張峰　王帥

[摘要] 目的 通過(guò)對(duì)獻(xiàn)血者初篩血型錯(cuò)誤原因分析，進(jìn)而提高初篩血型的準(zhǔn)確率，確保安全輸血。 方法 對(duì)170例初篩檢驗(yàn)血型錯(cuò)誤結(jié)果進(jìn)行分析。 結(jié)果 初篩血型錯(cuò)誤總?cè)藬?shù)170例。血型錯(cuò)誤率為0.053%（排除弱凝集和亞型），各型錯(cuò)誤構(gòu)成比例中，A型誤定為AB型的比例最高，占25.3%，其次為AB型誤定為A型和AB型誤定為B型，各占10.0%，錯(cuò)誤率最低為O型誤定為AB型，占1.8%。 結(jié)論 造成血型初篩錯(cuò)誤的原因是多方面的，主要為人為和環(huán)境因素。

[關(guān)鍵詞] 無(wú)償獻(xiàn)血；初篩；血型；輸血

[中圖分類號(hào)] R446.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2015）21-0124-03

[Abstract] Objective To analyze the causes of error of blood type preliminary screening for blood donors， and to further improve the accuracy of preliminarily screened blood type， so as to ensure the safe blood transfusion. Methods A total of 170 cases with false results of preliminarily screened blood type were analyzed. Results Total number of people with false preliminarily screened blood type was 170. The false rate of blood type was 0.053% （excluding weak agglutination and sub-type）. Among the proportion of composition of each false type， the proportion of type A wrongly screened as type AB was the highest， accounting for 25.3%， followed by the proportion of type AB wrongly screened as type A and the proportion of type AB wrongly screened as type B， accounted for 10.0% for each. The lowest proportion was type O wrongly screened as type AB， accounted for 1.8%. Conclusion Causes of false preliminary screening of blood type are multifaceted， and the main causes are human factors and environmental factors.

[Key words] Voluntary blood donors； Preliminary screening； Blood type； Blood transfusion

輸血醫(yī)學(xué)發(fā)展到今天，同型輸注已成為最基本的準(zhǔn)則，尤其是ABO的配合性同型輸注顯得尤為重要。輸血可治療疾病、挽救生命，正確的血型鑒定是安全輸血的前提，否則可能導(dǎo)致溶血性輸血反應(yīng)，甚至危及生命。血站向臨床發(fā)送血型正確的血液是安全輸血的保證，作為輸血專業(yè)技術(shù)人員，我們?cè)谧鲅丸b定時(shí)，就應(yīng)嚴(yán)把血型鑒定第一關(guān)。初篩血型在獻(xiàn)血場(chǎng)所進(jìn)行，目前是用紙板法做正定型，有一定的局限性，受時(shí)間、環(huán)境、溫度、人員等影響，檢驗(yàn)結(jié)果存在一定的錯(cuò)誤率[1]?，F(xiàn)對(duì)2011～2014年來(lái)我站獻(xiàn)血的319 530例中170份血型初篩檢驗(yàn)錯(cuò)誤的原因進(jìn)行回顧性分析。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

2011～2014年來(lái)我站獻(xiàn)血人數(shù)共計(jì)319 530例，其中初篩血型錯(cuò)誤170例。按照《中國(guó)輸血技術(shù)操作規(guī)程》中血液采集要求留樣采血，嚴(yán)重溶血、脂血、污染等標(biāo)本不適用于本項(xiàng)檢測(cè)[2]。

1.2 試劑

標(biāo)準(zhǔn)抗-A、抗-B血清（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，試劑效價(jià)1：128）、標(biāo)準(zhǔn)A、B、O紅細(xì)胞（北京金豪制藥有限公司）。試劑均經(jīng)批檢及質(zhì)控抽檢合格且在有效期內(nèi)使用。

1.3 儀器設(shè)備

深圳愛(ài)康Metis全自動(dòng)血庫(kù)系統(tǒng)及一次性梯形微板（血型專用），長(zhǎng)春博德生物技術(shù)有限公司提供的血型正定型鑒定卡。

