曹曉

乙型肝炎血清兩對半及Hepatitis B virus-DNA濃度的檢測分析

曹曉

目的 探究乙型肝炎兩對半及乙肝病毒DNA（hepatitis B virus-DNA，HBV-DNA）的陽性率與病毒復(fù)制之間的關(guān)系，并探究其臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 選取進(jìn)行檢測乙肝病毒感染的血清212份，進(jìn)行回顧性分析，對乙型肝炎血清標(biāo)志物以及HBV-DNA進(jìn)行檢測，分析二者之間的關(guān)系，以及與病毒復(fù)制之間的聯(lián)系。結(jié)果 在212份血清中，大三陽模式[HbsAg+（乙肝表面抗原）、HbeAg+（乙型肝炎E抗原）、HBcAb+（乙肝核心抗體）]和小三陽模式[HBsAg+、 HBeAb+（乙型肝炎E抗體）、HBcAb+）]檢出率最高，分別占39.62%和39.15%，而其他各種模式檢出率均較低。在各種血清標(biāo)志物檢測模式中，大三陽HBV-DNA陽性率和病毒的平均載量均為最高，分別為98.81%和1.83×107copies/mL，而其他各模式中，HBV-DNA陽性率以及病毒的平均載量均較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=61.66，P＜0.05）。結(jié)論 乙肝病毒血清標(biāo)志物是進(jìn)行乙型肝炎篩查重要的手段，但不能直接反映乙肝病毒的復(fù)制水平，因此判斷乙型肝炎病毒的活躍程度時，要根據(jù)患者乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果以及HBV-DNA做出合理的診斷，并據(jù)此動態(tài)觀察患者的病情變化情況。

乙型肝炎；血清標(biāo)志物；Hepatitis B virus（HBV）-DNA

乙型肝炎（乙肝）是我國一種最常見的傳染病，在人群中感染率很高，而且乙肝是肝硬化和原發(fā)性肝癌的危險(xiǎn)因素，因此對于乙肝來說，早發(fā)現(xiàn)，早診斷，早治療，防止病情的慢性化就顯得比較重要[1]。對于乙肝患者的診斷來說，血清標(biāo)志物的檢測是一項(xiàng)基本的檢查項(xiàng)目，而且也發(fā)揮者重要的作用，但是血清標(biāo)志物兩對半不能直接反映乙肝病毒的復(fù)制水平，因而不能反映病情的嚴(yán)重程度和變化情況，而乙肝病毒核酸（HBV-DNA）能直接反映乙肝病毒的活躍程度，因而可以對病情做出較好的判斷[2]。因此，本研究對乙型肝炎兩對半及HBV-DNA的陽性率與病毒復(fù)制之間的關(guān)系及其臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行了探究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年6月～2013年6月在湖南省資興市疾病預(yù)防控制中心就診進(jìn)行乙肝血清標(biāo)志物和HBVDNA檢測的乙肝病毒感染患者212例，其中男143例，女69例，年齡8～75歲，平均（47.0±8.9）歲。

1.2 儀器 DA-7600實(shí)時熒光定量PCR儀（達(dá)安基因股份有限公司生產(chǎn)），ELX800酶標(biāo)儀（美國寶特公司生產(chǎn)）。

1.3 檢測方法 （1）HBV-M檢測：HBV血清標(biāo)志物的檢測即兩對半，包括乙肝表面抗原（HBsAg），乙肝表面抗體（HBsAb），乙肝e抗原（HBeAg），乙肝e抗體（HBeAb），乙肝核心抗體（HBcAb），檢測方法采用酶聯(lián)免疫吸附法，儀器使用

ELX800酶標(biāo)儀（美國寶特公司生產(chǎn)），試劑由北京萬泰公司提供，嚴(yán)格按照操作說明書進(jìn)行[3]。（2）HBV-DNA檢測：采用PCR法，儀器使用DA-7600實(shí)時熒光定量PCR儀（達(dá)安基因股份有限公司生產(chǎn)），試劑由深圳匹基公司提供，嚴(yán)格按照操作說明書進(jìn)行[4]。

1.4 觀察指標(biāo) HBV-M檢測指標(biāo)包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb，大三陽為HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+，小三陽為HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+，HBV-DNA濃度小于5.00×102copies/mL為陰性，大于5.00×102copies/mL為陽性[5]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，組間率（%）的比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乙肝血清標(biāo)志物檢測結(jié)果 在212份血清中，大三陽模式（HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+）例數(shù)最多，占39.62%，其次為小三陽模式（HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+），占39.15%，而其他各種模式檢出率均較低。見表1。

