯醚甲環(huán)銼等5種殺菌劑9d后的治療效果

綜合以上試驗(yàn)結(jié)果，選取惡醚咪鮮胺，咪鮮戊唑醇 2種殺菌劑進(jìn)行田間防治試驗(yàn)。

2.5 田間防治試驗(yàn)

兩種殺菌劑對降香黃檀炭疽病的田間防治試驗(yàn)，結(jié)果見表 5。從表中可知，3 次噴藥后，70%惡醚咪鮮胺 WP 500 倍稀釋液、1 000 倍稀釋液、1 500 倍稀釋液的防治效果分別是 76.44%、58.88%、31.35%。50%咪鮮戊唑醇SC 500倍稀釋液、 1 000倍稀釋液、 1 500倍稀釋液的防治效果是79.28%、 57.41%、 37.88%。其中 50%咪鮮戊唑醇 SC 500 倍稀釋液防治效果較好。

表5　殺菌劑的田間防治試驗(yàn)效果

3　結(jié)論與討論

采用 15 種殺菌劑對降香黃檀炭疽病室內(nèi)毒力測定試驗(yàn)，結(jié) 果表明，不 同藥劑或同一藥劑不同濃度對病原菌菌絲生長和分生孢子萌發(fā)的抑制效果均有一定的差異，其中多菌靈、咪鮮戊唑醇、惡醚咪鮮胺、苯醚甲環(huán)銼、根太陽的抑菌效果最好。由此篩選出的5 種殺菌劑進(jìn)行離體葉片防治試驗(yàn)結(jié)果表明，在治療試驗(yàn)中，500 倍濃度咪鮮戊唑醇和惡醚咪鮮胺對降香黃檀炭疽病的治療效果最好，治療效果分別為83.1%和 87.59%，其余的治療效果均低于 80%，在保護(hù)試驗(yàn)中，500 倍濃度的 5 種殺菌劑的保護(hù)效果均在 90%以上，顯著高于治療效果。這表明在炭疽病病害發(fā)生前對降香黃檀進(jìn)行保護(hù)性噴藥遠(yuǎn)比在得病后治療容易，再一次驗(yàn)證了在實(shí)際林木病害防治中應(yīng)采取“預(yù)防為主”的策略。

田間防治試驗(yàn)中，5 00 倍濃度的惡醚咪鮮胺和 500 倍濃度的咪鮮戊唑醇防效差異不大，效 果均在 75%以上。但這與離體器官防治試驗(yàn)中表現(xiàn)出的效果并不完全相同，即殺菌劑在相同試驗(yàn)濃度下對離體油茶的抑制效果均顯著高于田間防治效果。這可能與田間環(huán)境條件的復(fù)雜和多樣性有關(guān)。在實(shí)際田間應(yīng)用過程中，為了避免單一使用可能存在的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)，可以于所選藥劑進(jìn)行交替使用。

［1］ 桑利偉， 劉愛勤， 孫世偉， 等. 海南降香黃檀炭疽病病原鑒定及防治［J］. 熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2009， 29（8）:23-25.

［2］ 李春平， 李清華， 鐘偉. 油茶常見病害的發(fā)生與防治［J］. 安徽農(nóng)業(yè)科， 2003， 31（6）:1061， 1079.

［3］ 阮宏椿， 陳福如， 楊秀娟， 等. 批把炭疽病菌生物學(xué)特性及殺菌劑室內(nèi)毒力測定［J］. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2005， 31（6）:80-82.

［4］ 王蘭英， 張宇， 鄭肖蘭. 8種殺菌劑對橡膠炭疽菌的抑制活性［J］. 農(nóng)藥， 2010， 49（3）: 201-210，217.

［5］ 周小燕， 姜于蘭. 不同殺菌劑對柑橘炭疽病的田間防治效果［J］. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2011， 50（15）: 3080-3082.

［6］ 方中達(dá). 植病研究方法［M］. 北京: 農(nóng)業(yè)出版社， 1998:343-344.

［7］ 張利平， 陳國慶， 蒲占湑， 等. 18%苯醚甲?拌SC防治柑橘炭疽病田間藥效試驗(yàn)［J］. 浙江柑橘， 2008， 35（3）:34.

Chemical Control of Anthracnose of Dalbergia odorifera

WANG Yan1，AI Cai-xia2， ZHU Yi-ming2， WU Feng-qi2，SHAN Ti-jiang2，WANG Jun2*
（1. Beilingshan Forestry Plantation of Zhaoqing， Zhaoqing 516200， China； 2. College of Forestry， South China Agricultural University， Guangzhou 510642， China）

5 effective fungicides against anthracnose pathogen of Dalbergia odorifera were screened through laboratory toxicity tests from 15 chemicals. They are: Carbendazim， Tebuconazole， Prochloraz，Difenoconazole and Gntaiyang. When their concentrations were diluted 500 times， the inhibitory effects of all 5 fungicides on mycelial growth were 100%， and the inhibition rates on spore germination were almost 100%. These fungicides were then used in experiments of leaf protection and cure treatment against the pathogen. The results showed that the protective effects of all fungicides were more than 50%， of which 500 times Prochloraz and Tebuconazole achieved the better cure effect: 87.59% and 83.10%， respectively. Prochloraz and Tebuconazole were further applied in the field control experiment， and the results showed that 500 times of Tebuconazole achieved the best control effect: 79.28%.

Dalbergia odorifera；anthracnose； chemical control

S792.28；S763.7

A

2095-3704（2015）04-0306-06

2015-10-19

廣東省林業(yè)科技創(chuàng)新項(xiàng)目（2015KJCH043）

汪燕，女，碩士，主要從事林業(yè)生產(chǎn)與科技項(xiàng)目管理工作，E-mail:wangyan_003@163.com；*通信作者：王軍，教授，E-mail:wangjun@scau.edu.cn。