1.4方法

街頭采血初篩血型用紙板凝集法檢測(cè)，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作和結(jié)果判斷。用玻璃毛細(xì)管采集獻(xiàn)血者無(wú)名指末梢血液用抗-A、抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清檢測(cè)正定型，肉眼判讀有無(wú)顆粒狀凝集。采血后留取血樣標(biāo)本送實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢，用一次性v型微板在全Metis全自動(dòng)血庫(kù)系統(tǒng)上同時(shí)做正反定型，正反定型血型不符時(shí)，用血型鑒定卡做進(jìn)一步確認(rèn)。凡有和初篩血型不符者，實(shí)驗(yàn)室必須提取對(duì)應(yīng)血袋編號(hào)進(jìn)行重復(fù)確認(rèn)，對(duì)疑難血型鑒定送往血型室采用血清學(xué)方法做進(jìn)一步鑒定[3]。

1.5 試劑質(zhì)控

抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清要求從效價(jià)、親和力、凝集力、特異性測(cè)定等幾個(gè)指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)控確認(rèn)。ABO血型反定型用紅細(xì)胞要求無(wú)溶血、凝塊等現(xiàn)象發(fā)生，并與標(biāo)準(zhǔn)血清發(fā)生特異性反應(yīng)。

1.6 實(shí)驗(yàn)操作程序

采用深圳愛(ài)康Metis全自動(dòng)血庫(kù)系統(tǒng)自動(dòng)加樣、孵育、離心、振蕩、判讀。在Metis軟件上編寫(xiě)程序：樣本血清50 μL+25 μL標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞分別加到目標(biāo)板的1～3排上；樣濃縮紅細(xì)胞10 μL+300 μL生理鹽水在預(yù)稀釋板上混勻稀釋，然后在目標(biāo)板上4～6排分別加40 μL稀釋紅細(xì)胞及標(biāo)準(zhǔn)血清和抗-D各15 μL，加完后孵育4 min，然后在平板離心機(jī)上離心90 s后放在振蕩儀上振蕩混勻2 min，最后在判讀儀上判讀結(jié)果：①細(xì)胞均勻分布在v型板孔底的為陰性；細(xì)胞沉集于孔底中央形成一點(diǎn)的為陽(yáng)性；判讀異常或其他情況打問(wèn)號(hào)。②ABO正反定型一致在結(jié)果欄表示ABO血型，正反不一致或任意一孔為“？”，則打問(wèn)號(hào)。采用試管法判讀或血型鑒定卡鑒定，若還無(wú)法鑒定樣本送血型室做進(jìn)一步鑒定。

2 結(jié)果

2011年1月～2014年12月我站共319 530例無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本中，初篩血型錯(cuò)誤總?cè)藬?shù)170例。血型錯(cuò)誤率0.053%（排除弱凝集和亞型），明顯低于文獻(xiàn)報(bào)道[4-6]。見(jiàn)表1。各型錯(cuò)誤構(gòu)成比例中，A型誤定為AB型的比例最高，占25.3%，明顯高于南平市的7.5%[7]，其次為AB型誤定為A型和AB型誤定為B型，各占10.0%，錯(cuò)誤率最低為O型誤定為AB型，占1.8%。其中2011年血型差錯(cuò)率最高，由于導(dǎo)致血型檢測(cè)錯(cuò)誤的主要原因?yàn)槿藶楹铜h(huán)境因素[8，9]，因此我站采取了一定的獎(jiǎng)懲措施后，初篩血型錯(cuò)誤有逐年下降趨勢(shì)。按照排列組合的方式各種血型錯(cuò)誤分布情況統(tǒng)計(jì)結(jié)果，見(jiàn)表2。

