尹亮

(安徽省計量科學研究院 安徽合肥 230000)

在我國各個行業(yè)應(yīng)用到液相色譜儀時,其在檢測過程中展現(xiàn)了優(yōu)點。這種優(yōu)點是符合現(xiàn)在社會發(fā)展所需的。在不影響正常分析質(zhì)量的情況下,能夠提高分析速度,增加分析效率。同時還可以把檢測樣板中的各種物質(zhì)分析的更加分析到位。但是在檢測過程中,由于減少了一些麻煩的步驟,就更加需要在使用儀器中注意規(guī)定的檢定方法,這樣才能保證檢測的準確性。同時有關(guān)的注意事項也要仔細觀看,并注意按照其步驟進行,減少損失。

1 液相色譜儀的原理

高壓泵利用高壓把流動相壓進系統(tǒng)中,然后樣品溶液從進入到流動相中,并跟隨流動相運動,最終進入色譜柱中,由于樣品溶液的各個組成物質(zhì)具有不同的性質(zhì),在色譜柱中運動時會有一定的差異,經(jīng)過一段時間的運動以后,運動速度差異會變得越來越大,這樣就被分成多個部分分別從色譜柱中流出,這樣在檢測器中就記錄下了這些樣品組分的濃度,然后以圖譜的形式呈現(xiàn)出來。

2 液相色譜儀的組成

液相色譜儀主要由加入樣品系統(tǒng)、輸送樣品系統(tǒng)、分離樣品系統(tǒng)、檢測結(jié)果系統(tǒng)和結(jié)果分析處理系統(tǒng)組成。

2.1 樣品加入系統(tǒng)

一般是用安裝有隔膜的注射器或者是利用高壓來加進樣品,為了提高所分析樣品的重復(fù)性,要在加樣時注意使每次加入的樣品量保持相同。

2.2 樣品輸送系統(tǒng)

高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分組成了輸送樣品系統(tǒng)。高壓泵高的壓強可以使待分析樣品液體以相當大的速度通過層析柱,較大速度可降低樣品在層析柱中向四周擴散。貯存器和密度梯度儀的作用是使樣品流動相隨著所用固定相和樣品的變化而變化,具體包括改變洗脫液的吸水性、陰陽離子濃度、PH值,這樣就可使各種樣品成分最終都可以實現(xiàn)有效的分離,增強分離的效果。

2.3 樣品分離系統(tǒng)

首先,長度一般為1dm～5dm,內(nèi)徑為0.2cm～0.5cm的色譜柱、有時候需要有連接管和保持溫度恒定的儀器等組成了樣品分離系統(tǒng)。色譜柱的材料是不銹鋼,厚壁玻璃管、鈦合金等。色譜柱內(nèi)是半徑為2.5μm～5μm的固定相,固定相中的基質(zhì)材料是樹脂或硅膠。

其次,固定相中所裝的物質(zhì)粒度小,柱床特別容易達到均勻、致密的狀態(tài),這樣就可以極大地降低擴散效應(yīng)。

最后,恒溫器可以使儀器內(nèi)的溫度使從25℃升高到60℃左右,溫度越高,樣品在層析柱中傳輸?shù)乃俣纫簿驮酱?分析時間也就減少,從而提高液相色譜儀的分析分離效率。

3 液相色譜儀各部分的檢定方法和注意事項

由于我國在應(yīng)用液相色譜儀的領(lǐng)域越來越多,所以對其在檢測方面的要求也越來越多,并且為了保證檢測結(jié)果準確無誤,更需要對它在使用過程中的注意事項加以詳細的闡述,來保證液相色譜儀使用的正確性,和延長使用壽命。

3.1 泵流量設(shè)定量誤差Ss和流量穩(wěn)定性誤差SR

3.1.1 檢定方法

泵流量的檢測是根據(jù)液相色譜儀上標定的流量標準來設(shè)定好標準流量,然后打開儀器,按照正確的操作步驟進行操作,等到壓力趨于穩(wěn)定以后在規(guī)定的時間內(nèi)收集流動相于處理過可以直接使用的容量瓶中,同時由同一個人計時,在規(guī)定的時間內(nèi)收集好流動相,然后在分析天平上稱量所收集的流動相的質(zhì)量。

3.1.2 注意事項

在收集數(shù)據(jù)的同時要注意把相關(guān)的實驗材料保管好。由于相關(guān)的實驗材料是易揮發(fā)液體,所以要掌握好實驗的速度和時間。并且在實驗過程還要有條不紊的進行每一個步驟的安排,以便減少實驗過程的失誤和一定的經(jīng)濟損失。并且要把詳細的實驗記錄進行整理,確保實驗記錄的可靠性。

3.2 色譜柱溫箱溫度的檢定

3.2.1 檢定方法

在色譜柱溫箱內(nèi)固定一個溫度計,使溫度計的探頭能夠測量色譜柱的溫度。分別選擇35℃和45℃作為檢測溫度進行檢定。按照液相色譜儀的操作規(guī)程操作,等到溫度穩(wěn)定在一定值時,記錄下溫度計的讀數(shù),與此同時開始用秒表計時,每隔10min記一次讀數(shù),總共記錄7組數(shù)據(jù),然后求出算術(shù)平均數(shù),算數(shù)平均數(shù)與所設(shè)定的35℃或45℃的差值就是柱溫箱溫度設(shè)定值誤差ΔTs,而讀數(shù)中最高溫度與最低溫度的差值是控溫穩(wěn)定性Tc。

3.2.2 注意事項

溫度的升高在通常情況下會加大理論塔板數(shù),峰和峰之間的距離變小,但是要保證每個峰的面積不變,所以在峰距變小的情況下,峰的高度就會增高,所以溫度升高會使保留的時間變短,而溫度降低正好相反。

3.3 基線噪聲與基線漂移的檢定

3.3.1 檢定方法

在進行這個項目的檢定時,用C18作為色譜柱的材料,用無水甲醇作為液相色譜儀中的流動相,設(shè)定適當?shù)母邏菏沽魉贋?.0dm3/min,并且使儀器處于最靈敏的狀態(tài),記錄紙的移動速度設(shè)定為0.5～1cm/min。按照正確的操作步驟操作,待穩(wěn)定運行半小時后,根據(jù)檢測器的衰減倍數(shù)和對應(yīng)的標度來算基線噪聲。所用的公式是Nd=KB?；€漂移的值是在一個小時內(nèi)檢測器基線偏離坐標原點的距離。

3.3.2 注意事項

在進行此項目鑒定時,儀器中不能有無水甲醇以外的其他物質(zhì)作為流動相;如果基線處于非正常狀態(tài),那么需要排除故障使儀器處于正常工作狀態(tài),這樣測定的值才具有真實性;在測得基本的數(shù)據(jù)以后,要注意在計算過程中換算各個數(shù)據(jù)的單位,否則所得結(jié)果將是不正確的。

4 結(jié)語

我國由于快速的發(fā)展,使用液相色譜儀的領(lǐng)域越來越廣泛。但是液相色譜儀在使用過程中的檢定方法是需要十分重視的,因為不按照規(guī)定的使用方法,是會導(dǎo)致液相色譜儀在使用過程中產(chǎn)生檢測誤差,影響檢測結(jié)果。并且在使用過程中,還需要對注意事項加以查看,以免在使用過程中由于不注意而導(dǎo)致結(jié)果不同。所以要詳細分析鑒定方法。

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