表1 乙肝血清標(biāo)志物檢測結(jié)果

2.2 HBV-DNA檢測結(jié)果 在各種血清標(biāo)志物檢測模式中以大三陽HBV-DNA陽性率最高，為98.81%，而且病毒的平均載量也最高，為1.83×107copies/mL，而其他各模式中，HBV-DNA陽性率以及病毒的平均載量均較低，大三陽模式的HBV-DNA陽性率以及病毒的平均載量明顯高于其他模式，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=61.66，P＜0.05）。見表2。

表2 HBV-DNA檢測結(jié)果

3 討論

采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測乙肝血清標(biāo)志物一直是臨床進(jìn)行乙肝患者篩查和診斷的重要手段，這種檢測方法簡單且易操作，從檢測結(jié)果來說，能反映乙肝病毒引起的免疫學(xué)變化和機(jī)體免疫反應(yīng)所處的狀態(tài)，能夠基本滿足臨床醫(yī)生的診斷需要[6]。但是該法是從機(jī)體的免疫水平間接反映乙肝病毒所處的狀態(tài)，因而有一定的間接性和局限性，從而使診斷的敏感性和特異性均有所降低。但是，隨著生物科學(xué)技術(shù)的告訴發(fā)展，聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（PCR）出現(xiàn)并逐漸應(yīng)用在醫(yī)學(xué)研究中，使HBV-DNA的定量檢測逐步實(shí)現(xiàn)，并廣泛應(yīng)用于臨床[7]。HBV-DNA的檢測能夠準(zhǔn)確反映機(jī)體內(nèi)病毒的復(fù)制水平，為明確診斷和改變治療方法提供可靠的依據(jù)。

從本組結(jié)果來看，在212份血清中，大三陽模式（HBsAg+、HBeAg+HBcAb+）和小三陽模式（HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+）檢出率最高，分別占39.62%和39.15%，而其他各種模式檢出率均較低，均在6%以下。從HBV-DNA陽性率水平來看，在各種血清標(biāo)志物檢測模式中，大三陽也最高，陽性率為98.81%，其病毒平均載量也明顯高于其它模式，為1.83×107copies/mL，其他各模式HBV-DNA陽性率以及病毒的平均載量均較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時HBeAg陽性的大三陽組，HBV-DNA陽性率和病毒平均載量均處于最高，這與文獻(xiàn)報(bào)道[8]的HBeAg陽性與HBV-DNA定量相符合。同時在基因水平上證實(shí)HbeAg可以在一定程度上反映HBV活躍復(fù)制及強(qiáng)傳染性，本研究結(jié)果印證這個結(jié)論。但是其他模式中，HBeAg均為陰性，但是HBV-DNA也有一定的陽性率，這可能因?yàn)镠BV基因組易突變，前C區(qū)及C區(qū)啟動因子突變可導(dǎo)致HbeAg陰性乙型肝炎，因此HBeAg陰性并不能代表病毒停止進(jìn)行復(fù)制，而HBeAg陽性時，也可能出現(xiàn)病毒復(fù)制的低水平而使HBVDNA檢測陰性。

綜上所述，在判斷乙肝患者的病情時，HBV-DNA能直接反映病毒的復(fù)制水平，可與血清標(biāo)志物的檢測綜合應(yīng)用。

[1] 劉素英，劉飛，郭曉林.乙型肝炎病毒三抗體陽性檢測HBV-DNA的臨床意義[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2013，19（21）：45-46.

[2] 熊麗紅，錢榕，李國良.HBsAg檢測陰性而HBV-DNA檢測陽性標(biāo)本乙肝兩對半結(jié)果模式分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，31（5）：496-497.

[3] 黃華泥，張業(yè)久，徐五星.HBV-DNA定量檢測結(jié)果與乙肝兩對半模式相關(guān)性分析[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2010，19（31）：3459-3460.

[4] 趙富鋒.HBV-DNA定量檢測與乙肝感染血清標(biāo)志物結(jié)果分析[J].基層醫(yī)學(xué)論壇，2013，17（10）：1228-1229.

[5] 孫春霞，任原珍.前S1抗原及乙肝兩對半與HBV-DNA的相關(guān)性分析[J].醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐，2013，26（19）：2621-2623.

[6] 翁厚光.血清標(biāo)志物與HBV-DNA含量的關(guān)系及臨床檢測意義[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2007，14（12）：54-55.

[7] 楊延龍，朱波，李湘瑛.乙肝病毒前S1抗原與乙肝兩對半及HBVDNA同步檢測的臨床意義[J].中外醫(yī)療，2013，28（13）：115-116.

[8] 楊慧.乙型肝炎血清兩對半檢測與HBV-DNA濃度的分析[J].中外醫(yī)療，2013，32（27）：188-190.

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.5.012

湖南 423400 湖南省資興市疾病預(yù)防控制中心 （曹曉）