3 討論

3.1 初篩血型錯(cuò)誤的原因分析

3.1.1 技術(shù)因素 指尖穿刺出血不暢或不足時(shí)，可能會(huì)導(dǎo)致抗原量的不足、細(xì)胞與標(biāo)準(zhǔn)血清試劑比例不合適，其結(jié)果就是細(xì)胞過(guò)多而抗血清較少時(shí)出現(xiàn)的后帶現(xiàn)象，初篩時(shí)易導(dǎo)致A、B型錯(cuò)判成O型或AB型錯(cuò)判成A型或B型；甚至采集指尖血時(shí)因局部擠壓過(guò)重導(dǎo)致RBC數(shù)量減少，血漿量多產(chǎn)生而引起血型的錯(cuò)判[10]，如O型錯(cuò)判成AB型或A或B型；少數(shù)操作不熟練的工作人員在血型板上滴加試劑時(shí)，不小心產(chǎn)生氣泡將一種抗血清試劑濺落在另一區(qū)域或在抗血清與血液攪拌混勻時(shí)未注意清潔造成交叉污染等，致使A或B錯(cuò)判成AB型；抗原-抗體反應(yīng)時(shí)間不足，尤其是抗原性較弱的血樣時(shí)，凝集程度較弱，容易誤判結(jié)果，AB型錯(cuò)判為A或B型。

3.1.2 責(zé)任心不夠 因?yàn)楣ぷ鲿r(shí)注意力的不集中，初篩血型貼錯(cuò)標(biāo)簽，或者同時(shí)采集兩個(gè)獻(xiàn)血者，操作者操作不仔細(xì)，單子出現(xiàn)交叉而填錯(cuò)、貼錯(cuò)信息；抗A抗B互相滴反，工作人員責(zé)任心不強(qiáng)，造成誤判；采血人員登錄微機(jī)查詢信息時(shí)馬虎而出現(xiàn)填寫(xiě)血型錯(cuò)誤。

3.1.3 工作流程不合理 留樣貼簽過(guò)程控制不嚴(yán)密，當(dāng)工作人員同時(shí)采集兩個(gè)獻(xiàn)血者、注意力又不集中、事先又把標(biāo)簽預(yù)貼在留樣管上時(shí)就會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)型，而且出現(xiàn)錯(cuò)血型的留樣管往往成對(duì)出現(xiàn)。事實(shí)上這種錯(cuò)誤不僅是錯(cuò)型原因之一，還對(duì)檢測(cè)結(jié)果的正確判斷帶來(lái)嚴(yán)重的后果，且當(dāng)同型試管貼簽錯(cuò)誤時(shí)更難以追蹤和發(fā)現(xiàn)，潛在危害更大，嚴(yán)重威脅到血液的安全性，一旦有問(wèn)題的血液輸注到患者體內(nèi)，造成的危害不可估量。

3.1.4環(huán)境因素 溫度過(guò)高或過(guò)低，均能影響試劑效價(jià)。夏季外出采血時(shí)標(biāo)準(zhǔn)抗血清效價(jià)隨溫度升高而降低，冬季環(huán)境溫度過(guò)低、試劑保存不當(dāng)都會(huì)造成初篩血型結(jié)果錯(cuò)誤。有實(shí)驗(yàn)證明抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清在保存過(guò)程中比抗-A標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)下降要快[11]，因而導(dǎo)致B端凝集出現(xiàn)較A端慢，這可能將AB型錯(cuò)判為A型的又一個(gè)原因。還有少部分人血清中冷凝集素含量較常人高，這種抗自身紅細(xì)胞的嗜異性冷抗體（IgM類）在低溫或某些病理情況下（自身免疫性貧血、EB病毒感染等）會(huì)表達(dá)高效價(jià)[12]，強(qiáng)烈冷凝集素假凝集可造成血型結(jié)果誤判；此外，當(dāng)車(chē)內(nèi)環(huán)境比較嘈雜、人流量較大時(shí)，會(huì)對(duì)工作人員的化驗(yàn)及判讀工作帶來(lái)不利影響。

3.1.5 試劑因素 由于抗-B血清試劑效價(jià)本身較低，如果保存不當(dāng)，在溫度較高的環(huán)境放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，則效價(jià)更容易偏低，誤把AB型錯(cuò)判為A型。其中B型錯(cuò)判為O型的情況最多。

3.1.6 亞型因素 因亞型抗原弱或試劑對(duì)亞型檢出的局限性，而導(dǎo)致血型初篩錯(cuò)誤。

3.2 減少血型初篩錯(cuò)誤的對(duì)策

①加強(qiáng)操作人員的責(zé)任心和責(zé)任感，完善管理和監(jiān)督機(jī)制。即使在獻(xiàn)血場(chǎng)所的獻(xiàn)血者較多時(shí)，工作人員也要做到各司其職、各負(fù)其責(zé)，不慌亂不馬虎，細(xì)心、耐心，嚴(yán)格按照SOP操作，控制關(guān)鍵點(diǎn)，采集完畢后進(jìn)行常規(guī)血型復(fù)檢，減少錯(cuò)誤率。所有信息必須做到一一核對(duì)，確保檢驗(yàn)信息和體檢表信息、獻(xiàn)血條碼信息一致，核對(duì)無(wú)誤后審核人再把信息錄入電腦，最后在工作結(jié)束后核對(duì)一下各型試管個(gè)數(shù)與電腦上是否一致，避免留樣錯(cuò)誤。以高標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量意識(shí)貫穿于工作始終，嚴(yán)防差錯(cuò)的發(fā)生。②加強(qiáng)操作人員的專業(yè)技能培訓(xùn)及考核，夯實(shí)理論基礎(chǔ)，掌握抗原抗體反應(yīng)原理與技術(shù)要求，嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，把握好試劑與紅細(xì)胞的反應(yīng)比例，適當(dāng)增加抗血清量以及減少全血量，確保檢測(cè)時(shí)間的充分，防止試劑出現(xiàn)交叉污染和效價(jià)降低。對(duì)血型檢測(cè)崗人員在上崗前進(jìn)行理論考試及操作考核，經(jīng)考核合格后方準(zhǔn)予獨(dú)立上崗。③優(yōu)化工作流程，強(qiáng)化采前、采中、采后核對(duì)制度。應(yīng)明確規(guī)定貼簽的步驟和要求，一次只對(duì)一袋血液和同源血樣管貼簽，貼簽后應(yīng)與征詢表進(jìn)行核對(duì)[13]。一方面要認(rèn)真核查實(shí)驗(yàn)結(jié)果，另一方面要核對(duì)血樣標(biāo)本與血袋采血編號(hào)、獻(xiàn)血者姓名、血型，確保貼標(biāo)簽、填寫(xiě)血型、計(jì)算機(jī)信息錄入等原始記錄準(zhǔn)確無(wú)誤，便于追蹤。獻(xiàn)血人員多時(shí)，要保證有足夠的工作人員，安排足夠的初篩人員及時(shí)做好獻(xiàn)血人群的分流安排，嚴(yán)格按照SOP規(guī)程文件進(jìn)行操作，精力集中，工作認(rèn)真細(xì)致，減少或避免ABO定型錯(cuò)誤。④改善獻(xiàn)血環(huán)境。獻(xiàn)血車(chē)內(nèi)應(yīng)配備冷暖空調(diào)，保持車(chē)內(nèi)溫度濕度相對(duì)穩(wěn)定，抗原-抗體理論最適反應(yīng)溫度為4℃～25℃[14]，抗血清用完后及時(shí)放冰箱保存，以防止效價(jià)降低影響檢測(cè)效果。⑤提高實(shí)驗(yàn)室對(duì)亞型等疑難血型的鑒定技術(shù)水平。ABO亞型的抗原結(jié)構(gòu)、性能、數(shù)量和抗原位點(diǎn)與正常的ABO血型抗原有一定差異，運(yùn)用吸收放散實(shí)驗(yàn)對(duì)亞型的鑒定非常重要，但是由于亞型種類較多再加上糖類抗原機(jī)構(gòu)的復(fù)雜性，進(jìn)一步的鑒定還需要結(jié)合基因分型的結(jié)果進(jìn)行綜合判斷，我們也相信還有新的亞型有待發(fā)現(xiàn)[15]。⑥實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)ABO血型時(shí)要建立標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)規(guī)范進(jìn)行檢測(cè)。在血型鑒定工作中，工作人員應(yīng)具有較高質(zhì)量意識(shí)和操作水平，正確使用檢測(cè)儀器，維護(hù)保養(yǎng)好檢測(cè)儀器，確保儀器檢測(cè)性能穩(wěn)定[16]。確保血型試劑在有效期內(nèi)使用，盡量保證實(shí)驗(yàn)所需的環(huán)境溫度及試劑保存溫度，以便排除因試劑本身質(zhì)量問(wèn)題引起的錯(cuò)誤。⑦建立差錯(cuò)管理體系，減少血型初篩錯(cuò)誤發(fā)生。2013年初我站結(jié)合相關(guān)法律法規(guī)和質(zhì)量體系文件增加了質(zhì)量管理規(guī)定，對(duì)除亞型外的血型初篩錯(cuò)誤問(wèn)題進(jìn)行獎(jiǎng)懲和通報(bào)，這對(duì)減少血型初篩錯(cuò)誤起到了很大的作用。2013年，我站采血總例數(shù)為83 388例，出現(xiàn)的血型初篩錯(cuò)誤46例，錯(cuò)型率為0.055%；2014年我站采血總例數(shù)為86 254例，出現(xiàn)的血型初篩錯(cuò)誤為35例，錯(cuò)型率為0.041%，無(wú)論從數(shù)量還是比率上，初篩血型錯(cuò)誤都呈現(xiàn)出大幅減少的趨勢(shì)。

綜上，ABO血型的定型準(zhǔn)確性是輸血安全一個(gè)基礎(chǔ)而重要的前提，向臨床提供的血液，ABO血型必須完全正確，這是采供血機(jī)構(gòu)的義務(wù)。通過(guò)對(duì)產(chǎn)生血型初篩錯(cuò)誤的原因進(jìn)行深入細(xì)致的調(diào)查分析，建立并實(shí)施有效的預(yù)防措施，不斷完善差錯(cuò)管理體系，減少血型初篩錯(cuò)誤，降低臨床輸血風(fēng)險(xiǎn)，提高血液采集、檢測(cè)質(zhì)量，確保臨床用血安全。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 徐國(guó)勝，黃可君. ABO血型初篩錯(cuò)誤原因調(diào)查及預(yù)防對(duì)策[J]. 廣州醫(yī)藥，2010，41（1）：51-53.

[2] 中華人民共和國(guó). 中國(guó)輸血技術(shù)操作規(guī)程（血站部分）[M].天津：天津科學(xué)技術(shù)出版社，1997：60-63.

[3] 肖星南. 輸血技術(shù)手冊(cè)[M]. 成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，1992：67-515.

[4] 王凱，郭俊勇，馬學(xué)冬. 采血前正定型ABO血型錯(cuò)誤調(diào)查分析[J]. 中國(guó)誤診學(xué)雜志，2010，28（10）：7051.

[5] 王英. 無(wú)償獻(xiàn)血初篩血型原因分析及預(yù)防措施[J]. 中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥雜志，2011，6（35）：265-266.

[6] 王明芬. 初篩血型不符原因分析及預(yù)防措施[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9（16）：2070-2071.

[7] 梁俊. 無(wú)償獻(xiàn)血者初篩血型錯(cuò)誤原因分析[J]. 中國(guó)輸血雜志，2014，3（36）：98-99.

[8] 劉麗. 血型初篩錯(cuò)誤原因分析及預(yù)防措施[J]. 臨床醫(yī)藥工程，2012，19（5）：748-749.

[9] 陳成進(jìn). 血型初篩錯(cuò)誤原因調(diào)查[J]. 中國(guó)輸血雜志，2011， 24（1）：61-62.

[10] 于云巖，呂延中，劉顯智，等. 街頭采血初檢血型錯(cuò)誤原因分析及預(yù)防[J]. 中國(guó)輸血雜志，2006，19（4）：307.

[11] 陳洪軍. 一種室溫下保存血型標(biāo)準(zhǔn)血清的方法[J]. 右江民族醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào)，1997，（2）：262-263.

[12] 蘭炯采. 冷激素綜合征三例報(bào)告[J]. 中國(guó)輸血雜志，1993， 6：99.

[13] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部. 血站質(zhì)量管理規(guī)范[S]. 衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2006]167號(hào).

[14] 葉應(yīng)妧，王毓三，申子瑜. 全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：246-249.

[15] 魏亞明，呂毅. 基礎(chǔ)輸血[M]. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：97-99.

[16] 胡繼征，陸瑞，李啟輝. 全自動(dòng)微板法檢測(cè)28397例獻(xiàn)血者ABO血型的統(tǒng)計(jì)分析[J]. 國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2003， 9（9）：75.

（收稿日期：2015-03-18）